一种低污染绣球菌维生素D2提取物的制备方法技术

本方案公开一种低污染绣球菌维生素D2提取物的制备方法，包括以下步骤：S1、将研磨过筛后的绣球菌子实体超声分散于碱醇溶液中，对碱醇溶液同时施加脉冲电场及紫外光照射处理后，过滤取滤液，得第一提取液；S2、加热第一提取液，皂化反应2

【技术实现步骤摘要】
一种低污染绣球菌维生素D2提取物的制备方法


[0001]本专利技术涉及绣球菌深加工
，具体涉及一种低污染绣球菌维生素D2提取物的制备方法。

技术介绍

[0002]维生素D是人体必须的脂溶性类固醇衍生物，除调节钙磷代谢的营养功能外，还具有抗肿瘤、预防心血管病、自身免疫性疾病及糖尿病等作用。与健康密切相关的形式有维生素D2和维生素D3。维生素D3可通过人体表皮细胞的7
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脱氢胆固醇经日光照射后异构化获得，而维生素D2人体自身无法合成。我国儿童软骨病、佝偻病和老年骨质疏松症的发病率较高，因此，有必要寻求多种膳食途径补充机体维生素D2的水平。
[0003]维生素D2的来源有酵母发酵法、青霉素废菌丝体提取法和食用菌转化法三种，并已分别应用到药品和食品工业中。食品工业所使用的维生素D2对纯度的要求一般没有药品对纯度的要求高，所以食品工业常采用食用菌来源的维生素D2，同时可以利用食用菌的风味。
[0004]绣球菌，又名绣球菇，是非褶孔菌目、绣球菌科、绣球菌属。子实体中等至大形，肉质，由一个粗壮的柄上发出许多分枝，枝端形成无数曲折的瓣片，形似巨大的绣球而得名，因其具有超高的激活免疫能力，在日本有"梦幻神奇菇"之称，普通蘑菇生长在阴面，而绣球菇每天需要10h以上的照射，是世界上唯一的"阳光蘑菇"，因此绣球菌中除了维生素D2前体物质麦角固醇外，本身也含有较高含量的维生素D2。
[0005]绣球菌还含有麦角固醇，在阳光和紫外线照射下可转变为维生素D，能促进钙磷吸收，有利于骨骼形成，预防儿童佝偻病、成人骨质疏松症和骨质软化症。
[0006]现有技术中，公开号为CN201810244359.1的中国专利公开了一种高纯度食用菌维生素D2提取物的制备工艺，一种高纯度食用菌维生素D2提取物的制备工艺得到维生素D2，但其却忽视了真菌类如绣球菌生长的过程中由于生长环境中存在重金属污染，且作为大型真菌，绣球菌极易富集重金属，尤其是铬，因此制备的维生素D2提取物中含有的污染物较高。

