一种需氧菌性阴道炎检测试纸及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种需氧菌性阴道炎检测试纸及其制备方法，包括在反应基板上，设置多个载体，多个载体在保留一个空白块后，剩余载体通过分别浸润β

【技术实现步骤摘要】
一种需氧菌性阴道炎检测试纸及其制备方法


[0001]本专利技术涉及体外诊断试剂领域，尤其涉及一种需氧菌性阴道炎检测试纸及其制备方法。

技术介绍

[0002]比利时著名妇产科专家Donders等于2011年综述需氧菌性阴道炎(Aerobic Vaginitis，AV)以菌群失衡、阴道炎症表现为特征。临床上阴道乳杆菌减少或消失，为需氧菌所取代，引起阴道不同程度的炎症。研究发现AV与BV类似，极易造成误诊，两者均可引起妇科、产科等相关疾病，如盆腔炎、早产、新生儿低体重、死胎、胎儿宫内感染和新生儿智力障碍等。
[0003]需氧菌性阴道炎是由需氧菌繁殖伴产过氧化氢的乳酸杆菌的缺失或减少，导致阴道黏膜充血、水肿，产生脓性分泌物的阴道炎症。常见病原菌包括B族链球菌、葡萄球菌、大肠埃希菌及肠球菌等需氧菌。AV阴道微生态表现：乳杆菌减少；优势菌多样化，常为需氧菌如革兰阳性链球菌、革兰阳性球菌、革兰阴性球菌或革兰阴性杆菌等；pH值常常大于4.5；过氧化氢(+)；白细胞计数大于10个/HP；Donders评分≥3分；β
‑
葡萄糖醛酸苷酶或凝固酶阳性。
[0004]国内外用于AV诊断的方法多为镜检法Donders评分或是微生物培养法，这两种方法费时，受操作人员的主观因素影响比较大，对临床常规或是问诊检验不便。目前市面上有采用干化学分析技术进行检测，如北京中生金域的专利技术专利《一种检测阴道分泌物中需氧菌的试剂盒及其制备方法》(专利申请号：200910244267)指出β
‑
葡萄糖醛酸苷酶+凝固酶对AV可以有效诊断。但该专利技术只涉及β
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葡萄糖醛酸苷酶及凝固酶两个项目，对白细胞酯酶(白细胞)、过氧化氢(乳酸杆菌)、PH值并没有涉及，检测不全面，且凝固酶法为两步法需要外加显色剂，反应需要孵育15min,操作不简便，检测时间长，有待改善。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一种需氧菌性阴道炎检测试纸及其制备方法，旨在解决现有检测方法检测不全面，且凝固酶法为两步法需要外加显色剂，反应需要孵育15min使得操作不简便的问题。
[0006]为实现上述目的，第一方面，本专利技术提供了一种需氧菌性阴道炎检测试纸，包括反应基板和多个载体，多个所述载体在保留一个空白块后，剩余所述载体通过分别浸润β
‑
葡萄糖醛酸苷酶溶液、凝固酶溶液、过氧化氢溶液、白细胞酯酶溶液、pH值溶液后经干燥制得，多个所述载体固定设置在反应基板上。
[0007]其中，所述载体为试纸块或反应孔。
[0008]第二方面，本专利技术提供一种需氧菌性阴道炎检测试纸的制备方法，包括：制备β
‑
葡萄糖醛酸苷酶载体；制备凝固酶载体；制备白细胞酯酶载体；制备过氧化氢载体；制备pH值载体；将所有载体分别附着到反应基板上，完成制备。
[0009]其中，所述制备β
‑
葡萄糖醛酸苷酶载体的具体步骤是：
[0010]将底物溶解于PH值为4
‑
9、浓度为0.5mM
‑
10mM的缓冲液，并加入1g/L
‑
10g/L稳定剂，0.5g/L
‑
5g/L反应促进剂形成A液，所述底物为5
‑
溴
‑4‑
氯
‑3‑
吲哚
‑
β
‑
D
‑
葡萄糖醛酸苷钠盐、4
‑
硝基苯基
‑
β
‑
D
‑
吡喃葡萄糖苷(PNPG)、5
‑
溴
‑4‑
氯
‑3‑
吲哚基
‑
β
‑
D
‑
吡喃葡萄糖苷、酚酞葡萄糖醛酸苷中一种或是多种，所述缓冲液为PBS缓冲液，柠檬酸
‑
柠檬酸三钠缓冲液，柠檬酸
‑
TRIS缓冲液，硼酸
‑
硼砂缓冲液，乙酸钠缓冲液中的一种，所述反应促进剂为氯化镁、氯化锌、氯化钙、乙二醇、海藻酸钠、戊二醛、蔗糖中的一种或是多种；将重氮盐类显色剂溶于含有0.5g/L
‑
10g/L有机酸溶液中形成B液，所述重氮盐类显色剂为2
‑
甲氧基
‑4‑
吗啉基苯重氮盐、2
‑
乙氧基
‑4‑
吗啉基苯重氮盐、4
‑
甲氧基苯重氮盐中的一种；将A液与B液按照1:1进行混合，形成β
‑
葡萄糖醛酸苷酶溶液；将β
‑
葡萄糖醛酸苷酶溶液附着于载体上并进行干燥。
[0011]其中，所述制备凝固酶载体的具体步骤是：将底物溶解于PH值为3
‑
7浓度为0.1mM
‑
5mM的缓冲液缓冲并加入稳定剂溶解完成后形成A液，所述底物为甘氨酰
‑
精氨酰
‑4‑
甲氧基
‑
β
‑
萘胺，所述稳定剂为海藻糖与蔗糖的混合溶液，所述缓冲液为盐酸
‑
TRIS缓冲液；将重氮盐类显色剂溶于含有0.5g/L
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10g/L有机酸溶液中形成B液，所述重氮盐类显色剂为固紫B盐、固蓝BB盐、固蓝RR盐、固红B盐中一种；将载体于凝固酶A溶液中浸润干燥后再放入凝固酶B溶液中浸润后干燥制得。
[0012]其中，所述制备白细胞酯酶载体的具体步骤是：将底物溶解于PH值为6
‑
9、浓度为0.1mM
‑
2mM的缓冲液并加入1g/L
‑
10g/L稳定剂，0.5g/L
‑
5g/L反应促进剂形成A液，所述底物为吲哚酚酯类及其衍生物，吡咯酯及其吡咯氨基酸酯衍生物中的一种或是一种以上，所述的稳定剂为β
