一种青藤碱生物素标记探针及其制备方法和用途技术

本发明专利技术涉及有机合成及药物化学技术领域，特别涉及一种青藤碱生物素标记探针及其制备方法和用途。所述的青藤碱生物素标记探针为式I所示结构或其药学上可接受的盐，式I所示的化合物通过三步合成，且该标记探针应用在制备抗炎或抗肿瘤药物中。本发明专利技术的所涉及的该类分子一方面可作为一种研究青藤碱抗炎、抗肿瘤药物靶点的分子探针，探究青藤碱的作用靶点，有助于对青藤碱抗炎和抗肿瘤机制更加深入的了解，有助于找到更安全和更高效的抗炎以及抗肿瘤方法，另一方面，生物素标记的青藤碱探针本身也具有抗炎以及抗肿瘤作用，可以开发成为抗炎或抗肿瘤药物。

【技术实现步骤摘要】
一种青藤碱生物素标记探针及其制备方法和用途
本专利技术涉及有机合成及药物化学
，特别涉及一种青藤碱生物素标记探针及其制备方法和用途。
技术介绍
青藤碱来源于防己科植物青风藤及毛青藤的根茎，是一种具有广泛药理活性的生物碱单体。近年来随着研究人员对青藤碱的深入研究，发现青藤碱不仅具有抗炎、镇痛、降压、抗心律失常等作用，而且在抗肿瘤方面具有显著的效果。目前，青藤碱的抗炎、抗肿瘤活性等被广泛关注，但其具体的作用靶点以及作用机制等尚不明确。
技术实现思路
为了解决上述问题，我们设计制备了含有生物素标记物的青藤碱探针分子，用于探究青藤碱可能的作用靶点蛋白和潜在作用机制。所有这些工作将为青藤碱的后续开发提供重要理论依据。本专利技术通过设计合成青藤碱生物素标记探针并考察探针分子的抗炎、抗肿瘤活性，同时以探针为工具，研究青藤碱抗炎、抗肿瘤活性的潜在作用靶点蛋白，一旦潜在的靶标被发现后，再通过一系列的分子生物学实验来确证这些靶点蛋白及其生物学作用。一种青藤碱生物素标记探针，所述的青藤碱生物素标记探针为式I所示结构或其药学上可接受的盐：其中，X为NH或O；R为C1～C5饱和或不饱和的烷基、含有羰基取代的C1～C8的含有醚键的烷基、C7～C8的含有羰基且含有取代亚芳基的烷基。优选的，所述的标记探针选自如下化合物的一种或多种或其药学上可接受的盐：前述所述标记探针的制备方法，包括如下步骤：(1)式1所示的化合物与式2所示的化合物在碱性条件下反应得到式3所示的化合物；(2)式4所示的化合物经酰氯化得到式5所示的化合物；(3)式3所示的化合物与式5所示的化合物在-10℃～10℃，弱碱性条件下反应得到式I所示的标记探针。优选的，所述步骤(3)中的弱碱选自三乙胺。优选的，所述步骤(3)在有机溶剂中进行反应，所述有机溶剂选自二氯甲烷、乙腈、二甲基甲酰胺。前述任一项所述的标记探针在制备抗炎或抗肿瘤药物中的应用。优选的，所述的肿瘤选自胃癌、肝癌、肺癌或脑胶质瘤，所述的抗炎中的炎症选自肾炎。优选的，所述肾炎选自肾小球系膜细胞炎症。优选的，所述肾炎选自系膜增生性肾小球肾炎或脂多糖诱导肾小球系膜细胞炎症。有益效果本专利技术所涉及的青藤碱生物素标记探针分子可作为一种研究青藤碱抗炎、抗肿瘤药物靶点的分子探针，探究青藤碱的作用靶点，有助于对青藤碱抗炎和抗肿瘤机制更加深入的了解，有助于找到更安全和更高效的抗炎以及抗肿瘤方法；本专利技术所涉及的青藤碱生物素标记探针分子合成方法简单，无需极端条件即可得到产物；生物素标记的青藤碱探针本身也具有抗炎以及抗肿瘤作用，可以开发成为抗炎或抗肿瘤药物，疗效好，毒副作用小。附图说明图1本专利技术实施例9Q1-Q5抗脂多糖(LPS)诱导肾小球系膜细胞炎症因子的生成。图2本专利技术实施例10通过生物素pull-down鉴定PKC-α为青藤碱的潜在靶点蛋白。图3本专利技术实施例11中Q1-Q5抗大鼠系膜增生性肾小球肾炎肾组织炎症因子的生成图4本专利技术实施例12中Q1-Q5减轻大鼠系膜增生性肾小球肾炎肾组织增生病变图5本专利技术实施例13中Q1-Q5抑制大鼠系膜增生性肾小球肾炎肾组织尿蛋白的分泌具体实施方式下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。以下对至少一个示例性实施例的描述实际上仅仅是说明性的，决不作为对本专利技术及其应用或使用的任何限制。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。需要注意的是，这里所使用的术语仅是为了描述具体实施方式，而非意图限制根据本申请的示例性实施方式。