一种多囊卵巢综合征并发代谢综合征预测标记物及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一组可用于检测多囊卵巢综合征并发代谢综合征的生物标志物，并进一步提供包含该等生物标志物的用于检测多囊卵巢综合征并发代谢综合征的试剂盒及其使用方法，可用于对多囊卵巢综合征并发代谢综合征发病风险的快速高效诊断。

【技术实现步骤摘要】
一种多囊卵巢综合征并发代谢综合征预测标记物及其应用
本专利技术属于生物检测
，具体涉及多囊卵巢综合征诊断检测用的生物标志物和试剂盒领域。
技术介绍
多囊卵巢综合征（polycysticovarysyndrome，PCOS）是一种病因不明的复杂异质性疾病，是育龄女性中最常见的生殖内分泌疾病，是无排卵型不孕发生最主要的原因。由于该病诊断标准的不一致及种族差异，导致各国/地区不同研究报道的患病率存在较大差异，一般在5%~10%。根据国际较为广泛应用的鹿特丹诊断标准，2007年至2011年期间北京大学第三医院牵头的“十二五”国家科技支撑计划通过对来自中国10个省市的15924名19～45岁的育龄妇女进行大规模的分层随机抽样调查，发现中国育龄妇女中PCOS患病率为5.6%，估计全国约有1500万患者。除了育龄期的生殖障碍，PCOS患者往往伴有长期、明显的代谢异常，包括肥胖、胰岛素抵抗、糖耐量受损、血脂异常等。PCOS妇女中肥胖的发生率30%~60%，且与年龄和体重相匹配的对照人群相比，PCOS患者更容易发生腹型肥胖，瘦型PCOS患者也容易出现腹部脂肪堆积。PCOS患者合并血脂异常的比例高达70%，主要表现为高密度脂蛋白（highdensitylipoprotein,HDL）降低，而低密度脂蛋白（lowdensitylipoprotein,LDL）、甘油三酯（triglyceride,TG）和胆固醇（totalcholesterol,T-CHO）浓度升高。高胰岛素血症和胰岛素抵抗（insulinresistance,IR）是PCOS患者的另一重要特征，PCOS患者中合并IR的比例高达50%~70%，同时PCOS患者糖耐量受损（impairedglucoseintolerance,IGT）患病率为31%~35%，这些都远高于正常人群中的患病率。基于以上代谢问题，PCOS患者发生代谢综合征（metabolicsyndrome，MetS）的风险显著升高，同时MetS发生又进一步增加远期II型糖尿病和心脑血管疾病的发病风险。PCOS被视为是MetS的前兆，糖脂代谢异常是联系两者的桥梁。代谢综合征是以中心性肥胖、高血压、高血脂和高血糖为特征的综合群。研究报道的PCOS患者中代谢综合征的发生率及表型特点在不同种族人群中有所差异。美国地区PCOS妇女中合并MetS的发生率高达43-46%；在德国，31%PCOS妇女发生MetS，其最显著特征为向心性型肥胖；南亚PCOS妇女发生MetS比率为30.6%，而对照人群中只有6.34%；印度地区所报道的PCOS妇女中合并MetS的发生率为37.5%；在中国，西南部地区妇女中报道的MetS的比例则为25.62%，香港地区PCOS妇女中MetS发生率为24.9%，显著高于对照人群中3.1%的MetS发生率。本研究团队前期开展的中国10省市育龄妇女大规模随机抽样调查结果显示，PCOS患者MetS发生率为18.2%，且在40岁以上人群中，PCOS患者中MetS发生率增加至47.6%，明显高于对照组24.4%，这表明随着年龄升高，PCOS患者发生MetS的风险增加程度更为显著。因此，PCOS不仅是育龄期生殖系统问题，作为一种长期代谢紊乱性疾病，PCOS几乎影响女性一生健康，特别是长期生活质量，该疾病无法治愈，但可以通过监测及调整机体内分泌代谢紊乱状态，控制代谢疾病发生风险。尽管目前临床越来越重视对PCOS患者的代谢筛查，但由于MetS临床表现多样，目前尚缺乏全球统一诊断标准，不同的学术机构不断提出、修订MetS诊断标准，目前应用较为广泛的是2005年美国国家胆固醇教育计划(NCEP)成人组修订的标准（ATPⅢ2005），满足以下5项中3项及以上即可诊断为MetS，针对华人女性指标分别为：①腰围>80cm；②甘油三酯(TG)1.7mmol/L(150mg/dl)，或已接受药物治疗；③高密度脂蛋白(HDL-C)<1.3mmol/L(50mg/dl)，或已接受药物治疗；④血压异常，收缩压130mmHg，或舒张压85mmHg；⑤空腹血糖(FPG)异常，FPG5.6mmol/L(100mg/dl)，或已接受药物治疗。以上临床常规检测指标较多，除了腰围、血压外，还包括空腹血糖、血脂（胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白）检测，且判断其是否发生MetS的标准较为复杂，目前尚缺乏快速、便捷的代谢风险预测工具。
