一种抗菌肽BuforinIIB的改造体镇痛肽BRL及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种抗菌肽Buforin IIB的改造体镇痛肽BRL及其应用。所述镇痛肽BRL的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，其是根据抗菌肽Buforin IIB的氨基酸序列经过改造获得的；该镇痛肽BRL具有显著的抑菌活性、镇痛活性和抗炎活性，且结构简单、获取方便。所述镇痛肽BRL能够应用于治疗或缓解疼痛的药物，或者治疗或缓解炎症的药物的制备，因此具有很好的的临床应用前景。应用前景。应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种抗菌肽Buforin IIB的改造体镇痛肽BRL及其应用


[0001]本专利技术属于生物医学领域，具体涉及一种抗菌肽Buforin IIB的改造体镇痛肽BRL及其应用。

技术介绍

[0002]抗菌肽是生物体基因编码的一种天然小分子多肽，也是生物体免疫系统的一种重要分子。抗菌肽Buforin II对细菌(G+/G
‑
)和真菌有广谱高效的杀菌能力，其对真菌的杀菌效果相较于细菌更强，这也是相较于其他Buforin类似物的独特优势。Buforin II还可通过抑制SNARE复合体的形成抑制膜融合，有效地抑制神经递质释放，可用于治疗皮肤皱纹、因神经递质释放过多引起的神经性疾病。有研究者通过将不同多肽的片段与Buforin核心序列拼接进行改造，进而得到了抑菌效果更强的抗菌肽Buforin IIB。
[0003]目前，多肽作为一类具有生物活性的分子，在疾病治疗和组织修复等医学领域得到了广泛的关注和应用，并且人工合成多肽用于生物材料修饰，避免了生物来源的蛋白质的免疫风险，毒副作用低，生物活性高、相容性好，开发为新型多肽类镇痛药已成为一种新的趋势。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是提供了一种抗菌肽Buforin IIB的改造体镇痛肽BRL及其应用。所述镇痛肽BRL具有显著的镇痛活性和抗炎活性，其结构简单、制备方便。
[0005]为了实现上述的目的，本专利技术采用了以下的技术方案：
[0006]本专利技术提供了一种抗菌肽Buforin IIB的改造体镇痛肽BRL，所述镇痛肽BRL的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
[0007]进一步的，所述镇痛肽BRL具有显著的镇痛活性、抗炎活性和抑菌活性。
[0008]进一步的：所述镇痛肽BRL是根据抗菌肽Buforin IIB的氨基酸序列经过改造获得的。
[0009]进一步的：所述抗菌肽Buforin IIB的氨基酸序列为RAGL QFPLG RLLR RLLR RLLR。
[0010]本专利技术还提供了所述的抗菌肽Buforin IIB的改造体镇痛肽BRL在制备用于治疗或缓解疼痛的药物中的应用。
[0011]进一步的，所述疼痛包括炎症引起的疼痛、高温或热刺激引起的疼痛、腹痛、急性疼痛。
[0012]进一步的，所述镇痛肽BRL的使用浓度为5
‑
10mg/ml。
[0013]进一步的，所述镇痛肽BRL能够显著的缓解疼痛。
[0014]进一步的，所述镇痛肽BRL能够显著的缓解急性疼痛和强直期疼痛。
[0015]本专利技术还提供了所述的抗菌肽Buforin IIB的改造体镇痛肽BRL在制备用于抗炎的药物中的应用。
[0016]进一步的，所述镇痛肽BRL能够明显的抑制炎症。
[0017]本专利技术还提供了一种用于抗炎或/和镇痛的药物，所述药物含有抗菌肽Buforin IIB的改造体镇痛肽BRL。
[0018]与现有技术相比，本专利技术的优点和技术效果是：
[0019]本专利技术是经抗菌肽Buforin IIB改造得到的新型镇痛肽BRL，该镇痛肽BRL的氨基酸序列经蛋白质数据库进行搜寻比较，未发现有任何相同多肽，并且镇痛肽BRL具有结构简单、镇痛作用好的优点。本专利技术通过实验验证了镇痛肽BRL具有显著的镇痛作用和抗炎活性，在小鼠疼痛实验动物模型实验和角叉菜胶足肿胀实验中均显示了很好的镇痛和抗炎的作用，且应用范围广泛，能够用于制备抗炎或/和镇痛的药物，并且与其他的镇痛多肽相比，本专利技术的镇痛肽BRL的结构简单、获取方便，具有广阔的临床应用前景。
