一种提高刺梨发酵果饮抗氧化功效的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种提高刺梨发酵果饮抗氧化功效的制备方法。首先取产朊假丝酵母和扣囊复膜孢酵母两种菌种，分别用接种环各取少量菌用100μL无菌水稀释，然后分别涂布于YM固体培养基上进行培养，培养后分别取所得单菌落各转接到YM液体培养基中进行菌种制备，得到活化的产朊假丝酵母菌和扣囊复膜孢酵母菌；将得到的两种活化酵母菌依次接种于制备好的刺梨汁中进行摇床培养，培养后完成发酵，测定刺梨多糖含量，离心过滤，收集上清液，得到刺梨果饮。本发明专利技术利用优良的酵母菌种提高多糖活性，从而增强抗氧化能力，并改善了刺梨饮品的口感。

【技术实现步骤摘要】
一种提高刺梨发酵果饮抗氧化功效的制备方法一、
：本专利技术属于食品发酵
，尤其是涉及一种提高刺梨发酵果饮抗氧化功效的制备方法。二、
技术介绍
：刺梨(Rosaroxbunghii)为蔷薇科多年生落叶灌木缫丝花的果实，又名刺莓果、木梨子，别名刺菠萝，是滋补健身的食药两用营养珍果。生于海拔500～2500米的向阳山坡、沟谷、路旁以及灌木丛中，是贵州、鄂西山区、湘西、凉山、冕宁山区等地的天然野果。刺梨是一种天然的药食两用植物，刺梨鲜果中含有丰富的维生素、多糖、有机酸、酚类、氨基酸和微量元素等营养成分。研究表明，刺梨中活性物质含量都显著高于这些常见水果蔬菜，其体外抗氧化能力，是常见水果蔬菜的10～60倍。随着生活节奏的增加，环境的变化以及年龄的增长，机体在活动和代谢过程中会产生较多的氧自由基，但对于健康机体而言其维持着一定的平衡关系，当其平衡被打破后则有着较强的破坏性，对机体的生物膜系统造成损伤，导致慢性疾病的发生。因此，从天然资源中提取多糖等功效组分作为自由基清除剂，尤其从果蔬废弃资源中提取活性成分，不仅能够提高果蔬资源的综合利用，还为食品添加剂的研制及进一步推广应用提供依据。另外，刺梨果实中单宁和有机酸含量较高，生食酸涩，口感较差，因此比较适宜进行二次开发，开发研究具有抗氧化功效的刺梨发酵果饮是一种比较好的选择。三、
技术实现思路
：本专利技术要解决的技术问题是：基于刺梨果实是滋补健身的食药两用营养珍果，为了更好地食用，本专利技术提供一种提高刺梨发酵果饮抗氧化功效的制备方法。本专利技术技术方案采用两种非酿酒酵母作为发酵菌种进行混合发酵，采用的两种酵母菌种为产朊假丝酵母(Candidautilis)菌株和扣囊复膜孢酵母(Saccharomycopsisfibuligera)菌株，本专利技术利用优良的酵母菌种提高多糖活性，从而增强抗氧化能力，并改善了刺梨饮品的口感。为了解决上述问题，本专利技术采取的技术方案是：本专利技术提供一种提高刺梨发酵果饮抗氧化功效的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：(1)取4℃冰箱斜面试管保存的产朊假丝酵母和扣囊复膜孢酵母两种菌种，分别用接种环在两种菌斜面上的菌落表层轻点一下粘附上菌0.01～0.05g，各用100μL无菌水进行稀释，稀释后采用涂布棒分别涂布于YM固体培养基上，然后分别在温度27～31℃下培养48～60h，培养后取所得单菌落分别转接到YM液体培养基中进行菌种制备，得到活化的产朊假丝酵母菌和扣囊复膜孢酵母菌；(2)选取成熟的刺梨果实，清洗干净，然后采用榨汁机榨汁破碎，在室温条件下浸渍过夜，然后在温度为121℃下灭菌15～20min后备用；(3)将步骤(1)所得活化的产朊假丝酵母菌和扣囊复膜孢酵母菌依次接种于步骤(2)制备好的刺梨汁中，于温度为26～28℃下，180rpm摇床培养5～7d，培养后完成发酵，测定刺梨多糖含量，离心过滤，收集上清液，得到刺梨果饮。