一种血橙外泌体微囊包埋冻干粉及其制备方法技术

技术编号:28130554 阅读:75 留言:0更新日期:2021-04-19 11:51
本发明专利技术提供一种血橙外泌体微囊包埋冻干粉,包括植物外泌体、一次包衣和二次包衣;所述一次包衣包裹于所述植物外泌体表面,所述二次包衣包裹于所述一次包衣表面;所述一次包衣的成分选自海藻酸盐;所述二次包衣的成分选自动物性纤维素,所述植物外泌体选自橙子外泌体,所述橙子外泌体选自甜橙外泌体,所述甜橙外泌体选自血橙外泌体;通过筛选合适的壁材及包埋方法对血橙外泌体进行微囊包埋,提高其浓度、活性、耐受性、靶向性等,使血橙外泌体可更广泛应用于不同基质的产品中,同时合适的壁材及包埋方法不仅不会影响产品品质,还有利于提高产品风味口感及稳定性,尤其是对本身有不良风味的外泌体,通过包埋可以遮掩一部分不良风味。通过包埋可以遮掩一部分不良风味。

【技术实现步骤摘要】
一种血橙外泌体微囊包埋冻干粉及其制备方法


[0001]本专利技术涉及生物
,尤其涉及一种血橙外泌体微囊包埋冻干粉及其制备方法。

技术介绍

[0002]现有植物外泌体的制备方法主要是通过提取分离制成液体直接使用,但液态的外泌体浓度较低,对温度也较为敏感,需冷藏储存、运输,含植物外泌体的产品在加工、存贮、运输中受到温度、水分、等环境因素的胁迫,限制了外泌体的应用;将外泌体进行干燥后,可克服水分影响,常用的干燥方式主要有喷雾干燥和真空冷冻干燥,其中,喷雾干燥法成本低,效率高,但是由于需要经过高温,会影响外泌体结构及活性,这种干燥方式更适合热敏性低的液体样品,采用真空冷冻干燥后,易储存并可延长保质期,扩宽外泌体的使用范围,既可以用于液体产品也可以用于固体饮料、压片糖果、胶囊等,但直接将外泌体冻干,在冻干过程中可能对外泌体结构引起一定的破坏且直接冻干后易吸潮;无论是液体还是冻干后的外泌体,在应用于产品时,加工过程中其活性会受到一定影响,其进入体内后也会受胆盐、胃酸等影响,降低活性及靶向性。所以需要研究一种能对外泌体进行保护并可提高其利用率的新方法对其进行处理;为了克服以上问题,许多保护技术被研究和利用。其中,微囊技术凭借粒径小和对包埋物质保护性好、释放性佳等特点得以研究应用。但微胶囊的制备方法众多,壁材选择不合适和包埋方法不正确会引起微胶囊易簇集、易破裂、颗粒大小不均一等缺点,所以选择合适的壁材及包埋方法成为重点研究的方向。用微囊包埋技术对外泌体进行保护的方法和技术还未得以应用,需进行深入研究探索。同时选择合适的保护剂及干燥方式也影响着最终的活性和应用。

技术实现思路

[0003]针对现有技术存在的问题,本专利技术提供了一种血橙外泌体微囊包埋冻干粉及其制备方法。
[0004]为达到上述目的,本专利技术提供如下技术方案:一方面,提供一种植物外泌体微囊包埋冻干粉,包括植物外泌体、一次包衣和二次包衣;所述一次包衣包裹于所述植物外泌体表面,所述二次包衣包裹于所述一次包衣表面;所述一次包衣的成分选自海藻酸盐;所述二次包衣的成分选自动物性纤维素。
[0005]优选地,所述海藻酸盐选自海藻酸钠或海藻酸钙;所述动物性纤维素选自壳寡糖。
[0006]优选地,所述的植物外泌体微囊包埋冻干粉还含有冻干保护剂。
[0007]优选地,所述冻干保护剂选自抗性糊精。
[0008]优选地,所述植物外泌体选自橙子外泌体,所述橙子外泌体选自血橙外泌体。
[0009]优选地,所述植物外泌体微囊包埋冻干粉的制备方法如下:采用海藻酸钠溶液对植物外泌体进行一次包被,获得一次包被微胶囊,采用壳寡糖对所述一次包被微胶囊进行二次包被,获得二次包被微胶囊,将所述微胶囊与抗性糊精混合后,进行真空冷冻干燥,获
得植物外泌体微囊冻干粉。
[0010]另一方面,提供一种植物外泌体微囊包埋冻干粉的制备方法,包含以下步骤:采用海藻酸钠溶液对植物外泌体进行一次包被,获得一次包被微胶囊,采用壳寡糖对所述一次包被微胶囊进行二次包被,获得二次包被微胶囊,将所述微胶囊与抗性糊精混合后,进行真空冷冻干燥,获得植物外泌体微囊冻干粉。
[0011]优选地,采用海藻酸钠溶液对植物外泌体进行一次包被的具体过程如下:在已制备好的植物外泌体提取液中加入藻酸盐寡糖,获得植物外泌体混合液,取质量分数为1%

