一种果蝇用培养基及其制备方法技术

本发明专利技术属于果蝇研究技术领域，具体涉及一种果蝇用培养基及其制备方法。其中，果蝇用培养基，包括水，以1L水计，还包括以下组分：琼脂10～20g、酵母80～120g、白砂糖40～60g、代糖5～250g、无水氯化钙0.7～0.8g、乙醇20～40mL、对羟基苯甲酸乙酯8～10g、丙酸4～6mL。本发明专利技术的果蝇用培养基，采用代糖替换蔗糖，会使果蝇寿命增长，对外界环境变化反应能力有促进作用，或者能促进果蝇繁殖力提高。

【技术实现步骤摘要】
一种果蝇用培养基及其制备方法
本专利技术属于果蝇研究
，具体涉及一种果蝇用培养基及其制备方法。
技术介绍
越来越多的人因长期过多摄入高糖食品而导致肥胖，更有甚者患上了高血压、心血管病等疾病。为了满足人们对甜味的渴望的同时又不摄入更多的糖分，代糖物质应运而生，并得到了广泛关注和使用，现今工业食品上也在大量使用代糖物质作为甜味剂。虽然代糖物质能够在给人们带来舌尖上愉悦的同时还能减少糖分的摄入，但同时也给食用人群带来了一定的困扰，代糖物质对身体是否有伤害，糖尿病人是否可以食用代糖做的食物而无需考虑后果，因此，研究各种种类的代糖物质是否对人体有一定的影响，对广大甜食消费群众和爱吃甜食的糖尿病等患者具有重要的现实意义。果蝇有着生存期短、繁殖快、饲养简便等优势，在发育生物学、神经科学、人类疾病研究等领域有着广泛应用。果蝇基因组序列分析表明，超过60％的人类疾病基因在果蝇中有直系同源基因，所以通过基于果蝇模型的研究具有重要的研究意义。
技术实现思路
基于现有技术中存在的上述缺点和不足，本专利技术提供一种果蝇用培养基及其制备方法。为了达到上述专利技术目的，本专利技术采用以下技术方案：一种果蝇用培养基，包括水，以1L水计，还包括以下组分：琼脂10～20g、酵母80～120g、白砂糖40～60g、代糖5～250g、无水氯化钙0.7～0.8g、乙醇20～40mL、对羟基苯甲酸乙酯8～10g、丙酸4～6mL。作为优选方案，所述代糖为木糖醇或甜蜜素。作为优选方案，所述琼脂15g、酵母100g、白砂糖50g、木糖醇250g、无水氯化钙0.7126g、乙醇30mL、对羟基苯甲酸乙酯9g、丙酸6mL。作为优选方案，所述琼脂15g、酵母100g、白砂糖50g、甜蜜素5g、无水氯化钙0.7126g、乙醇30mL、对羟基苯甲酸乙酯9g、丙酸6mL。本专利技术还提供如上任一方案所述的果蝇用培养基的制备方法，包括以下步骤：(1)对电热锅进行消毒；(2)将部分水与白砂糖、代糖、无水氯化钙混合，边倒酵母边搅拌，直至搅拌均匀；(3)将剩余的水倒入电热锅，通电，转速调节至第一转速，加入琼脂，煮至琼脂转变为透明胶状；(4)将步骤(2)得到的物料倒入电热锅，转速调节至第二转速，加热至沸腾，保持第一目标时长；降温至60℃加入丙酸，再添加对羟基苯甲酸乙酯与酒精的混合液，搅拌均匀；其中，第二转速大于第一转速；(5)灌装至果蝇管或果蝇瓶中，冷却凝固，得到果蝇用培养基。作为优选方案，所述第一转速为100～130rpm。作为优选方案，所述第二转速为120～150rpm。作为优选方案，所述第一目标时长为10～20min。作为优选方案，。本专利技术与现有技术相比，有益效果是：本专利技术的果蝇用培养基，采用代糖替换蔗糖，会使果蝇寿命增长，对外界环境变化反应能力有促进作用，或者能促进果蝇繁殖力提高。附图说明图1为本专利技术实施例的不同糖和代糖对果蝇寿命的影响折线图；图2为本专利技术实施例的不同实验组产卵量平均值对比图；图3为本专利技术实施例在饥饿条件下不同实验组果蝇寿命差异对比图。具体实施方式以下通过具体实施例对本专利技术的技术方案作进一步解释说明。本专利技术实施例针对代糖及糖类是否对生物寿命及活动性有影响的问题，使用黑腹果蝇作为模式生物，在蔗糖培养基6.0的前提下测量代糖及糖类对果蝇寿命、进食量、繁殖力的影响。本专利技术实施例采用相等甜度的代糖(木糖醇与甜蜜素两种代糖)来代替培养基中的蔗糖，从而做到研究相同甜度下代糖与糖类对生命活动的影响。其中，各培养基的成分如表1所示：表1各种培养基的配方表具体地，培养基在调配好之后，需要将原料煮熟之后才可以当做培养基，用来饲养果蝇。