附图说明
[0020]图1为镇痛肽BRL注射后小鼠第一次扭体时间结果。
[0021]图2为镇痛肽BRL注射后20分钟内小鼠的醋酸扭体次数结果。
[0022]图3为镇痛肽BRL注射后福尔马林实验小鼠一相结果。
[0023]图4为镇痛肽BRL注射后福尔马林实验小鼠二相结果。
具体实施方式
[0024]下面结合附图和具体实施例对本专利技术的技术方案做进一步详细的说明。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。
[0025]实施例1
[0026]1、镇痛肽BRL的获取
[0027]根据抗菌肽Buforin IIB的氨基酸序列(RAGLQFPLGRLLRRLLRRLLR)，对其进行改造，然后采用固相合成法合成后，分别使用醋酸扭体实验、福尔马林模型实验以及角叉菜胶模型实验进行镇痛活性筛选，从而获得具有镇痛活性的抗菌肽Buforin IIB改造体镇痛肽BRL。
[0028]2、镇痛肽BRL的分子鉴定
[0029](1)氨基酸序列的测定：
[0030]将人工固相合成的多肽粗产物经过高效液相色谱纯化，纯化得到的镇痛肽BRL，在全自动蛋白质序列测定仪上经Edman降解法，测定镇痛肽BRL的氨基酸全序列，结果表明镇痛肽BRL的氨基酸序列为RLLRRLLRRLLR(SEQ ID NO.1)。
[0031](2)质谱分子量测定：
[0032]基质辅助激光解吸飞行时间质谱检测纯化得到的镇痛肽BRL的精确分子量，所用仪器为Bruker公司AutoflexIIITOF/TOF质谱仪。结果显示镇痛肽BRL质谱测定的分子量为1634.10Da。
[0033]实施例2：镇痛肽BRL的镇痛活性测定
[0034]为深入了解镇痛肽BRL的镇痛活性，本专利技术利用经典的醋酸扭体动物疼痛模型、福尔马林动物疼痛模型以及角叉菜胶动物疼痛模型进行了研究，结果表明镇痛肽BRL在以上三种动物疼痛模型中均显示了较好的镇痛活性，分述如下：
[0035]1、镇痛肽BRL对小鼠醋酸扭体疼痛模型的镇痛作用
[0036]实验动物采用SPF级4周龄昆明种小鼠(体重18
‑
22g)。将小鼠随机分为对照组(无菌生理盐水)、阳性药物组(50mg/kg阿司匹林)、BRL组(50mg/kg镇痛肽BRL)，每组各10只小鼠。将镇痛肽BRL溶解于无菌生理盐水至稀释浓度为5mg/ml。BRL组的小鼠左侧腹腔注射5mg/ml的镇痛肽BRL稀释液200μl；阳性药物组小鼠左侧腹腔注射等体积的50mg/kg的阿司匹林；对照组小鼠左侧腹腔注射等体积的无菌生理盐水。30分钟后，三组小鼠的右侧腹腔注射250μl的0.7％的醋酸溶液，分别记录小鼠注射醋酸后第一次出现扭体的时间和20分钟内扭体的次数。
[0037]如图1和图2所示，镇痛肽BRL能延长小鼠第一次出现扭体的时间并减少小鼠醋酸扭体次数，显现了镇痛肽BRL对醋酸引起动物疼痛的具有明显的镇痛效果。
[0038]2、镇痛肽BRL对福尔马林诱导的疼痛实验
[0039]将小鼠随机分为对照组(无菌生理盐水)、阳性药物组(50mg/kg阿司匹林)、BRL组(50mg/kg镇痛肽BRL)，每组各10只小鼠。将镇痛肽BRL溶解于无菌生理盐水至稀释浓度为5mg/ml。BRL组的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗菌肽Buforin IIB的改造体镇痛肽BRL，其特征在于：所述镇痛肽BRL的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。2.根据权利要求1所述的抗菌肽Buforin IIB的改造体镇痛肽BRL，其特征在于：所述镇痛肽BRL具有显著的镇痛活性、抗炎活性和抑菌活性。3.根据权利要求1所述的抗菌肽Buforin IIB的改造体镇痛肽BRL，其特征在于：所述镇痛肽BRL是根据抗菌肽Buforin IIB的氨基酸序列经过改造获得的。4.权利要求1
‑
3任一项所述的抗菌肽Buforin IIB的改造体镇痛肽BRL在制备用于治疗或缓解疼痛的药物中的应用。5.根据权利要求4所述的抗菌肽Buforin IIB的改造体镇痛肽BRL在制备用于治疗或缓解疼痛的药物中的应用...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙同毅，高媛媛，张赛，罗禄军，
申请(专利权)人：潍坊医学院，
类型：发明
国别省市：