技术实现思路

[0007]为解决上述问题，本专利技术提供一种低污染绣球菌维生素D2提取物的制备方法，维生素D2提取物不含重金属，污染性低，安全可靠。
[0008]本专利技术的解决的技术方案是，一种低污染绣球菌维生素D2提取物的制备方法，包括以下步骤：S1、将研磨过筛后的绣球菌子实体超声分散于碱醇溶液中，对所述碱醇溶液同时施加脉冲电场及紫外光照射处理后，过滤取滤液，得第一提取液，本方案中的脉冲电场为高压脉冲电场，作用于分散悬浊液，高压脉冲电场是把液态食品作为电解质置于容器内，与容器边缘的两个放电电极通过高压电流，产生电脉冲进行加工的方法，可瞬间使被处理细胞的细胞壁和细胞膜电位紊乱，改变其通透性，甚至可击穿细胞壁和细胞膜，使其发生不可逆
破坏，细胞中组分流出，如在细胞膜内的麦角固醇、维生素D2、脂质、绣球菌蛋白、多糖等等，在细胞组分溶出的同时，其溶出组分受到紫外光照射，吸收其波长光源能量，麦角固醇快速高效转化生成维生素D2，经脉冲电场和紫外光照的协同处理后，第一提取液含有的物质为溶于碱醇的维生素D2、可溶性蛋白、脂质、可溶性多糖；S2、加热所述第一提取液，皂化反应2
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4h后，离心分离取上清，得第二提取液，本步骤通过加热第一提取液使其在碱醇溶液中发生皂化反应，一方面将脂质变为脂肪酸，另一方面将可溶性蛋白高温加热使其发生不可逆变性，绣球菌中可溶性蛋白包括硫蛋白，在绣球菌生长的过程中由于生长环境中存在重金属污染，且作为大型真菌，绣球菌极易富集重金属，尤其是铬，由于硫蛋白富含半胱氨酸的短肽，对多种重金属有高度亲和性，它是分子质量较低，半胱氨酸残基和金属含量极高的蛋白质，形成金属硫蛋白，蛋白质会变性后，重金属随硫蛋白的变性而解析，从而溶于溶液中呈离子态重金属，经过皂化反应去除了脂质和蛋白之后，第二提取液中包括的物质有重金属离子、维生素D2、醇、羧酸盐、可溶性多糖；S3、以不锈钢电极板为阴极，以石墨电极板为阳极，对所述第二提取液施加脉冲电场，电解还原反应后得混合液，将所述混合液离心分离取滤液，得第三提取液，通过步骤S2使得重金属离子从蛋白上解析后，利用电解还原法富集重金属，在含重金属的污水中插入电极，然后通入一定强度的直流电，重金属在电场的作用下定向移动，在电极上析出重金属单质或在电极附近富集，从而清除重金属，在阴极，由于重金属离子电极电位的差异，重金属离子在阴极被还原为重金属单质或在电极附近富集，取出电极后，将混合液离心分离，得到的第三提取液中含有的物质为维生素D2、醇、羧酸盐、可溶性多糖，成功去除绣球菌中的重金属，得到低污染的维生素D2提取混合物；S4、75
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95℃下旋转蒸发所述第三提取液30
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60min，得混合液，离心分离所述混合液取下层油状物，即得维生素D2提取物，由于维生素D2溶于醇不溶于水，因此在低于水的沸点而高于醇的沸点下旋蒸除醇，使得维生素D2析出，即得维生素D2提取物；优选地，所述绣球菌子实体的粒径为100
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200目，较细的绣球菌子实体颗粒能提高细胞组分的溶出率。
[0009]优选地，所述步骤S1中，脉冲电场的电场强度为30
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40Kv/cm，脉冲宽度为6
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20
µ
s，本步骤中的脉冲电场的设置是为了细胞组分的溶出，因此所需电场强度较高。
[0010]优选地，所述紫外光由280
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315nm的UVB照射和200
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280nm的UVC照射组合而成，通过UVB和UVC组合的紫外光对绣球菌原料进行照射处理，可以将蘑菇原料中富含的麦角固醇转化为维生素D2，同时UVC紫外光还可以对绣球菌原料进行消毒，UVB和UVC组合的紫外光波长范围小，麦角固醇被照射后产生的副产物少。
[0011]优选地，所述碱醇溶液中，碱液与醇的质量比为1：1
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2，以提高细胞溶出物的溶解性。
[0012]优选地，所述步骤S3中，脉冲电场的电场强度为20
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30Kv/cm，脉冲宽度为6
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40
µ
s，此步骤的脉冲电场是为电解还原重金属提供电压条件，在含重金属的污水中插入电极，然后通入一定强度的直流电，重金属在电场的作用下定向移动，在电极上析出重金属单质或在电极附近富集，从而清除重金属。
[0013]优选地，所述步骤S4还包括在所述混合液中加入饱和氯化钠溶液，加入饱和氯化钠溶液提高水相中的饱和度，避免维生素D2微溶于水而降低产率。
[0014]优选地，所述碱液为NaOH溶液或KOH溶液，所述碱液的pH为9
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11，强碱有利于皂化反应。
[0015]优选地，所述碱醇溶液中的醇为乙醇，选用无毒无害的乙醇更为安全。
[0016]优选地，所述步骤S2中，第一提取液的加热温度为90
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100℃，加热至90
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100℃以使得蛋白发生本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种低污染绣球菌维生素D2提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、将研磨过筛后的绣球菌子实体超声分散于碱醇溶液中，对所述碱醇溶液同时施加脉冲电场及紫外光照射处理后，过滤取滤液，得第一提取液；S2、加热所述第一提取液，皂化反应2
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4h后，离心分离取上清，得第二提取液；S3、以不锈钢电极板为阴极，以石墨电极板为阳极，对所述第二提取液施加脉冲电场，电解还原反应后得混合液，将所述混合液离心分离取滤液，得第三提取液；S4、75
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95℃下旋转蒸发所述第三提取液30
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60min，得混合液，离心分离所述混合液取下层油状物，即得维生素D2提取物。2.根据权利要求1所述的一种低污染绣球菌维生素D2提取物的制备方法，其特征在于，所述绣球菌子实体的粒径为100
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200目。3.根据权利要求1所述的一种低污染绣球菌维生素D2提取物的制备方法，其特征在于，所述步骤S1中，脉冲电场的电场强度为30
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40Kv/cm，脉冲宽度为6
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20
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s。4.根据权利要求1所述的一种低污染绣球菌维生素D2提取物的制备方法，其特征在于，所述紫外...

【专利技术属性】
技术研发人员：王国强，陈美英，
申请(专利权)人：福建万菇生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：