拟穴青蟹抗菌肽Spamplin制造技术

本发明专利技术公开了拟穴青蟹抗菌肽Spamplin

【技术实现步骤摘要】
拟穴青蟹抗菌肽Spamplin58-82及其应用
本专利技术属于海洋分子生物学
，具体涉及多肽及其应用。
技术介绍
拟穴青蟹(Scyllaparamamosain)，简称青蟹，是我国东南沿海重要的经济养殖蟹类。青蟹生活在复杂的海洋环境中，经常会遭受各种病原微生物的侵染，青蟹养殖过程中微生物病害频繁发生，使青蟹养殖业经常蒙受重大损失，因而如何提高青蟹的成活率已成为蟹类养殖业中一个亟待解决的问题。抗菌肽(AntimicrobialPeptide，AMP)又称为宿主防御肽，是一类广泛存在于自然界生物体中的小分子多肽物质，广泛存在于动物、植物、微生物等生物体中。尽管抗菌肽的长度、氨基酸组成和二级结构各不相同，但其都具有适合与膜结合的两亲性结构。抗菌肽的种类繁多，理化性质各不相同，导致它们的杀菌机制差异较大。细菌病的防治是长期以来困扰人类的难题，特别是随着青霉素等传统抗生素的长期广泛应用，许多细菌都产生了明显的耐药性，因此开发全新的抗菌药物已迫在眉睫。随着新抗菌肽的不断发现和对抗菌肽作用机制的不断深入了解，具有广谱抗菌的抗菌肽有着明显的优势。抗菌肽可以通过使用多种机理杀灭微生物，不易使病原菌产生耐药性，是一种具有巨大发展潜力的新型抗菌药，为人们寻找理想的抗菌药物提供新的领域。已有报道显示抗菌肽在青蟹抵抗海洋环境中病原微生物的入侵感染方面具有重要作用。因此，研究青蟹新抗菌肽的特性与功能，将丰富青蟹先天免疫防御机制的知识，也能为青蟹乃至甲壳类养殖疾病的防治提供新的思路。
技术实现思路
r>本专利技术的目的在于克服现有技术的不足之处，提供了拟穴青蟹抗菌肽Spamplin58-82及其应用，该拟穴青蟹抗菌肽Spamplin58-82具有较强的抗细菌活性及抗真菌活性，具有广泛的用途。本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案之一是：一种拟穴青蟹抗菌肽Spamplin58-82，其氨基酸序列如SEQIDNO.1所示，具体为：Lys-Ala-Ala-Val-Thr-Ile-Arg-Lys-Glu-Gln-Ser-Cys-Asn-Lys-Ser-Ser-Lys-Tyr-Phe-Val-Lys-Lys-Val-Tyr-Val本专利技术的拟穴青蟹抗菌肽Spamplin58-82由25个氨基酸组成，分子式为C131H218N36O36S1，分子量为2905.45道尔顿，具有很强的水溶性，是一种带有正电荷的阳离子多肽。所述拟穴青蟹抗菌肽Spamplin58-82可以以固体(如粉末等)、液体(如水溶液等)等多种形式应用。本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案之二是：一种拟穴青蟹抗菌肽Spamplin58-82在制备抗菌剂中的应用。本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案之三是：一种抗菌剂，其有效成分包括氨基酸序列如SEQIDNO.1所示的拟穴青蟹抗菌肽Spamplin58-82。所述抗菌剂用于抑制和/或杀灭革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌或真菌等中的至少一种。所述革兰氏阳性菌例如为金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特菌、屎肠球菌、表皮葡萄球菌、蜡状芽孢杆菌等。所述革兰氏阴性菌例如为鲍曼不动杆菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌、施氏假单胞菌、弗氏志贺氏菌等。所述真菌例如为黑曲霉、赭曲霉、尖孢镰孢、腐皮镰孢、禾谷镰孢、新型隐球菌等。用于抑制或杀灭真菌中的霉菌时产生防霉作用，也可称为防霉剂。本专利技术所述的“抗菌剂”可以是药物形式的抗菌剂，即作为抗菌药物，也可以是非药物形式的抗菌剂，例如作为消毒产品、或作为纺织品、塑料等产品的添加剂等。本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案之四是：一种拟穴青蟹抗菌肽Spamplin58-82在制备防腐剂中的应用。本专利技术的拟穴青蟹抗菌肽Spamplin58-82具有抑制或杀灭多种微生物如革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、真菌等的抗菌效果，因而也可作为防腐剂，防止由微生物引起的腐败变质等，可用于食品、医疗品、化妆品等领域。