一种高抑菌活性平卧菊三七生物碱的提取方法，包括以下步骤：（1）粉碎过筛；（2）超临界CO2萃取；（3）分离；（4）真空干燥；（5）高压结晶；（6）洗涤干燥；（7）电磁场结晶；（8）过滤；（9）洗涤干燥。本发明专利技术先用超临界CO2萃取和大孔吸附树脂分离，然后通过高压结晶和电磁场结晶获得纯度≥95%的平卧菊三七生物碱晶体。本发明专利技术所提取到的平卧菊三七生物碱抑菌活性较强，对病毒RSV和HSV-1均有较好的抑制作用，其效果均接近黄连碱晶体，能广泛应用于食品和药品领域，市场前景广阔。场前景广阔。
【技术实现步骤摘要】
一种高抑菌活性平卧菊三七生物碱的提取方法
[0001]本专利技术涉及一种植物生物碱的提取分离方法，具体涉及一种从平卧菊三七植物中提取具有高抑菌活性的生物碱提取分离方法。
技术介绍
[0002]平卧菊三七(Gynura procumbens(Lour.)Merr.)为菊科，菊三七属攀援草本植物，2012 年被国家卫生部批准为新资源食品。大量研究表明，平卧菊三七含有大量的绿原酸、类黄酮和生物碱等活性成分，具有清热解毒、活血通络、提高人体免疫力和抗病毒等功效。
[0003]目前，平卧菊三七功效活性成分的提取分离工作主要集中在绿原酸、黄酮类化合物和多糖等方面，对于生物碱的提取方法研究较少。一些植物生物碱因其具有抑菌、抗肿瘤和降血糖等功效,而且成本低，因此成为研究的热点。特别是食品行业，为了延长产品货架期常常加入食品防腐剂，而过多食用人工合成的防腐剂不利于人体健康。因此，迫切希望能从平卧菊三七植物中提取高效安全的抑菌防腐剂。
[0004]生物碱是植物次生代谢产物中一类含氮的碱性有机化合物，多数具有复杂的含氮杂环，是中草药中重要的有效成分之一。目前从植物中分离出的生物碱约有5000～7000种，根据其结构的不同，可分为有机胺类、吲哚类、异喹啉类、吡啶类、莨菪烷类生物碱。大多数生物碱不溶于水或难溶于水，易溶于氯仿、乙醚、乙醇、丙酮等有机溶剂。有机溶剂的使用虽然有助于生物碱提取分离，但也会造成环境的污染和生物碱安全性差的问题。
[0005]因此，希望有一种兼顾安全性和高效性的平卧菊三七生物碱的提取分离方法，所提取分离的生物碱具有较强抑菌活性，可将其添加到食品中不仅能抑制各种有害微生物的生长，同时还能有助于消费者抵抗病毒，保持身体健康。
技术实现思路
[0006]本专利技术所要解决的技术问题是，克服现有技术存在的上述缺陷，提供一种提取过程对环境污染少，提取分离纯化效率高，产品安全性好且抑菌活性强的平卧菊三七生物碱的提取分离方法。
[0007]本专利技术提取的平卧菊三七生物碱化合物的分子式为C7H
11
NO2，命名为Arecaidine，化学结构式为：
[0008][0009]本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案如下：
[0010]一种高抑菌活性平卧菊三七生物碱的提取方法，包括以下步骤：
[0011](1)粉碎过筛：将平卧菊三七全草洗净，去杂，沥干，干燥，粉碎，得平卧菊三七全草粉末；
[0012](2)超临界CO2萃取：将步骤(1)所得平卧菊三七粉末置于萃取釜中，然后分别对萃取釜、分离釜和储罐预热，当达到设定温度时进行系统加压，加入无水乙醇作为夹带剂，循环萃取，经分离釜分离，获得提取液；
[0013](3)分离：将步骤(2)所得提取液经大孔吸附树脂吸附，洗脱，收集，得到洗脱液；
[0014](4)真空干燥：将步骤(3)所得洗脱液进行真空干燥，得到总生物碱干物质；
[0015](5)高压结晶：在步骤(4)所得总生物碱干物质中加入无水乙醇，形成总生物碱无水乙醇饱和溶液，倒入压力容器中，加压待溶液温度充分冷却结晶后泄压，得到高压结晶混合溶液；
[0016](6)洗涤干燥：将步骤(5)所获高压结晶混合溶液过滤，再将过滤所得湿晶体用无水冰乙醇洗涤1～2次，真空干燥至恒重，获得粗晶体；
[0017](7)电磁场结晶：将步骤(6)所得粗晶体放入容器中用溶剂溶解，然后置于电磁场中进行真空浓缩结晶，结晶完成后，降至常温，破坏真空度，获得晶体混合溶液；
[0018](8)过滤：将步骤(7)所得的晶体混合溶液用滤布过滤，获得结晶体；
[0019](9)洗涤干燥：将步骤(8)所得的结晶体用无水冰乙醇洗涤，然后真空干燥，即获得高纯度的平卧菊三七生物碱结晶体。
[0020]进一步，步骤(1)中，所述干燥的温度为65℃～75℃，干燥至水分质量含量为8％～14％，过筛用筛网目数优选为60目。
[0021]进一步，步骤(2)中，所述萃取釜中超临界CO2萃取条件为：萃取温度45～55℃，萃取压力22～25MPa，萃取时间6～10min。
[0022]进一步，步骤(2)中，所述无水乙醇的加入方式优选为：每隔50～60min按平卧菊三七粉末质量1g︰1ml～1g︰3ml比例加入。
[0023]进一步，步骤(2)中，所述分离釜中的条件是：温度35～40℃，压力13～16MPa，时间4～6min。
