lncRNA XR_595534.2在制备治疗或预防慢性疼痛的药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了lncRNA XR_595534.2在制备治疗或预防慢性疼痛的药物中的应用。本发明专利技术以大鼠眶下神经慢性压迫性损伤诱导的三叉神经痛为疼痛模型，筛选得到在模型中特异性、差异性高表达的长链非编码RNA基因lncRNA XR_595534.2，并提供治疗以lncRNA XR_595534.2为靶点的疾病的干扰RNA。本发明专利技术首次发现了在疼痛模型中特异性、差异性高表达的lncRNA XR_595534.2，定位注射干扰RNA可显著降低其表达，缓解疼痛行为反应，可用于制备以lncRNA‑XR595534.2为靶点的三叉神经痛、神经病理性痛、偏头痛及癌性疼痛的预防或治疗药物。

【技术实现步骤摘要】
lncRNAXR_595534.2在制备治疗或预防慢性疼痛的药物中的应用
本专利技术涉及生物技术及药物领域，尤其涉及lncRNAXR_595534.2在制备治疗或预防慢性疼痛的药物中的应用。
技术介绍
慢性疼痛(如三叉神经痛、偏头痛、神经病理性痛、癌性疼痛等)是严重危害人类身心健康和生活质量的慢性疾病，被喻为“不死的癌症”，其反复疼痛发作、迁延难治的特征使患者长期遭受折磨，而且会诱发焦虑、抑郁和恐惧等恶性情绪或精神异常，甚至会引起个体产生自杀倾向，严重危害患者的生命及生活质量。在众多能缓解疼痛的制剂中，根据药理作用机制，主要可分为两类：非甾体抗炎镇痛药及阿片受体激动药。前者仅对轻中度疼痛有效，用药后容易出现胃出血等严重副作用；后者止痛效果强烈，但对慢性神经性痛疗效差，并伴随有呼吸抑制和便秘等，尤其患者长期使用后机体易对其止痛作用产生耐受，并可产生依赖和成瘾。因此，寻求新的安全有效的止痛药物，但又能避免严重副作用的新的制剂显得尤为迫切。表观遗传学是研究基因表达发生了可遗传改变，但DNA序列并不发生改变的一门生物学分支，其是组织炎症、损伤和疾病状态等不良因素刺激导致慢性疼痛形成的重要机制。长链非编码RNA(lncRNA)在表观遗传学调控中扮演重要的角色，它们是一类转录本长度超过200个核苷酸的RNA分子，在表观遗传调控、转录水平及转录后调节等多种层面上实现对基因表达、细胞分化及功能的调控，进而广泛参与机体的生理和病理过程，如胚胎发育、炎症和疼痛疾病中有重要的调控作用。因而，加强疼痛(如三叉神经痛、神经病理性痛及偏头痛等)外周敏化神经生物学机制及其表观遗传学调控(如lncRNA)研究，将不仅有助于发现临床疼痛治疗药物的有益靶标，并且对于提高人类生活质量和健康水平具有重大意义。
技术实现思路
为解决上述技术问题，本专利技术以大鼠眶下神经慢性压迫性损伤(CCI-ION)诱导的三叉神经痛为疼痛模型，筛选得到了在疼痛模型中特异性、差异性高表达的长链非编码RNA基因lncRNAXR_595534.2，并提供治疗以lncRNAXR_595534.2为治疗靶点的疾病的小干扰RNA(siRNA)。本专利技术的第一个目的是提供lncRNAXR_595534.2在制备治疗或预防慢性疼痛的药物中的应用。进一步地，所述的慢性疼痛包括三叉神经痛、偏头痛、神经病理性痛或癌性疼痛。进一步地，所述的应用是以lncRNAXR_595534.2为治疗靶点，制备干扰lncRNAXR_595534.2表达的药物。本专利技术的第二个目的是提供一种干扰RNA，所述的干扰RNA能够靶向干扰lncRNAXR_595534.2表达。进一步地，所述的干扰RNA包含核苷酸序列CCGUGAACUGAAGCUUCAU(SEQIDNO.1)。进一步地，所述的干扰RNA正义链包含如下核苷酸序列：5’-CCGUGAACUGAAGCUUCAU-3’；所述的干扰RNA的反义链包含如下核苷酸序列：5’-AUGAAGCUUCAGUUCACGG-3’(SEQIDNO.2)。进一步地，所述的干扰RNA包含悬挂碱基TT；所述的悬挂碱基位于所述的干扰RNA的正义链和反义链的3’末端。进一步地，包含悬挂碱基TT的干扰RNA的正义链序列为：5’-CCGUGAACUGAAGCUUCAUTT-3’(SEQIDNO.3)；反义链序列为：5’-AUGAAGCUUCAGUUCACGGTT-3’(SEQIDNO.4)。进一步地，所述的干扰RNA可采用胆固醇、磷酸化、巯基化中的一种或多种进行修饰。本专利技术的第三个目的是提供一种治疗慢性疼痛的药物，所述的药物由0.1-100％的干扰RNA和0-99.9％的药用辅料组成。