如在这里所使用的，除非上下文另外明确指出，否则单数形式也意图包括复数形式，此外，还应当理解的是，当在本说明书中使用术语“包含”和/或“包括”时，其指明存在特征、步骤、操作、器件、组件和/或它们的组合。下面结合实施例对本专利技术进行详细说明，以方便本领域技术人员理解本专利技术。实施例14-羟丙基青藤碱的制备将青藤碱(300mg，0.91mmol)溶于丙酮(10mL)中，加入K2CO3(878mg，4.55mmol)和3-溴丙醇(247μL，2.73mmol)，在60℃下反应16h。旋干丙酮，用二氯甲烷萃取三次，合并有机层，用饱和食盐水洗一次，无水Na2SO4干燥，浓缩，柱层析(二氯甲烷∶甲醇＝50∶1)，得白色固体产品(137mg，38.8％)。将所得产品进行谱图实验，所得氢谱和质谱数据为：1HNMR(500MHz，Chloroform-d)δ6.70(d，J＝7.5Hz，1H)，6.66(dt，J＝7.5，1.0Hz，1H)，6.06(dd，J＝6.2，1.6Hz，1H)，4.23-4.14(m，2H)，4.18-4.10(m，1H)，3.83(s，3H)，3.88-3.78(m，1H)，3.70(s，3H)，3.69(dq，J＝12.2，6.9Hz，1H)，3.38(dddt，J＝8.7，7.1，5.4，1.7Hz，1H)，3.07-2.98(m，2H)，2.96-2.84(m，2H)，2.78-2.61(m，3H)，2.34(d，J＝1.4Hz，3H)，2.15-1.94(m，4H).ESI-MS(m/z)426.1[M+K]+.实施例2：生物素酰氯的制备将生物素(200mg，0.82mmol)溶于二氯甲烷(5mL)中，向其中加入DMF(12.7μL，0.16mmol)，加入草酰氯(208μL，0.82mmol)，在40℃下反应6h，反应完全后，浓缩，得黄色固体产品。将所得产品进行谱图实验，所得氢谱和质谱数据为：1HNMR(500MHz，Chloroform-d)δ6.33(d，J＝7.7Hz，1H)，6.05(d，J＝7.0Hz，1H)，4.45-4.36(m，1H)，4.21(q，J＝7.0Hz，1H)，3.10(qd，J＝7.0，0.7Hz，1H)，2.86(dd，J＝12.4，7.1Hz，1H)，2.85-2.72(m，3H)，1.75-1.42(m，6H).ESI-MS(m/z)263.05[M+H]+.实施例3：生物素-4-羟丙基青藤碱(Q1)的制备：实施例2所得产品4-羟丙基青藤碱(100mg，0.26mmol)溶解在二氯甲烷(2mL)中，冰浴下加入三乙胺(7.2μL，0.052mmol)，向其中滴加实施例1所得产品生物素酰氯的二氯甲烷溶液(1mL)，冰浴下搅拌0.5h，室温反应3h。反应液浓缩后柱层析(二氯甲烷∶甲醇＝20∶1-10∶1)，得黄色固体产品(16mg，10.1％)。将所得产品进行谱图实验，所得氢谱和质谱数据为：1HNMR(300MH本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种青藤碱生物素标记探针，其特征在于，所述的青藤碱生物素标记探针为式I所示结构或其药学上可接受的盐：/n

【技术特征摘要】
1.一种青藤碱生物素标记探针，其特征在于，所述的青藤碱生物素标记探针为式I所示结构或其药学上可接受的盐：



其中，X为NH或O；
R为C1～C5饱和或不饱和的烷基、含有羰基取代的C1～C8的含有醚键的烷基、C7～C8的含有羰基且含有取代亚芳基的烷基。


2.根据权利要求1所述的标记探针，其特征在于，所述的标记探针选自如下化合物的一种或多种或其药学上可接受的盐：





3.权利要求1或2所述标记探针的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：



(1)式1所示的化合物与式2所示的化合物在碱性条件下反应得到式3所示的化合物；
(2)式4所示的化合物经酰氯化得到式5所示的化合物；
(3)式3所示的化合物与式5所示的化合物在-10...

【专利技术属性】
技术研发人员：邱文，赵晨卉，石磊，王迎伟，王文博，季明德，徐盛涛，
申请(专利权)人：南京医科大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32