具有氨基酸结构LTVINQTQKENLR的生物活性肽及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及蛋白领域，具体涉及具有氨基酸结构LTVINQTQKENLR的生物活性肽及其制备方法和应用，具有氨基酸结构LTVINQTQKENLR的生物活性肽选自生物活性肽LTVINQTQKENLR、生物活性肽VLTVINQTQKENLRKF、生物活性肽VLTVINQTQKENLRKFYK或生物活性肽VLTVINQTQKENLRKFY中的一种或几种。经过体外免疫功能调节实验，验证了生物活性肽LTVINQTQKENLR、VLTVINQTQKENLRKF、VLTVINQTQKENLRKFYK和VLTVINQTQKENLRKFY具有较好的免疫调节功能。本发明专利技术的LTVINQTQKENLR、VLTVINQTQKENLRKF、VLTVINQTQKENLRKFYK和VLTVINQTQKENLRKFY可促进巨噬细胞吞噬中性红能力，具有一定的免疫调节作用，促进淋巴细胞增殖，降低机体发病率，提高生命的质量，对开发具有免疫调节功能的食品、保健品和药物具有十分重要的意义。

【技术实现步骤摘要】
具有氨基酸结构LTVINQTQKENLR的生物活性肽及其制备方法和应用
本专利技术涉及蛋白领域，尤其是涉及具有氨基酸结构LTVINQTQKENLR的生物活性肽及其制备方法和应用。
技术介绍
生物活性肽因其具有很多潜在的生物功能，所以引起人们越来越多的关注，成为科学研究的热点之一。目前很多生物活性肽的有益效果也已经得到了很好的证明，如抗癌、降血压、抗菌、降胆固醇、抗糖尿病等等特性。当前最权威的生物活性肽数据库BIOPEP-UMW中已报告了3000多个不同的生物活性肽，但是由于生活肽的数量实在是太多，所以，还有非常多的多肽有待研究其相关性能。目前对于生物活性肽的研究多集中于食物衍生多肽，对非食物衍生多肽研究和报道较少。且已经有研究结果证实，与食物衍生的生物活性肽相比，非食物衍生的生物活性肽具有更高的亲和力并能有效发挥其生物活性功能。免疫调节肽是继阿片肽发现后首次从乳中获得并证明其生理活性的一类生物活性肽。1981年Jolles等人首次发现，利用胰蛋白酶水解人乳蛋白，可以得到一个氨基酸序列为Val-Glu-Pro-Ile-Pro-Tyr的六肽，体外实验证明该肽能够增强小鼠腹腔巨噬细胞对绵羊红细胞的吞噬作用。Migliore-Samour等人发现来自酪蛋白的六肽Thr-Thr-Met-Pro-Leu-Trp能够刺激绵羊血红细胞对小鼠腹膜巨噬细胞的吞噬作用以及增强对于肺炎克雷伯菌的抵抗，具有抗炎功能。李素萍等人用合成的小鼠骨髓巨噬细胞来与源肽(PGPIPN)饲喂大鼠发现大鼠腹腔巨噬细胞的吞噬作用和红细胞相关的抗炎功能有显著的增强。Bowdis等人在研究来源于牛中性粒细胞的13氨基酸肽indolicidin的免疫功能时发现，多肽indolicidin在巨噬细胞样细胞系中抑制LPS诱导的TNF-α产量。但是这些小肽未从蛋白质中酶解分离时，这些蛋白质本身往往是不具备免疫调节活性的。如何从已知氨基酸序列的种类繁多的蛋白质中寻找具有特定功能的生物活性肽，并研究这些多肽的功能是蛋白领域研究的方向之一。60SribosomalproteinL35蛋白氨基酸序列如SEQIDNO：5所示。目前，现有技术中并没有关于60SribosomalproteinL35蛋白多肽片段相关功能的研究。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供具有氨基酸结构LTVINQTQKENLR的生物活性肽及其制备方法和应用。具体而言，主要涉及生物活性肽LTVINQTQKENLR、生物活性肽VLTVINQTQKENLRKF、生物活性肽VLTVINQTQKENLRKFYK和生物活性肽VLTVINQTQKENLRKFY及其制备方法和应用。本专利技术的目的可以通过以下技术方案来实现：本专利技术第一方面，提供具有氨基酸结构LTVINQTQKENLR的生物活性肽，选自生物活性肽LTVINQTQKENLR、生物活性肽VLTVINQTQKENLRKF、生物活性肽VLTVINQTQKENLRKFYK或生物活性肽VLTVINQTQKENLRKFY中的一种或几种，生物活性肽LTVINQTQKENLR的氨基酸序列为Leu-Thr-Val-Ile-Asn-Gln-Thr-Gln-Lys-Glu-Asn-Leu-Arg，如SEQIDNO：1所示。生物活性肽VLTVINQTQKENLRKF的氨基酸序列为Val-Leu-Thr-Val-Ile-Asn-Gln-Thr-Gln-Lys-Glu-Asn-Leu-Arg-Lys-Phe，如SEQIDNO：2所示。