本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案之五是：一种防腐剂，其有效成分包括氨基酸序列如SEQIDNO.1所示的拟穴青蟹抗菌肽Spamplin58-82。所述防腐剂尤其适合用于抑制和/或杀灭黑曲霉、赭曲霉、尖孢镰孢、腐皮镰孢或禾谷镰孢中的至少一种。本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案之六是：一种拟穴青蟹抗菌肽Spamplin58-82在制备食品添加剂中的应用。本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案之七是：一种食品添加剂，其有效成分包括氨基酸序列如SEQIDNO.1所示的拟穴青蟹抗菌肽Spamplin58-82。所述拟穴青蟹抗菌肽Spamplin58-82安全性好，可用于食品饲料添加剂，抑制和/或杀灭食源性污染微生物，如单核细胞增生李斯特菌等。本专利技术所涉及的设备、试剂、工艺、参数等，除有特别说明外，均为常规设备、试剂、工艺、参数等，不再作实施例。本专利技术所列举的所有范围包括该范围内的所有点值。本专利技术所述“大约”、“约”或“左右”等指的是所述范围或数值的±20％范围内。本技术方案与
技术介绍
相比，它具有如下优点：1、本专利技术的拟穴青蟹抗菌肽Spamplin58-82对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、丝状真菌均有显著的抗菌效果，说明其具有较强的抗细菌活性及抗真菌活性，抗菌效果好，抗菌谱广，杀菌速率快。2、本专利技术的拟穴青蟹抗菌肽Spamplin58-82对拟穴青蟹血细胞和人肾上皮细胞(293T)无明显毒性，安全性好。3、本专利技术的拟穴青蟹抗菌肽Spamplin58-82可以研制成为防腐剂、抗菌防霉剂和抗菌药物等，也可以应用于食品添加剂，具有广泛的应用前景。附图说明图1为拟穴青蟹抗菌肽Spamplin58-82对鲍曼不动杆菌(a)和单核细胞增生李斯特菌(b)的杀菌动力学图；在图1中，横坐标为时间(min)，纵坐标为杀菌指数(％)。图2为拟穴青蟹抗菌肽Spamplin58-82抑制腐皮镰孢菌孢子萌发实验图；抗菌肽Spamplin58-82终浓度为A：0μM；B：1.5μM；C：3μM；D：6μM；E：12μM；F：24μM；G：48μM；H：96μM。图3为拟穴青蟹抗菌肽Spamplin58-82抑制黑曲霉孢子萌发实验图；抗菌肽Spamplin58-82终浓度为A：0μM；B：1.5μM；C：3μM；D：6μM；E：12μM；F：24μM；G：48μM；H：96μM。图4为拟穴青蟹抗菌肽Spamplin58-82与鲍曼不动杆菌作用后扫描电镜观察图；其中，A：鲍曼不动杆菌；B：鲍曼不动杆菌+12μMSpamplin58-82；C：鲍曼不动杆菌+24μMSpamplin58-82。图5为拟穴青蟹抗菌肽Spamplin58-82与单核细胞增生李斯特菌作用后扫描电镜观察图；其中，A：单核细胞增生李斯特菌；B：单核细胞增生李斯特菌+6μMSpamplin58-82；C：单核细胞增生李本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种拟穴青蟹抗菌肽Spamplin

【技术特征摘要】
1.一种拟穴青蟹抗菌肽Spamplin58-82，其特征在于：其氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。


2.一种权利要求1所述的拟穴青蟹抗菌肽Spamplin58-82在制备抗菌剂中的应用。


3.一种抗菌剂，其特征在于：所述抗菌剂包括氨基酸序列如SEQIDNO.1所示的拟穴青蟹抗菌肽Spamplin58-82。


4.根据权利要求3所述的抗菌剂，其特征在于：所述抗菌剂用于抑制和/或杀灭革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌或真菌中的至少一种；所述革兰氏阳性菌包括金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特菌、屎肠球菌、表皮葡萄球菌或蜡状芽孢杆菌中的至少一种；所述革兰氏阴性菌包括鲍曼不动杆菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌、施氏假单胞菌或弗氏志贺氏菌中的至少一种；所述真菌包括黑曲霉、赭曲霉、尖孢镰孢、腐皮镰孢、禾谷镰孢或新型隐球菌中的至少一种。

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【专利技术属性】
技术研发人员：王克坚，朱学武，陈芳奕，陈慧芸，彭会，李双，
申请(专利权)人：厦门大学，
类型：发明
国别省市：福建;35