一种人参特有化合物精氨酸糖苷AF的分离纯化新方法技术

精氨酸单糖苷英文名为Arginyl

【技术实现步骤摘要】
一种人参特有化合物精氨酸糖苷AF的分离纯化新方法


[0001]本专利技术涉及一种从人参相关加工品中提取化合物的方法，具体说是一种从红参中高效提取精氨酸单糖苷AF的方法及应用。

技术介绍

[0002]人参为传统名贵药材，在《神农本草经》中被列为上品。AF是鲜人参在加工蒸制成为红参的过程中，发生的梅拉德反应产物，郑毅男首次发现并鉴定了其结构,研究发现在人参加工成生晒参、红参时AF含量较高，可达2.51％
[1,2]。鲜人参在加工为红参过程中，葡萄糖与精氨酸发生羰醛缩和反应，经Amadori重排而生成AF。人参精氨酸单糖苷(AF)含量在红参中最高可达2.51％以上，并且在人参根、西洋参根及其非药用部位(如：茎叶、果实)，以及相关加工品中均有所发现
[3,4]。其后实验研究表明,AF具有增强免疫、抑制脂质过氧化，对于预防动脉粥样硬化有一定的调节作用。Kyoung
‑
Soo
[5]和Lee KH等
[6]研究AF对SD大鼠饮食摄食蔗糖/淀粉后血糖的影响，发现AF能够明显降低小鼠饮食蔗糖/淀粉后血糖的水平，同时,AF
[7]对2型糖尿病大鼠具有很好的降血糖活性。这一研究大大提高了人参非皂苷类物质得的地位。
[0003]目前，AF主要提取方法为红参粉末用高浓度乙醇萃取，去上清，沉淀水提醇沉，然后过阳离子树脂柱分离得。但此方法杂质偏多，且后续过阳离子树脂需要用到氨水溶液洗脱，氨水溶液味道较为刺激,对人体和环境有一定得危害。
[0004]而本专利技术使用水饱和正丁醇作为萃取液不仅能把皂苷除去，还能除糖除色素等各种杂质弥补了现有分离方法的不足，且后续用醋酸水溶液混合一定量的三氯化铁代替乙醇溶液制备AF简化了步骤并提高了提取率，同时抑制了AF的分解，安全环保，无刺激气味，通过多次试验结果表明以此方法提取AF纯度增加，其操作简单，且节约成本，安全环保。
[0005]本
技术实现思路