根据上述的提高刺梨发酵果饮抗氧化功效的制备方法，步骤(1)中所述YM液体培养基的制作方法：以1L用量为基准，称取酵母浸粉2.5～3g、蛋白胨4～5g、葡萄糖8～10g和麦芽提取物2.5～3g，将称取的各种用料加入2L三角瓶中进行混合，混合均匀后加入水补足1L，然后在温度121℃下灭菌15～20min，得到YM液体培养基，室温静置待用；所述YM固体培养基的制作方法：以1L用量为基准，称取酵母浸粉2.5～3g、蛋白胨4～5g、葡萄糖8～10g、麦芽提取物2.5～3g和琼脂粉18～20g，将称取的各种用料加入2L三角瓶中进行混合，混合均匀后加入水补足1L，然后在温度121℃下灭菌15～20min，灭菌后倒入90mm培养皿中，室温静置凝固后得到YM固体培养基，室温静置待用。根据上述的提高刺梨发酵果饮抗氧化功效的制备方法，步骤(1)中所述培养后取所得单菌落分别转接到YM液体培养基中进行菌种制备时，两种单菌落的用量均为0.01～0.05g、YM液体培养基的用量均为200mL。根据上述的提高刺梨发酵果饮抗氧化功效的制备方法，步骤(1)中所述YM液体菌培养基中进行菌种制备的培养条件为：温度为27～31℃、转速为180～220rpm，培养24～30h至对数生长期，用分光光度计测定菌量浓度OD600为2.0～2.2。根据上述的提高刺梨发酵果饮抗氧化功效的制备方法，步骤(3)中所述所得活化的产朊假丝酵母菌和扣囊复膜孢酵母菌依次接种于步骤(2)制备好的刺梨汁中时，两种酵母菌接种用量比例为1：1。根据上述的提高刺梨发酵果饮抗氧化功效的制备方法，步骤(3)中所述所得活化的产朊假丝酵母菌和扣囊复膜孢酵母菌依次接种于步骤(2)制备好的刺梨汁中时，活化的产朊假丝酵母菌和扣囊复膜孢酵母菌的用量均为刺梨果汁体积的2～5％。根据上述的提高刺梨发酵果饮抗氧化功效的制备方法，步骤(3)中所述离心过滤时，离心的转速为3000～5000rpm，时间为10～30min。本专利技术的积极有益效果：1、本专利技术通过两种非酿酒酵母进行混合发酵，其中，产朊假丝酵母发酵密度高，发酵中其蛋白质和维生素B的含量均比传统酿酒酵母高；扣囊复膜酵母具有较强的糖化能力和产蛋白酶能力，二者相结合，既能通过发酵提高刺梨多糖活性、从而增强抗氧化能力，也有助于改善刺梨果饮的口感特征。2、本专利技术通过制备方法的改进，将与发酵密度高的产朊假丝酵母与扣囊复膜酵母进行了很好的结合，共培养时采用好氧发酵，产朊假丝酵母和扣囊复膜酵母利用原料中的单糖、双糖等小分子糖，将一些组分转化并产生活性代谢物质。通过抗氧化实验检测得出：利用产朊假丝酵母与扣囊复膜酵母这两种酵母混合发酵后，刺梨汁的多糖在DPPH清除率上较之单一传统的酿酒酵母提高了1倍以上，铁离子还原力上提高了3倍以上。从而达到提高刺梨多糖活性、增强抗氧化能力的目的。另外，通过发酵也降低刺梨汁本身的苦涩感，提升了口感。从而实现了刺梨功能性果饮的抗氧化能力提高和口感提升的发酵的作用。3、本专利技术是一种混合发酵提高抗氧化功效的发酵制备方法。本专利技术制备方法简单易行，有效地提高了刺梨果饮抗氧化能力并改善口感，满足消费者对高品质的需求，同时也避免了市场上刺梨果饮的同质性恶性竞争。4、本专利技术通过利用两种酵母进行混合发酵，从而有助于提高刺梨果饮的抗氧化功效。四、具体实施方式：以下结合实施例进一步阐述本专利技术，但并不限制本专利技术技术方案保护的范围。