一种橘红梨膏HPLC指纹图谱及多成分含量的检测方法技术

本发明专利技术涉及一种橘红梨膏HPLC指纹图谱及多成分含量检测方法。所述HPLC指纹图谱的检测方法包括如下步骤：精密称取橘红梨膏，加入有机溶剂，过滤，取续滤液，制备供试品溶液；精密吸取所述供试品溶液，进行高效液相色谱测定，获得所述橘红梨膏HPLC指纹图谱；其中，所述高效液相色谱测定采用的流动相A为乙腈，流动相B为水；采用梯度洗脱方式。本发明专利技术还提供一种能同时测定橘红梨膏多成分含量的检测方法。本发明专利技术方法准确可靠、专属性强、重复性好，能够全面、有效、高效地控制产品质量。

【技术实现步骤摘要】
一种橘红梨膏HPLC指纹图谱及多成分含量的检测方法
本专利技术涉及医药
，特别是涉及一种橘红梨膏HPLC指纹图谱的检测方法和多成分含量的检测方法。
技术介绍
橘红梨膏是一种中药制剂，含梨、化橘红、枇杷叶、苦杏仁、五味子、川贝母、天冬和麦冬，具有养阴清肺与止咳化痰的作用，用于肺胃阴虚、口干咽燥以及久咳痰少。目前，橘红梨膏执行部颁药品标准(中药成分制剂WS3-B-0666-91)，仅对橘红梨膏的相对密度、不溶物、装量及微生物限度进行要求，未涉及处方药材的检查，不能有效控制产品质量。在目前已公开的橘红梨膏质量研究中，采取的均为药材的薄层色谱鉴定方法(TLC)。余国禧对橘红梨膏中的化橘红、苦杏仁和五味子进行薄层鉴别，该方法需要分别制备三种供试品，并采用三种不同的薄层展开条件，此外该研究还提供了测定化橘红中柚皮苷单组份含量的方法(余国禧.橘红梨膏质量标准研究[J].中药材,2003(05):363-365.)。但橘红梨膏内在物质丰富，各成分性质差异较大，传统单一成分含量测定不足以说明产品整体质量。目前尚缺乏可以同时鉴别橘红梨膏中多种药材或同时测定橘红梨膏中多种成分含量的检测方法，难以有效控制产品的质量和临床疗效。
技术实现思路
基于此，有必要提供一种橘红梨膏HPLC指纹图谱的检测方法，可以鉴别橘红梨膏中多种原料药材，同时对多个化学成分进行含量测定，能全面、有效、高效地控制橘红梨膏的质量。本专利技术通过如下技术方案实现：一种橘红梨膏的HPLC指纹图谱的检测方法，包括如下步骤：r>精密称取橘红梨膏，加入有机溶剂，过滤，取续滤液，制备供试品溶液；精密吸取所述供试品溶液，进行高效液相色谱测定，获得所述橘红梨膏HPLC指纹图谱；其中，所述高效液相色谱测定采用的流动相A为乙腈，流动相B为水；采用梯度洗脱方式；所述加入有机溶剂包括如下步骤：先加入溶剂A，再加入溶剂B；所述溶剂A与所述供试品溶液的体积比为1:(2～5)；所述溶剂A为体积分数为20～50％的甲醇水溶液或体积分数为20～50％的乙醇水溶液；所述溶剂B为甲醇或乙醇。在其中一个实施例中，所述流动相A为含酸的乙腈；和/或所述流动相B为含酸的水；其中，所述流动相A和/或所述流动相B中所述酸的体积分数为0.01～4％的酸；所述酸为乙酸或甲酸。在其中一个实施例中，所述梯度洗脱方式为：0～75min，流动相A的体积百分数由5％变化至95％。在其中一个实施例中，所述梯度洗脱方式为：0～25min，流动相A的体积百分数由5％变化至22％；25～52min，流动相A的体积百分数由22％变化至42％；52～75min，流动相A的体积百分数由42％变化至95％。在其中一个实施例中，所述高效液相色谱测定的条件为：色谱柱为C18色谱柱；所述流动相的流速为0.4～1.2ml/min；柱温为20～45℃；检测波长选择200～220nm、244～264nm或310～330nm。在其中一个实施例中，所述检测波长为205～215nm、250～260nm或315～325nm。本专利技术还提供一种橘红梨膏多成分含量的检测方法，包括如下步骤：精密称取对照品，加入甲醇溶解，制备对照品溶液；所述对照品为柚皮苷、野漆树苷与五味子醇甲对照品中的至少一种；精密称取橘红梨膏，加入有机溶剂，过滤，取续滤液，制备供试品溶液；精密吸取所述对照品溶液和供试品溶液，进行高效液相色谱测定；其中，所述高效液相色谱测定采用的流动相A为乙腈，流动相B为水；采用梯度洗脱方式；所述加入有机溶剂包括如下步骤：先加入溶剂A，再加入溶剂B；所述溶剂A与供试品溶液的体积比为1:(2～5)；所述溶剂A为体积分数为20～50％的甲醇水溶液或体积分数为20～50％的乙醇水溶液；所述溶剂B为甲醇或乙醇。在其中一个实施例中，所述流动相A为含酸的乙腈；和/或所述流动相B为含酸的水；其中，所述流动相A和/或所述流动相B中所述酸的体积分数为0.01～4％；所述酸为乙酸或甲酸。在其中一个实施例中，所述梯度洗脱方式为：0～75min，流动相A的体积百分数由5％变化至95％。在其中一个实施例中，所述梯度洗脱方式为：0～25min，流动相A的体积百分数由5％变化至22％；25～52min，流动相A的体积百分数由22％变化至42％；52～75min，流动相A的体积百分数由42％变化至95％。在其中一个实施例中，所述高效液相色谱测定的条件为：色谱柱为C18色谱柱；所述流动相的流速为0.4～1.2ml/min；柱温为20～45℃；检测波长为244～264nm或310～330nm。在其中一个实施例中，所述检测波长为250～260nm或310～330nm。与现有技术相比较，具有如下有益效果：本专利技术首次构建了橘红梨膏的HPLC指纹图谱，充分展示了橘红梨膏的化学成分特征，能够同时鉴别橘红梨膏中多种药材，又能同时测定多个指标成分含量，有利于全面控制橘红梨膏的产品质量，同时还节约了检测时间和检测成本。附图说明图1为不同供试品制备方法得到的供试品溶液HPLC谱图；图2为橘红梨膏320nm波长下的HPLC指纹图谱；图3为橘红梨膏254nm波长下的HPLC指纹图谱；图4为橘红梨膏210nm波长下的HPLC指纹图谱。具体实施方式以下结合具体实施例对本专利技术的橘红梨膏的HPLC指纹图谱及多成分含量检测方法作进一步详细的说明。一种橘红梨膏的HPLC指纹图谱的检测方法，包括如下步骤：精密称取橘红梨膏，加入有机溶剂，过滤，取续滤液，制备供试品溶液；精密吸取供试品溶液，进行高效液相色谱测定，获得橘红梨膏HPLC指纹图谱；其中，高效液相色谱测定采用的流动相A为乙腈，流动相B为水；采用梯度洗脱方式。流动性选择乙腈-水系统，其出峰时间较短，同时能保留较多峰信息。在其中一个具体的示例中，加入有机溶剂包括如下步骤：先加入溶剂A，再加入溶剂B；溶剂A与供试品溶液的体积比为1:(2～5)；溶剂A为体积分数为20～50％的甲醇水溶液或体积分数为20～50％的乙醇水溶液；溶剂B为甲醇或乙醇。先用少量20～50％甲醇或乙醇溶解、稀释样品，再加入甲醇或乙醇至一定浓度，既能有效除杂、保护检测设备，又能最大限度保留橘红梨膏的药材成分信息，可同时检出到枇杷叶、化橘红、五味子、苦杏仁的成分特征峰，且方法重复性好。此外，本方法与液液萃取相比，减少了有机试剂的使用，有利于环境保护，同时节省了检测成本。在其中一个具体的示例中，溶剂A为体积分数为20～50％的甲醇水溶液。具体地，甲醇水溶液(溶剂A)的体积分数包括但不限于如下百分比：20％、30％、40％、45％、47％、48％、49％、50％。甲醇作溶剂得到的橘红梨膏供试品成分本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种橘红梨膏HPLC指纹图谱的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：/n精密称取橘红梨膏，加入有机溶剂，过滤，取续滤液，制备供试品溶液；/n精密吸取所述供试品溶液，进行高效液相色谱测定，获得所述橘红梨膏HPLC指纹图谱；/n其中，所述高效液相色谱测定采用的流动相A为乙腈，流动相B为水；采用梯度洗脱方式；/n所述加入有机溶剂包括如下步骤：先加入溶剂A，再加入溶剂B；/n所述溶剂A与所述供试品溶液的体积比为1:(2～5)；/n所述溶剂A为体积分数为20～50％的甲醇水溶液或体积分数为20～50％的乙醇水溶液；/n所述溶剂B为甲醇或乙醇。/n