[0006]本专利技术公开一种从红参中高效提取AF的方法，为一种新的提取方法：红参粉末用水饱和正丁醇萃取除去杂质，沉淀用有机酸(醋酸)水溶液混合一定量的三氯化铁超声提取，滤液醇沉过硅胶和聚丙烯酰胺凝胶柱得AF，具有操作简易，安全环保，提取率高，产物刺激性小和稳定性高等特点。
[0007]本专利技术通过以下技术方案来实现：
[0008]一种高效提取精氨酸单糖苷(AF)的方法，具体包括如下步骤：人参相关加工品粉末用水饱和正丁醇萃取，得沉淀，再用含有一定量的三氯化铁的pH为4.5～5的醋酸水溶液去超声提取，过滤，从滤液中获得精氨酸单糖苷。
[0009]作为本专利技术的一种优选技术方案：所述人参相关加工品包括但不限于红参，人参根、西洋参根及其非药用部位(如：茎叶、果实)，优选红参。
[0010]作为本专利技术的一种优选技术方案：人参相关加工品粉末重量与醋酸水溶液体积的比，按g/mL为1：10。
[0011]作为本专利技术的一种优选技术方案：人参相关加工品粉末重量与三氯化铁质量的
比，按照g/g为1：0.3。
[0012]作为本专利技术的一种优选技术方案：前述方法进一步包括：滤液用无水乙醇沉淀，抽滤去除上清液，沉淀过硅胶柱，用70％乙醇水溶液洗脱，收集各部分洗脱液，合并富含AF成分的洗脱液，浓缩后继续过聚丙烯酰胺凝胶柱，用0.2％醋酸水溶液洗脱，收集富含AF的洗脱液，浓缩冷冻干燥即得AF。
[0013]作为本专利技术的一种优选技术方案：人参相关加工品粉末用水饱和正丁醇萃取包括：人参相关加工品粉末过80目筛，粉末加入到水饱和正丁醇中，萃取3次，离心，过滤，去除上清液，人参相关加工品粉末重量与水饱和正丁醇体积的比，按g/mL为1：100。
[0014]通过大量的实验研究发现，AF在酸性条件下比较稳定，优选pH值为4.0
‑
6.0的酸性水溶液，酸浓度太高或太低均会影响红参中AF的提取与分离，优选醋酸的酸性溶液。更为重要的是，与一定量的三氯化铁组合能提高AF的提取率并增加物质的稳定性，可使AF的提取率提高20
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40％。
[0015]本专利技术提取物通过HPLC分析法测试计算出AF的纯度可达98％以上，从红参中提取AF的得率可达1.2％
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2.1％。
[0016]作为本专利技术的一种优选技术方案：本专利技术精氨酸单糖苷的提取方法，包括以下步骤：
[0017]将人参相关加工品粉末(80目)用水饱和正丁醇搅拌过夜，离心，过滤，去除上清液，得沉淀，再用pH为4.5的醋酸水溶液混合一定量的三氯化铁去超声提取，过滤，去除不溶部分，滤液用无水乙醇沉淀，抽滤去除上清液，沉淀过200
‑
300硅胶柱，用70％乙醇水溶液洗脱，收集各部分洗脱液，合并富含AF成分的洗脱液，浓缩后继续过聚丙烯酰胺凝胶柱，用0.2％醋酸水溶液洗脱，收集富含AF的洗脱液，浓缩冷冻干燥即得AF。
[0018]作为本专利技术的一种优选技术方案：1g红参粉末，置入100mL的水饱和正丁醇萃取三次，沉淀置于10mL的pH为4.5的醋酸水溶液混合0.3g的三氯化铁中，超声提取60min，提取液经乙醇醇沉洗脱，抽滤得粗提取物，过200
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300硅胶和聚丙烯酰胺凝胶柱得AF。作为其优选技术方案：提取液用无水乙醇沉淀，抽滤去除上清液，沉淀过硅胶柱，用70％乙醇水溶液洗脱，收集各部分洗脱液，合并富含AF成分的洗脱液，浓缩后继续过聚丙烯酰胺凝胶柱，用0.2％醋酸水溶液洗脱，收集富含AF的洗脱液，浓缩冷冻干燥即得AF。
[0019]本专利技术相对于现有技术的积极效果在于：
[0020]本专利技术中，首次使用水饱和正丁醇作为萃取媒介，醋酸水溶液混合一定量的三氯化铁作为提取溶剂提取AF，提取率可以达到1.9％以上，同时降低了提取成本，且安全环保，提取率高。
[0021]以水饱和正丁醇为萃取媒介，沉淀中皂苷、多糖和色素残留量少，易于后续分离提纯；以pH为4.5的醋酸水溶液混合一定量的三氯化铁提取AF，抑制了AF的水解，提高了AF提取率，简化了提取步骤，节约了成本。
[0022]最为重要的是，醋酸作为易挥发的成分，不会对后续分离纯化产生影响，且对人体无伤害，三氯化铁也易过滤除去，增加了AF的稳定性，使提取率得以增加。
附图说明：
[0023]附图1：最终产物中AF含量测定示意图。
[0024]参考文献
[0025][1]Ha KS,Jo SH,Kang BH,Apostolidis E,Lee MS,Jang HD,et al.In vitro and in vivo antihyperglycemic effect of 2 amadori rearrangement compounds,arginyl
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fructose and arginyl
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fructosyl
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glucose.J Food Sci.2011；76:188
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种高效提取精氨酸单糖苷(AF)的方法，其特征在于：具体包括如下步骤：人参相关加工品粉末用水饱和正丁醇萃取，得沉淀，再用含有一定量的三氯化铁的pH为4.5
‑
5的醋酸水溶液去超声提取，过滤，从滤液中获得精氨酸单糖苷。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述人参相关加工品包括但不限于红参，人参根、西洋参根及其非药用部位(如：茎叶、果实)。3.根据权利要求1所述的AF的提取方法，其特征在于：人参相关加工品粉末重量与醋酸水溶液体积的比，按g/mL为1：10。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：人参相关加工品粉末重量与三氯化铁质量的比，按照g/g为1：0.3。5.根据权利要求1
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4任一项所述的方法，其特征在于：进一步包括：滤液用无水乙醇沉淀，抽滤去除上清液，沉淀过硅胶柱，用70％乙醇水溶液洗脱，收集各部分洗脱液，合并富含AF成分的洗脱液，浓缩后继续过聚丙烯酰胺凝胶柱，用0.2％醋酸水溶液洗脱，收集富含AF的洗脱液，浓缩冷冻干燥即得AF。6.根据权利要求1
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4任一项所述的方法，其特征在于：人参相关加工品粉末用水饱和正丁醇萃取包括：人参相关加工品粉末过80目筛，粉末加入到水饱和正丁醇中，萃取3次，离心，过滤，去...

【专利技术属性】
技术研发人员：李伟，段月阳，刘伟，高栩飞，陈轩，王梓，
申请(专利权)人：吉林农业大学，
类型：发明
国别省市：