匍伏堇挥发油、其提取纯化方法及所得抗肿瘤药物技术

本发明专利技术提供了一种匍伏堇挥发油、其提取纯化方法及所得抗肿瘤药物，涉及天然产物技术领域。该提取纯化方法包括以下步骤：将匍伏堇粉碎后，加水搅拌，并进行水蒸气蒸馏3‑6h，得含挥发油水系；向含挥发油水系中加入有机溶剂进行萃取，弃去分出的水层，向含挥发油的有机溶剂中加入脱水干燥剂脱水，过滤回收有机溶剂，得到干燥纯净的挥发油。本发明专利技术首次采用水蒸气蒸馏和有机萃取技术提取纯化得到匍伏堇挥发油，提取纯化方法工艺简单、成本低，经本发明专利技术制备工艺获得的挥发油含水率低，同时经试验验证对人肝癌细胞和人乳腺癌细胞具有高细胞毒活性，适合工业化生产应用。

【技术实现步骤摘要】
匍伏堇挥发油、其提取纯化方法及所得抗肿瘤药物
本专利技术涉及天然产物
，特别是涉及一种匍伏堇挥发油、其提取纯化方法及所得抗肿瘤药物。
技术介绍
匍伏堇(VioladiffusaGing)，属于堇菜科、堇菜属植物，别名蔓茎堇菜(七星莲)。以全草入药，用于肝炎，百日咳，目赤肿痛；外用治急性乳腺炎，疔疮，痈疖，带状疱疹，毒蛇咬伤，跌打损伤。主要分布在我国浙江省，生于荒坡、耕地、溪边、疏林下及路边半阴湿地。挥发油又称精油，是一类在常温下能挥发的、可随水蒸汽蒸馏的、与水不相混的油状液体的总称。大多数挥发油具有芳香气味。挥发油是一类重要的活性成分，临床上除直接应用主要含挥发油的生药外，还可应用从中精制的挥发油，如桉叶油、薄荷油等。挥发油具有发散解表、芳香开窍、理气止痛、祛风除湿、活血化瘀、祛寒温里、清热解毒、解暑祛秽、杀虫抗菌等作用，如薄荷油用驱风健胃，当归油镇痛，柴胡油退热，土荆芥油驱肠虫等，此外，挥发油还广泛应用于香料、食品与化妆品等的生产。目前，对于匍伏堇的研究较少，还未有关于匍伏堇挥发油提取与使用的报道。因此，随着天然产物精细化应用的逐步实施，以及为进一步的拓展匍伏堇的应用领域，有必要对匍伏堇挥发油的提取与使用开展研究。
技术实现思路
本专利技术提供一种匍伏堇挥发油、其提取纯化方法及所得抗肿瘤药物，该匍伏堇挥发油首次采用水蒸气蒸馏和有机萃取技术提取纯化得到，该提取纯化方法工艺简单、成本低，所得挥发油含水率低，且所得挥发油对HepG2和MCF-7细胞具有高细胞毒活性作用，适合于工业化生产应用。为了解决上述技术问题，本专利技术提供了一种匍伏堇挥发油的提取纯化方法，包括以下步骤：将匍伏堇粉碎后，加水搅拌，并进行水蒸气蒸馏3-6h，得含挥发油水系；向含挥发油水系中加入有机溶剂进行萃取，弃去分出的水层，向含挥发油的有机溶剂中加入脱水干燥剂脱水，过滤回收有机溶剂，得到干燥纯净的挥发油。上述技术方案中，在进行水蒸气蒸馏提取时，适宜的提取时间既能够保证尽可能从匍伏堇中提取出挥发油组分，又可以避免提取时间过长造成的资源浪费。本专利技术在实验过程中以挥发油提取率为考察指标，对水蒸气蒸馏提取的时间进行了优化，发现提取时间以3-6h为宜，例如可以为3、3.5、4、4.5、5、5.5、6h小时，这样可最大程度的将匍伏堇中的挥发油提取出来，同时避免资源的浪费。作为优选，所加入的匍伏堇和水的质量比为1：(2～5)，优选为1:3。可以理解的是，优化匍伏堇和水的质量比可确保能够将匍伏堇中的有效成分尽可能地溶于水中，为后续蒸馏提取打好基础。作为优选，粉碎后的匍伏堇的粒径为50-100目，优选为60目。可以理解的是，匍伏堇粉粹目数的大小会影响挥发油的提取率，粉碎颗粒过大，会使水蒸汽从原料间隙流出，使得提取率降低，且浪费资源；而粉粹的粒径过小，则使得水蒸汽无法均匀透过原料，导致蒸汽从冲开的原料中逸出，同样导致提取率不高。经优选实验发现，匍伏堇粉粹的目数以50-100目为宜，可以保证较高的挥发油提取率。在一优选方案中，匍伏堇粉粹的目数为60目，相对于其他的粉碎目数取得了最优的挥发油提取率。作为优选，所述有机溶剂为乙酸乙酯、丙烯酸乙酯、正己烷和乙醚中的至少一种；所述脱水干燥剂为无水硫酸钠或无水硫酸钙。可以理解的是，由于关于匍伏堇有效成分的研究很少，对于匍伏堇挥发油的提取更是技术上的空白，因此，如何选择提取方法以及如何选择有机溶剂是匍伏堇挥发油提取的难点所在。本专利技术在实验过程中对多种不同极性的有机溶剂进行了筛选，结果发现：以乙酸乙酯、丙烯酸乙酯、正己烷、乙醚作为有机溶剂，匍伏堇挥发油的提取率较优。作为优选，所述有机溶剂为乙醚，所述脱水干燥剂为无水硫酸钠。可以理解的是，经优选实验发现，以乙醚作为有机溶剂，相较于其他的有机溶剂具有更好的挥发油提取率。本专利技术还提供了一种根据上述任一项技术方案所述的提取纯化方法制备得到的匍匐茎挥发油，所述匍匐茎挥发油的化学成分主要包括：3-羟基辛烯、芳樟醇、2-十三烷酮、新臭根子草醇、新植二烯、六氢金合欢基丙酮、(E)-11-十六碳烯-1-醇和异植醇。