实施例1：一种提高刺梨发酵果饮抗氧化功效的制备方法，该制备方法的详细步骤如下(采用单酵母菌种进行发酵，其为产朊假丝酵母(candidautilis)菌株)：(1)取4℃冰箱斜面试管保存的产朊假丝酵母菌种，用接种环在菌斜面上的菌落表层轻点一下粘附上菌0.05g，然后用100μL无菌水进行稀释，稀释后采用涂布棒涂布于加有YM固体培养基的90mm培养皿上，接着在温度28℃下培养48h，培养后取所得单菌落0.05g转接到200mLYM液体培养基中进行菌种制备，菌种制备条件为：温度为28℃、转速为180rpm本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种提高刺梨发酵果饮抗氧化功效的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：/n(1)取4℃冰箱斜面试管保存的产朊假丝酵母和扣囊复膜孢酵母两种菌种，分别用接种环在两种菌斜面上的菌落表层轻点一下粘附上菌0.01～0.05g，各用100μL无菌水进行稀释，稀释后采用涂布棒分别涂布于YM固体培养基上，然后分别在温度27～31℃下培养48～60h，培养后取所得单菌落分别转接到YM液体培养基中进行菌种制备，得到活化的产朊假丝酵母菌和扣囊复膜孢酵母菌；/n(2)选取成熟的刺梨果实，清洗干净，然后采用榨汁机榨汁破碎，在室温条件下浸渍过夜，然后在温度为121℃下灭菌15～20min后备用；/n(3)将步骤(1)所得活化的产朊假丝酵母菌和扣囊复膜孢酵母菌依次接种于步骤(2)制备好的刺梨汁中，于温度为26～28℃下，180rpm摇床培养5～7d，培养后完成发酵，测定刺梨多糖含量，离心过滤，收集上清液，得到刺梨果饮。/n

【技术特征摘要】
1.一种提高刺梨发酵果饮抗氧化功效的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：
(1)取4℃冰箱斜面试管保存的产朊假丝酵母和扣囊复膜孢酵母两种菌种，分别用接种环在两种菌斜面上的菌落表层轻点一下粘附上菌0.01～0.05g，各用100μL无菌水进行稀释，稀释后采用涂布棒分别涂布于YM固体培养基上，然后分别在温度27～31℃下培养48～60h，培养后取所得单菌落分别转接到YM液体培养基中进行菌种制备，得到活化的产朊假丝酵母菌和扣囊复膜孢酵母菌；
(2)选取成熟的刺梨果实，清洗干净，然后采用榨汁机榨汁破碎，在室温条件下浸渍过夜，然后在温度为121℃下灭菌15～20min后备用；
(3)将步骤(1)所得活化的产朊假丝酵母菌和扣囊复膜孢酵母菌依次接种于步骤(2)制备好的刺梨汁中，于温度为26～28℃下，180rpm摇床培养5～7d，培养后完成发酵，测定刺梨多糖含量，离心过滤，收集上清液，得到刺梨果饮。


2.根据权利要求1所述的提高刺梨发酵果饮抗氧化功效的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述YM液体培养基的制作方法：以1L用量为基准，称取酵母浸粉2.5～3g、蛋白胨4～5g、葡萄糖8～10g和麦芽提取物2.5～3g，将称取的各种用料加入2L三角瓶中进行混合，混合均匀后加入水补足1L，然后在温度121℃下灭菌15～20min，得到YM液体培养基，室温静置待用；
所述YM固体培养基的制作方法：以1L用量为基准，称取酵母浸粉2.5～3g、蛋白胨4～5g、葡萄糖8～10g、麦芽提取物2.5～3g和琼脂粉18～20g，将称取的各种用料加...

【专利技术属性】
技术研发人员：谢晓阳，范毅，王伟，景炳年，魏磊，周雍，刘雨晴，韩红园，宁二娟，
申请(专利权)人：河南省纳普生物技术有限公司，河南省科学院，
类型：发明
国别省市：河南;41