[0024]进一步，步骤(3)中，所述大孔吸附树脂为D101型大孔吸附树脂；所述大孔吸附树脂的吸附流速为2～6BV/h，温度为30～60℃；所述洗脱是采用体积浓度为10～40％的乙醇作为洗脱液，流速为1～4BV/h，温度为10～40℃。
[0025]进一步，步骤(4)中，所述真空干燥的温度为55～60℃，真空度为50～90KPa，干燥的时间为4～6h。
[0026]进一步，步骤(5)中，所述总生物碱饱和溶液的配制方法是：按总生物碱干物质1g︰ 2ml～1g︰5ml比例加入无水乙醇，然后在温度为50～60℃条件下溶解；所述加压的压力优选为40～65Mpa，压力维持的时间优选为30～100min。
[0027]进一步，步骤(6)中，所述过滤用滤网目数为200～250目。所述无水冰乙醇的温度为
ꢀ-
25～-5℃。
[0028]进一步，步骤(7)中，所述溶剂溶解是指按粗晶体质量为1g︰2ml～1g︰5ml比例加入无水乙醇溶解。所述降至常温是指，按照1～2℃/min的速度由40～50℃缓慢降至常温。
[0029]进一步，步骤(7)中，所述电磁场的磁通量密度为0.2～0.7T。
[0030]进一步，步骤(7)中，所述真空浓缩结晶时的真空度为80～100KPa。
[0031]进一步，步骤(8)中，所述滤布的目数为200～250目。
[0032]进一步，步骤(9)中，所述真空干燥的温度为40～45℃，真空度为50～90KPa，时间
为20～24h。
[0033]与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：
[0034]1)本专利技术通过超临界CO2萃取技术获得高纯度的生物碱提取液，然后将提取液置于高压下在冷却过程中加速晶核的形成和晶体的生长，从而快速获得生物碱结晶；
[0035]2)本专利技术将粗结晶溶液置于电磁场中进行减压浓缩结晶分离，通过磁场作用对分子和原子的聚集状态、迁移速度和方向产生影响，增加生物碱间的碰撞机会，促进晶核形成和晶体生长，同时借助于粗结晶溶液中各种物质之间极性、电荷和磁敏感性等的不同对它们产生的影响，从而增加物质之间的分离度，达到分离纯化的目的；
[0036]3)本专利技术未使用任何有毒有害的化学试剂，对环境无污染；
[0037]总之，本专利技术克服了现有技术的不足，提供了一种高纯度平卧菊三七生物碱的提取方法，且制得生物碱具有较强的抑菌活性，对病毒RSV和HSV-1均有较好的抑制作用，其效果均接近黄连碱晶体。
具体实施方本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种高抑菌活性平卧菊三七生物碱的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）粉碎过筛：将平卧菊三七全草洗净去杂，沥干，干燥，粉碎，得平卧菊三七全草粉末；（2）超临界CO2萃取：将步骤（1）所得平卧菊三七粉末置于萃取釜中，然后分别对萃取釜、分离釜和储罐预热，当达到设定温度时进行系统加压，加入无水乙醇作为夹带剂，循环萃取，经分离釜获得提取液；（3）分离：将步骤（2）所得提取液经大孔吸附树脂吸附，洗脱，收集，得到洗脱液；（4）真空干燥：将步骤（3）所得洗脱液进行真空干燥，得到总生物碱干物质；（5）高压结晶：在步骤（4）所得总生物碱干物质中加入无水乙醇，溶解，形成总生物碱饱和溶液，倒入于压力容器中，加压，待充分冷却结晶后泄压，得到高压结晶混合溶液；（6）洗涤干燥：将步骤（5）所获高压结晶混合溶液用滤网过滤，然后用无水冰乙醇洗涤过滤所得晶体，接着真空干燥至恒重，获得粗晶体；（7）电磁场结晶：将步骤（6）所得粗晶体放入容器中用溶剂溶解，然后置于电磁场中进行真空浓缩结晶，结晶完毕后降至常温，破坏真空度，获得晶体混合溶液；（8）过滤：将步骤（7）所得的晶体混合溶液用滤布过滤，获得结晶体；（9）洗涤干燥：将步骤（8）所得的结晶体用无水冰乙醇洗涤，然后真空干燥，即获得高纯度的平卧菊三七生物碱结晶体。2.根据权利要求1所述的高抑菌活性平卧菊三七生物碱的提取方法，其特征在于，步骤（1）中，所述干燥的温度为65℃～75℃，干燥至水分质量含量为8%～14%，过筛用筛网目数优选为60目。3.根据权利要求1或2所述的高抑菌活性平卧菊三七生物碱的提取方法，其特征在于，步骤（2）中，所述萃取釜中超临界CO2萃取条件为：萃取温度45～55℃，萃取压力22～25MPa，萃取时间6～10min；所述无水乙醇的加入方式优选为：每隔50～60min按平卧菊三七粉末质量1g︰1ml～1g︰3ml比例加入；所述分离釜中的条件是：温度35...
【专利技术属性】
技术研发人员：李安平，余江帆，唐玉妹，王乐，李刚，
申请(专利权)人：中南林业科技大学，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。