生物活性肽VLTVINQTQKENLRKFYK的氨基酸序列为Val-Leu-Thr-Val-Ile-Asn-Gln-Thr-Gln-Lys-Glu-Asn-Leu-Arg-Lys-Phe-Tyr-Lys，如SEQIDNO：3所示。生物活性肽VLTVINQTQKENLRKFY的氨基酸序列为Val-Leu-Thr-Val-Ile-Asn-Gln-Thr-Gln-Lys-Glu-Asn-Leu-Arg-Lys-Phe-Tyr，如SEQIDNO：4所示。较优的，所述生物活性肽LTVINQTQKENLR、生物活性肽VLTVINQTQKENLRKF、生物活性肽VLTVINQTQKENLRKFYK或生物活性肽VLTVINQTQKENLRKFY为小鼠脾脏来源淋巴细胞肽。具体均来源于60SribosomalproteinL35蛋白，并且分别为60SribosomalproteinL35蛋白第58～70位、第57～72位、第57～74位和第57～73位的氨基酸残基。60SribosomalproteinL35蛋白氨基酸序列如SEQIDNO：5所示。60SribosomalproteinL35蛋白的氨基酸序列以及对应的核苷酸序列为既有技术，编码60SribosomalproteinL35蛋白第58～70位、第57～72位、第57～74位和第57～73位氨基酸残基的核苷酸片段能编码成熟的生物活性肽LTVINQTQKENLR、VLTVINQTQKENLRKF、VLTVINQTQKENLRKFYK和VLTVINQTQKENLRKFY。较优的，所述生物活性肽LTVINQTQKENLR、生物活性肽VLTVINQTQKENLRKF、生物活性肽VLTVINQTQKENLRKFYK或生物活性肽VLTVINQTQKENLRKFY具有抗炎功能和免疫调节功能。本专利技术还提供编码所述生物活性肽LTVINQTQKENLR、生物活性肽VLTVINQTQKENLRKF、生物活性肽VLTVINQTQKENLRKFYK或生物活性肽VLTVINQTQKENLRKFY的多核苷酸。本专利技术第二方面，提供了具有氨基酸结构LTVINQTQKENLR的生物活性肽的制备方法，可以通过基因工程的方法人工合成，可以从细胞中通过分离纯化的方法直接获得，可以直接通过化学合成制备。具有氨基酸结构LTVINQTQKENLR的生物活性肽选自生物活性肽LTVINQTQKENLR、生物活性肽VLTVINQTQKENLRKF、生物活性肽VLTVINQTQKENLRKFYK或生物活性肽VLTVINQTQKENLRKFY中的一种或几种。通过基因工程的方法人工合成具有氨基酸结构LTVINQTQKENLR的生物活性肽是本领域技术人员能够实现的技术方案，例如可以是以DNA重组技术为基础，通过合适的DNA模板来控制多肽的序列合成。关于从细胞中通过分离纯化的方法直接获得的方式可以为：基于给定的具有氨基酸结构LTVINQTQKENLR的生物活性肽的氨基酸序列，采用生物学技术上常规的酶解、纯化方法从小鼠脾脏来源淋巴细胞获得具有氨基酸结构LTVINQTQKENLR的生物活性肽。本专利技术第三方面，提供了具有氨基酸结构LTVINQTQKENLR的生物活性肽在制备具有抗炎功能的药物或化妆品中的应用，具有氨基酸结构LTVINQTQKENLR的生物活性肽选自生物活性肽LTVINQTQKENLR、生物活性肽VLTVINQTQKENLRKF、生物活性肽VLTV本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.具有氨基酸结构LTVINQTQKENLR的生物活性肽，其特征在于，选自生物活性肽LTVINQTQKENLR、生物活性肽VLTVINQTQKENLRKF、生物活性肽VLTVINQTQKENLRKFYK或生物活性肽VLTVINQTQKENLRKFY中的一种或几种，/n生物活性肽LTVINQTQKENLR的氨基酸序列为Leu-Thr-Val-Ile-Asn-Gln-Thr-Gln-Lys-Glu-Asn-Leu-Arg，/n生物活性肽VLTVINQTQKENLRKF的氨基酸序列为Val-Leu-Thr-Val-Ile-Asn-Gln-Thr-Gln-Lys-Glu-Asn-Leu-Arg-Lys-Phe，/n生物活性肽VLTVINQTQKENLRKFYK的氨基酸序列为Val-Leu-Thr-Val-Ile-Asn-Gln-Thr-Gln-Lys-Glu-Asn-Leu-Arg-Lys-Phe-Tyr-Lys，/n生物活性肽VLTVINQTQKENLRKFY的氨基酸序列为Val-Leu-Thr-Val-Ile-Asn-Gln-Thr-Gln-Lys-Glu-Asn-Leu-Arg-Lys-Phe-Tyr。/n...