其中，培养基的制备方法，具体操作步骤为：(1)按配方表称量物体，丙酸先不称量；用乙醇对电热锅进行消毒；(2)用1000ml烧杯把总量的一半水倒入盆中与白砂糖，其余糖类，无水氯化钙一起，边倒酵母边用打蛋器搅拌3-5min，搅拌过程中不断旋转盆子，直至搅拌均匀；(3)将另一半水倒入电热锅，通电，转速调到100rpm，加入琼脂，煮至琼脂透明似胶水状(凝期间需要持续地搅拌，以防止琼脂加热固)；(4)再将步骤(2)混合好的其他原料一起倒入锅中，转速调到120rpm左右(大于步骤(3)的转速)，用附加水清洗盆和搅拌器，倒入电热锅，并加热至沸腾(为了防止食物烧焦、粘锅仍需要持续搅拌)，然后保持15min；使食物降温冷却，称量丙酸(防腐剂，防止培养基长菌变质腐坏)，在60℃左右倒入电热锅，再将对羟基苯甲酸乙酯与酒精的混合液倒入，并搅拌均匀；最后，将食物灌装至果蝇管或果蝇瓶中，待食物完全冷却凝固后即可培养基，可用于果蝇的饲养。以下将研究果蝇在不同培养基中生活同样的时间，并观察它的生命情况。为获得对果蝇寿命、进食量、繁殖力的影响测量，需要制定不同的实验方案与测试方法，具体的实验如下：实验一：寿命测定收集Female与Male果蝇，需要48小时内羽化的果蝇，并进行随机分组，放置于新的培养基瓶中，使两种性别的果蝇进行随机交配。48小时之后，将交配过的果蝇分别放入实验组和对照组。分为Female和Male，每管中放置40只果蝇，每组设置3个重复组。将分组完毕的果蝇放置于恒温恒湿的培养箱中，实验每间隔一天(0，2，4，6，......)都定时为果蝇更换新的培养基，并统计死亡果蝇的数目，记录下每天果蝇死亡的数量。如图1所示，可以看出木糖醇组与6.0组、甜蜜素组果蝇的存活时间存在巨大的差异，木糖醇组果蝇的平均寿命明显远远低于6.0组与甜蜜素组。通过计算得出木糖醇组、甜蜜素组与6.0对照组雌性的P值分别为6.3621E-06、2.85184E-10；雄性的P值分别为9.17783E-08、0.15825(如果P<0.01，说明两组数据具有极显著差异性；如果0.01<P<0.05，说明两组数据是显著差异性；如果P>0.05，说明两组数据是非显著差异性)，可以看出：木糖醇组与6.0组存在极显著性差异，甜蜜素组与6.0组存在显著性差异。从图中可以看出6.0组的雄性平均寿命大于雌性，而木糖醇组与甜蜜素组则恰恰相反，其雌性平均寿命大于雄性。实验二：进食量测定三种食物(即蔗糖组6.0X，木糖醇组，甜蜜素组)Female和Male分开，每组设置4个重复组，每管20只果蝇。提前一至两天准备亮蓝食物(即在食物表面添加100μL浓度为5.4％的亮蓝溶液)并晾干，在第四天时替换(因亮蓝溶液需要较长时间才能浸于培养基并晾干，我们统计四天为最佳)。将果蝇放入新的含亮蓝的培养基并让其自由进食4个小时，然后麻醉收进1.5mL离心管，每管20只，在-18℃温度下冷冻一天后取出，研碎，放入酶标仪，然后可检测出果蝇体内糖类含量。代糖及糖对果蝇进食量的影响，在此处比较与计算本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种果蝇用培养基，包括水，其特征在于，以1L水计，还包括以下组分：琼脂10～20g、酵母80～120g、白砂糖40～60g、代糖5～250g、无水氯化钙0.7～0.8g、乙醇20～40mL、对羟基苯甲酸乙酯8～10g、丙酸4～6mL。/n

【技术特征摘要】
1.一种果蝇用培养基，包括水，其特征在于，以1L水计，还包括以下组分：琼脂10～20g、酵母80～120g、白砂糖40～60g、代糖5～250g、无水氯化钙0.7～0.8g、乙醇20～40mL、对羟基苯甲酸乙酯8～10g、丙酸4～6mL。


2.根据权利要求1所述的一种果蝇用培养基，其特征在于，所述代糖为木糖醇或甜蜜素。


3.根据权利要求2所述的一种果蝇用培养基，其特征在于，所述琼脂15g、酵母100g、白砂糖50g、木糖醇250g、无水氯化钙0.7126g、乙醇30mL、对羟基苯甲酸乙酯9g、丙酸6mL。


4.根据权利要求2所述的一种果蝇用培养基，其特征在于，所述琼脂15g、酵母100g、白砂糖50g、甜蜜素5g、无水氯化钙0.7126g、乙醇30mL、对羟基苯甲酸乙酯9g、丙酸6mL。


5.如权利要求1-4任一项所述的果蝇用培养基...

【专利技术属性】
技术研发人员：李鸿琳，蒋心莹，罗旭声，沈洁，
申请(专利权)人：杭州电子科技大学，
类型：发明
国别省市：浙江;33