作为优选，所述匍匐茎挥发油对HepG2细胞和MCF-7细胞具有高细胞毒活性作用。作为优选，所述匍匐茎挥发油对HepG2细胞和MCF-7细胞分别在IC50为22.57μg/mL和18.22μg/mL的条件下具有高细胞毒活性作用。本专利技术还提供了一种抗肿瘤药物，以上述技术方案所述的匍匐茎挥发油为主要有效成分，所述细胞为HepG2细胞和/或MCF-7细胞。与现有技术相比，本专利技术的优点和积极效果在于：本专利技术首次采用水蒸气蒸馏和有机萃取技术提取纯化得到匍伏堇挥发油，该提取纯化方法工艺简单，成本低，制备工艺中的蒸馏水和有机溶剂能够重复利用，经本专利技术制备工艺获得的挥发油含水率低，同时经试验验证匍伏堇挥发油对HepG2和MCF-7细胞具有高细胞毒活性作用，适合于工业化生产应用。具体实施方式下面将对本专利技术具体实施例中的技术方案进行详细、完整的描述。显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术总的技术方案的部分具体实施方式，而非全部的实施方式。基于本专利技术的总的构思，本领域普通技术人员所获得的所有其他实施例，都落于本专利技术保护的范围。实施例1匍伏堇挥发油的提取纯化方法S1：取400g新鲜匍伏堇洗净晾干后粉粹至粒径为60目，加入1200g蒸馏水后搅拌进行水蒸汽蒸馏，蒸馏提取时间为4-5h，得含挥发油水系；S2：向含挥发油水系中加入乙醚进行萃取，弃去分出的水层，向含挥发油的乙醚溶液中加入无水硫酸钠脱水，过滤回收乙醚，即得到干燥纯净的挥发油，提取率为1.42％，挥发油中的含水率为0.42％。实施例2匍伏堇挥发油的提取纯化方法S1：取400g新鲜匍伏堇洗净晾干后粉粹至粒径为50目，加入800g蒸馏水后搅拌进行水蒸汽蒸馏，蒸馏提取时间为5-6h，得含挥发油水系；S2：向含挥发油水系中加入乙醚进行萃取，弃去分出的水层，向含挥发油的乙醚溶液中加入无水硫酸钠脱水，过滤回收乙醚，即得到干燥纯净的挥发油，提取率为1.39％，挥发油中的含水率为0.39％。实施例3匍伏堇挥发油的提取纯化方法S1：取400g新鲜匍伏堇洗净晾干后粉粹至粒径为100目，加入1600g蒸馏水后搅拌进行水蒸汽蒸馏，蒸馏提取时间为3-4h，得含挥发油水系；S2：向含挥发油水系中加入乙醚进行萃取，弃去分出的水层，向含挥发油的乙醚溶液中加入无水硫酸钠脱水，过滤回收乙醚，即得到干燥纯净的挥发油，提取率为1.37％，挥发油中的含水率为0.41％。实施例4匍伏堇挥发油的提取纯化方法S1：取400g新鲜匍伏堇洗净晾干后粉粹至粒径为80目，加入2000g蒸馏水后搅拌进行水蒸汽蒸馏，蒸馏提取时间为3-4h，得含挥发油水系；S2：向含挥发油水系中加入乙醚进行萃取，弃去分出的水层，向含挥发油的乙醚溶液中加入无水硫酸钠脱水，过滤回收乙醚，即得到干燥纯净的挥发油，提取率为1.45％，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.匍伏堇挥发油的提取纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：/n将匍伏堇粉碎后，加水搅拌，并进行水蒸气蒸馏3-6h，得含挥发油水系；/n向含挥发油水系中加入有机溶剂进行萃取，弃去分出的水层，向含挥发油的有机溶剂中加入脱水干燥剂脱水，过滤回收有机溶剂，得到干燥纯净的挥发油。/n

【技术特征摘要】
1.匍伏堇挥发油的提取纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：
将匍伏堇粉碎后，加水搅拌，并进行水蒸气蒸馏3-6h，得含挥发油水系；
向含挥发油水系中加入有机溶剂进行萃取，弃去分出的水层，向含挥发油的有机溶剂中加入脱水干燥剂脱水，过滤回收有机溶剂，得到干燥纯净的挥发油。


2.根据权利要求1所述的提取纯化方法，其特征在于，所加入的匍伏堇和水的质量比为1：(2～5)，优选为1:3。


3.根据权利要求1所述的提取纯化方法，其特征在于，粉碎后的匍伏堇的粒径为50-100目，优选为60目。


4.根据权利要求1所述的提取纯化方法，其特征在于，所述有机溶剂为乙酸乙酯、丙烯酸乙酯、正己烷和乙醚中的至少一种；所述脱水干燥剂为无水硫酸钠或无水硫酸钙。


5.根据权利要求4所述的提取纯化方法，其特征在于，所述有机溶...

【专利技术属性】
技术研发人员：沙沙，冯麟杰，邢政，赵丽华，
申请(专利权)人：山东大学，
类型：发明
国别省市：山东;37