【技术特征摘要】
1.具有氨基酸结构LTVINQTQKENLR的生物活性肽，其特征在于，选自生物活性肽LTVINQTQKENLR、生物活性肽VLTVINQTQKENLRKF、生物活性肽VLTVINQTQKENLRKFYK或生物活性肽VLTVINQTQKENLRKFY中的一种或几种，
生物活性肽LTVINQTQKENLR的氨基酸序列为Leu-Thr-Val-Ile-Asn-Gln-Thr-Gln-Lys-Glu-Asn-Leu-Arg，
生物活性肽VLTVINQTQKENLRKF的氨基酸序列为Val-Leu-Thr-Val-Ile-Asn-Gln-Thr-Gln-Lys-Glu-Asn-Leu-Arg-Lys-Phe，
生物活性肽VLTVINQTQKENLRKFYK的氨基酸序列为Val-Leu-Thr-Val-Ile-Asn-Gln-Thr-Gln-Lys-Glu-Asn-Leu-Arg-Lys-Phe-Tyr-Lys，
生物活性肽VLTVINQTQKENLRKFY的氨基酸序列为Val-Leu-Thr-Val-Ile-Asn-Gln-Thr-Gln-Lys-Glu-Asn-Leu-Arg-Lys-Phe-Tyr。


2.编码生物活性肽LTVINQTQKENLR、生物活性肽VLTVINQTQKENLRKF、生物活性肽VLTVINQTQKENLRKFYK或生物活性肽VLTVINQTQKENLRKFY的多核苷酸。


3.具有氨基酸结构LTVINQTQKENLR的生物活性肽的制备方法，其特征在于，通过基因工程的方法人工合成，从细胞中通过分离纯化的方法直接获得，或直接通过化学合成制备。


4.具有氨基酸结构LTVINQTQKENLR的生物活性肽在制备具有抗炎功能的药物或化妆品中的应用，其特征在于，具有氨基酸结构LTVINQTQKENLR的生物活性肽选自生物活性肽LTVINQTQKENLR、生物活性肽VLTVINQTQKENLRKF、生物活性肽VLTVINQTQKENLRKFYK或生物活性肽VLTVINQTQKENLRKFY中的一种或几种。


5.根据权利要求4所述具有氨基酸结构LTVINQTQKENLR的生物活性肽在制备具有抗炎功能的药物或化妆品中的应用，其特征在于，所述生物活性肽LTVINQTQKENLR、生物活性肽VLTVINQTQKENLRKF、生物活性肽VLTVINQTQKENLRKFYK或生物活性肽VLTVINQTQKENLRKFY中的一种或几种的组合在制备促进巨噬细胞吞噬中性红能力的食物或药物中的应用。


6.具有氨基酸结构LTVINQTQKENLR的生物活性肽在制备具有免疫调节功能的食物或药物中的应用，其特征在于，具有氨基酸结构LTVINQTQKENLR的生物活性肽选自生物活性肽LTVINQTQKENLR、生物活性肽VLTVINQTQKENLRKF、生物活性肽VLTVINQTQKENLRKFY...

【专利技术属性】
技术研发人员：张少辉，石毅，占文静，张伯宇，王娟，亚辛·黑马尔，
申请(专利权)人：浙江辉肽生命健康科技有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33