借由上述方案，本专利技术至少具有以下优点：本专利技术首次发现了在疼痛模型中特异性、差异性高表达的lncRNA基因lncRNAXR_595534.2，定位注射干扰RNA(序列CCGUGAACUGAAGCUUCAU)可显著降低lncRNAXR_595534.2表达，缓解疼痛行为反应，可用于制备以lncRNA-XR595534.2为靶点的三叉神经痛、神经病理性痛、偏头痛及癌性疼痛的预防或治疗药物。上述说明仅是本专利技术技术方案的概述，为了能够更清楚了解本专利技术的技术手段，并可依照说明书的内容予以实施，以下以本专利技术的较佳实施例并配合详细附图说明如后。附图说明图1A为眶下神经慢性压迫性损伤(CCI-ION)模型大鼠机械性痛阈值图；图1B为高通量测序结果显示CCI-ION模型大鼠TG组织差异性高表达的lncRNAs；图2为荧光定量PCR检测CCI-ION模型大鼠TG组织lncRNAXR_595534.2表达显著升高；图3为TG内定位注射siRNA干扰序列可有效降低CCI-ION模型大鼠TG组织lncRNAXR_595534.2的表达水平；图4为动物行为学检测显示TG定位注射siRNA干扰序列显著翻转CCI-ION模型大鼠机械性痛敏反应；图5A为TG内定位注射siRNA干扰序列能有效降低正常大鼠TG组织中慢病毒过表达的lncRNAXR_595534.2水平；图5B为正常大鼠TG定位注射慢病毒过表达lncRNAXR_595534.2后，其机械痛阈值显著降低，TG内定位注射siRNA可显著翻转大鼠痛行为反应。具体实施方式下面结合实施例，对本专利技术的具体实施方式作进一步详细描述。以下实施例用于说明本专利技术，但不用来限制本专利技术的范围。实施例1：高通量测序结果显示CCI-ION模型大鼠TG组织差异性高表达的lncRNAs(1)眶下神经慢性压迫性损伤(CCI-ION)模型成年雄性健康的Sprague-Dawley大鼠，体重180–250克，由苏州大学实验动物中心提供。动物中心的卫生级核定文件编号：SYXK(苏)2007-0035。实验前，让动物在饲养环境中适应三天，并进行适应性刺激训练。采用实验室常规做法建立模型：采用4％水合氯醛按照1毫升/100克的剂量以腹腔注射方式对大鼠进行麻醉，以仰卧位的姿势将大鼠固定在手术台上，于左上颌第一磨牙水平用无菌刀片划开，采用钝性弯曲的玻璃棒小心分离周围组织，直至暴露眶下神经。在其两端分别用5-0丝线进行结扎，间距为2毫米，力度不宜过大。手术结束后，用棉球擦拭血迹并涂抹青霉素钠防止感染。假手术组只需按上述方法钝性分离眶下神经，无需结扎。(2)大鼠须垫部机械痛阈值测定用vonFrey细丝(Stoelting公司，型号NC12775)刺激大鼠须垫部，直至大鼠出现逃避行为视为阳性反应。从1克开始，连续刺激大鼠须垫部5次，若有三次出现阳性反应，则给予小一级的机械刺激；若未能出现阳性反应，则给予大一级的机械刺激。设定15克为最大的机械刺激强度，并且在双盲的条件下进行，将实验动物出现阳性反应的最小强度视为大鼠的机械痛阈值。最终痛阈值计算公式为：50％阈值(克)＝(10[Xf+Kδ])/10000。(本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种lncRNA XR_595534.2在制备治疗或预防慢性疼痛的药物中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.一种lncRNAXR_595534.2在制备治疗或预防慢性疼痛的药物中的应用。


2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的慢性疼痛为三叉神经痛、偏头痛、神经病理性痛或癌性疼痛中的一种或多种。


3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的应用是以lncRNAXR_595534.2为治疗靶点，制备干扰lncRNAXR_595534.2表达的药物。


4.一种干扰RNA，其特征在于，所述的干扰RNA能够靶向干扰权利要求1所述的lncRNAXR_595534.2的表达。


5.根据权利要求4所述的干扰RNA，其特征在于，所述的干扰RNA包含核苷酸序列CCGUGAACUGAAGCUUCAU。


6.根据权利要求5所述的干扰RNA，其特征在于，所述的干扰RNA正义链包含如下核苷酸序列：5’-CCGUGAACUGAA...

【专利技术属性】
技术研发人员：陶金，齐任飞，张园，孙玉芳，汤顺，蒋星红，
申请(专利权)人：苏州大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32