技术实现思路
为了解决现有技术中存在的问题，本专利技术应用靶向代谢组学方法进行PCOS患者全谱氨基酸（50种）水平定量检测，筛选出能够检测多囊卵巢综合征患者是否发生代谢综合征的氨基酸标记物。基于回归模型构建风险评分工具，方便临床应用。本专利技术的第一个方面，提供了一组可用于多囊卵巢综合征并发代谢综合征诊断的生物标志物，所述生物标志物包括至少8种特定氨基酸，所述特定氨基酸为丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、酪氨酸、天冬酰胺、谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸。在一种实施方案中，本专利技术生物标志物指受试体生物样本中存在的代谢物成分，受试体可以是人类或哺乳动物。生物样本可选自来源于受试体的血浆或血清。优选的，所述生物样本为血清。本专利技术的第二个方面，提供将所述的生物标志物用于制备诊断或检测PCOS患者并发代谢综合征的试剂盒的用途，所述试剂盒的使用方法包括，可通过测试受试体血浆或血清中代谢物的水平，任选地结合临床指标，诊断或检测PCOS患者是否并发代谢综合征。本专利技术的第三个方面，提供一种多囊卵巢综合征并发代谢综合征的诊断试剂盒，所述试剂盒包含用于定量检测生物标志物表达水平的试剂，所述生物标志物为丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、酪氨酸、天冬酰胺、谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸。在一种实施方案中，所述试剂盒的使用方法为利用质谱仪对受试者血液或血清中的生物标志物水平进行定量检测。附图说明附图用来提供对本专利技术的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与本专利技术的实施例一起用于解释本专利技术，并不构成对本专利技术的限制。图1ROC曲线分析。8AAssignature,8种氨基酸（丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、酪氨酸、天冬酰胺、谷氨酸、半胱氨酸、甘氨酸）联合分析;WC,腰围;SBP,收缩压;FPG,空腹血糖;TG,甘油三酯水平。具体实施方式以下结合附图对本专利技术的优选实施例进行说明，应当理解，此处所描述的优选实施例仅用于说明和解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，例如教科书和实验指南中所述的条件，或按照制造厂商所建议的条件。实施例1：差异性生物标志物的筛选1.研究对象及样本采集研究经北京大学第三医院伦理委员会批准，招募2017年10月至2018年12月就诊于北京大学第三医院生殖医学中心的女性患者。1.1纳入和排除标准：纳入标准：依据2003年鹿特丹PCOS诊断标准选择入组人群，符合下列三项条件中的两项即可诊断为PCOS：月经稀发和/或闭经、高雄激素血症或者高雄激素的临床表现（多毛、痤疮等本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于多囊卵巢综合征并发代谢综合征诊断的试剂盒，其特征在于，包含检测生物标志物表达水平的试剂，所述生物标志物包括至少8种特定氨基酸，所述特定氨基酸为丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、酪氨酸、天冬酰胺、谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸。/n

【技术特征摘要】
1.一种用于多囊卵巢综合征并发代谢综合征诊断的试剂盒，其特征在于，包含检测生物标志物表达水平的试剂，所述生物标志物包括至少8种特定氨基酸，所述特定氨基酸为丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、酪氨酸、天冬酰胺、谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸。


2.如权利要求1所述的试剂盒的使用方法，其特征在于，通过测试受试体血浆或血清...

【专利技术属性】
技术研发人员：乔杰，赵越，李蓉，张春梅，叶臻泓，
申请(专利权)人：北京大学第三医院北京大学第三临床医学院，
类型：发明
国别省市：北京;11