【技术特征摘要】
1.一种橘红梨膏HPLC指纹图谱的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：
精密称取橘红梨膏，加入有机溶剂，过滤，取续滤液，制备供试品溶液；
精密吸取所述供试品溶液，进行高效液相色谱测定，获得所述橘红梨膏HPLC指纹图谱；
其中，所述高效液相色谱测定采用的流动相A为乙腈，流动相B为水；采用梯度洗脱方式；
所述加入有机溶剂包括如下步骤：先加入溶剂A，再加入溶剂B；
所述溶剂A与所述供试品溶液的体积比为1:(2～5)；
所述溶剂A为体积分数为20～50％的甲醇水溶液或体积分数为20～50％的乙醇水溶液；
所述溶剂B为甲醇或乙醇。


2.根据权利要求1所述的橘红梨膏HPLC指纹图谱的检测方法，其特征在于，所述流动相A为含酸的乙腈；和/或
所述流动相B为含酸的水；
其中，所述流动相A和/或所述流动相B中所述酸的体积分数为0.01～4％；
所述酸为乙酸或甲酸。


3.根据权利要求1-2任一项所述的橘红梨膏HPLC指纹图谱的检测方法，其特征在于，所述梯度洗脱方式为：0～75min，流动相A的体积百分数由5％变化至95％。


4.根据权利要求3所述的橘红梨膏HPLC指纹图谱的检测方法，其特征在于，所述梯度洗脱方式为：0～25min，流动相A的体积百分数由5％变化至22％；25～52min，流动相A的体积百分数由22％变化至42％；52～75min，流动相A的体积百分数由42％变化至95％。


5.根据权利要求1-2任一项所述的橘红梨膏HPLC指纹图谱的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱测定的条件为：色谱柱为C18色谱柱；所述流动相的流速为0.4～1.2ml/min；柱温为20～45℃；检测波长选择200～220nm、244～264nm或310～330nm。


6.一种...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄洁文，杨丽莹，王艳慧，秦群英，吴舒楹，黄绮韵，
申请(专利权)人：广州市香雪制药股份有限公司，广东化州中药厂制药有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44