‑
环糊精，甘露醇、乙二醇、甘油、乙二胺四乙酸钠盐、乙二胺四乙酸钾盐中的一种或是一种以上；将重氮盐类显色剂溶于含有0.5g/L
‑
10g/L有机酸有机溶剂中并加入0.1g/L
‑
5g/L表面活性剂形成B液；将A液与B液按照1:1～9:1比例进行混合，形成白细胞酯酶溶液；将载体在白细胞酯酶溶液中浸润后进行干燥。
[0013]其中，所述制备过氧化氢载体的具体步骤是：将过氧化物酶或辣根过氧化物酶溶解于PH值为5
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8、浓度为0.1mM
‑
2mM的缓冲液并加入0.1g/L～0.6g/L显色剂，0.1g/L～1.0g/L反应促进剂制成过氧化氢试溶液，所述显色剂为4
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氨基安替比林、TMB、DHBS、1，5
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二甲基
‑2‑
苯基
‑4‑
氨基
‑3‑
吡唑酮(4
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AAP)；所述反应促进剂为N
‑
乙基－N－(2
‑
羟基－3－磺本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种需氧菌性阴道炎检测试纸，其特征在于，包括反应基板和多个载体，多个所述载体在保留一个空白块后，剩余所述载体通过分别浸润β
‑
葡萄糖醛酸苷酶溶液、凝固酶溶液、过氧化氢溶液、白细胞酯酶溶液、pH值溶液后经干燥制得，多个所述载体固定设置在反应基板上。2.如权利要求1所述的一种需氧菌性阴道炎检测试纸，其特征在于，所述载体为试纸块或反应孔。3.一种需氧菌性阴道炎检测试纸的制备方法，应用于制取如权利要求1
‑
2任意一项所述的一种需氧菌性阴道炎检测试纸，其特征在于，包括：制备β
‑
葡萄糖醛酸苷酶载体；制备凝固酶载体；制备白细胞酯酶载体；制备过氧化氢载体；制备pH值载体；将所有载体分别附着到反应基板上，完成制备。4.如权利要求3所述的一种需氧菌性阴道炎检测试纸的制备方法，其特征在于，所述制备β
‑
葡萄糖醛酸苷酶载体的具体步骤是：将底物溶解于PH值为4
‑
9、浓度为0.5mM
‑
10mM的缓冲液，并加入1g/L
‑
10g/L稳定剂，0.5g/L
‑
5g/L反应促进剂形成A液，所述底物为5
‑
溴
‑4‑
氯
‑3‑
吲哚
‑
β
‑
D
‑
葡萄糖醛酸苷钠盐、4
‑
硝基苯基
‑
β
‑
D
‑
吡喃葡萄糖苷(PNPG)、5
‑
溴
‑4‑
氯
‑3‑
吲哚基
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β
‑
D
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吡喃葡萄糖苷、酚酞葡萄糖醛酸苷中一种或是多种，所述缓冲液为PBS缓冲液，柠檬酸
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柠檬酸三钠缓冲液，柠檬酸
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TRIS缓冲液，硼酸
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硼砂缓冲液，乙酸钠缓冲液中的一种，所述反应促进剂为氯化镁、氯化锌、氯化钙、乙二醇、海藻酸钠、戊二醛、蔗糖中的一种或是多种；将重氮盐类显色剂溶于含有0.5g/L
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10g/L有机酸溶液中形成B液，所述重氮盐类显色剂为2
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甲氧基
‑4‑
吗啉基苯重氮盐、2
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乙氧基
‑4‑
吗啉基苯重氮盐、4
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甲氧基苯重氮盐中的一种；将A液与B液按照1:1进行混合，形成β
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葡萄糖醛酸苷酶溶液；将β
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葡萄糖醛酸苷酶溶液附着于载体上并进行干燥。5.如权利要求3所述的一种需氧菌性阴道炎检测试纸的制备方法，其特征在于，所述制备凝固酶载体的具体步骤是：将底物溶解于PH值为3
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7浓度为0.1mM
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5mM的缓冲液缓冲并加入稳定剂溶解完成后形成A液，所述底物为甘氨酰
‑
精氨酰

【专利技术属性】
技术研发人员：蒋庆姣，刘云鹏，潘军全，粟传军，
申请(专利权)人：桂林优利特医疗电子有限公司，
类型：发明
国别省市：