4%的海藻酸钠溶液与浓度为15

25 mmoL/L的 Ca
2+

溶液混合均匀后,与所述植物外泌体混合液混合,然后加入植物油,在250

350 r/min转速下机械搅拌10

20 min,获得乳化液;向所述乳化液中逐滴加入含有冰乙酸的植物油,100

150 r/min转速下机械搅拌25

35 min,加入含0.9% NaCl,浓度为0.1 moL/L,pH值7.0的磷酸盐缓冲液,静置1~2 h,弃去油层,离心,洗涤,收集,即得到一次包被微胶囊。
[0012]优选地,所述植物外泌体混合液中藻酸盐寡糖的浓度为12

13 mg/mL。
[0013]优选地,所述植物外泌体混合液、海藻酸钠溶液、植物油和Ca
2+

溶液的体积比为1:1:10:24。
[0014]优选地,所述冰乙酸与 Ca
2+

的摩尔比为(4.5

5.5):1。
[0015]优选地,所述磷酸盐缓冲液的浓度为0.1 moL/L,pH 值为7.0。
[0016]优选地,所述植物油选自无菌大豆油或玉米胚芽油。
[0017]优选地,所述无菌大豆油中含有吐温80。
[0018]优选地,所述吐温80在无菌大豆油中的浓度为2μL/mL。
[0019]优选地,所述玉米胚芽油中含有span80。
[0020]优选地,所述span80在玉米胚芽油中的质量百分数为1.2%。
[0021]优选地,采用壳寡糖对所述一次包被微胶囊进行二次包被的具体过程如下:将壳寡糖溶解于纯净水中,pH值调节至7.0,配制成5 mg/mL的壳寡糖溶液,将所述一次包被微胶囊浸入过滤除菌的壳寡糖溶液中,用磁力搅拌器80

120 r/min搅拌15

30 min进行涂覆,过滤收集获得二次包被微胶囊。
[0022]优选地,所述壳寡糖与所述一次包被微胶囊的投料质量比为:(0.45

0.5):(8

10)。
[0023]优选地,真空冷冻干燥的具体过程如下:将所述二次包被微胶囊与冻干保护剂按照1:10

15的比例进行混合后,进行真空冷冻干燥,在进行真空冷却干燥前需进行具体的真空冷冻干燥工艺为:在

40~

30℃左右冷冻1

2h直至物料中心温度在

30~

20℃,再将物料放置加热板进行加热,在0.5~1h内将加热板温度升高至90~100℃,并在此温度下维持4

5h;在0.5~1h内将加热板温度降至80

90℃,并在此温度下维持4

5h;在0.5~1h内将加热板温度降至70

80℃,并在此温度下维持5h;在0.5~1h内将加热板温度升高至50

70℃,并在此温度下维持4

5h直至物料温度不再变化后取出,即为植物外泌体微囊冻干粉。
[0024]优选地,所述冻干保护剂选自抗性糊精。
[0025]优选地,所述植物外泌体选自生姜外泌体、大蒜外泌体、大葱外泌体、洋葱外泌体、葡萄柚外泌体、西兰花外泌体、黄瓜外泌体、姜黄外泌体、红葡萄外泌体、蔓越莓外泌体、红
石榴外泌体、橙子外泌体、秋葵外泌体、西红柿外泌体、木瓜外本文档来自技高网
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种血橙外泌体微囊包埋冻干粉,其特征在于,包括植物外泌体、一次包衣和二次包衣;所述一次包衣包裹于所述植物外泌体表面,所述二次包衣包裹于所述一次包衣表面;所述一次包衣的成分选自海藻酸盐;所述二次包衣的成分选自动物性纤维素,所述植物外泌体选自橙子外泌体,所述橙子外泌体选自甜橙外泌体,所述甜橙外泌体选自血橙外泌体。2.根据权利要求1所述的血橙外泌体微囊包埋冻干粉,其特征在于,所述海藻酸盐选自海藻酸钠或海藻酸钙;所述动物性纤维素选自壳寡糖。3.根据权利要求1所述的血橙外泌体微囊包埋冻干粉,其特征在于,还包括冻干保护剂,所述冻干保护剂选自抗性糊精。4.根据权利要求1所述的血橙外泌体微囊包埋冻干粉,其特征在于,所述血橙外泌体微囊包埋冻干粉的制备方法如下:采用海藻酸钠溶液对植物外泌体进行一次包被,获得一次包被微胶囊,采用壳寡糖对所述一次包被微胶囊进行二次包被,获得二次包被微胶囊,将所述微胶囊与抗性糊精混合后,进行真空冷冻干燥,获得血橙外泌体微囊冻干粉。5.一种血橙外泌体微囊包埋冻干粉的制备方法,其特征在于,包含以下步骤:采用海藻酸钠溶液对植物外泌体进行一次包被,获得一次包被微胶囊,采用壳寡糖对所述一次包被微胶囊进行二次包被,获得二次包被微胶囊,将所述微胶囊与抗性糊精混合后,进行真空冷冻干燥,获得植物外泌体微囊冻干粉。6.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,采用海藻酸钠溶液对植物外泌体进行一次包被的具体过程如下:在已制备好的植物外泌体提取液中加入藻酸盐寡糖,获得植物外泌体混合液,取质量分数为1%

4%的海藻酸盐溶液与浓度为15

25 mmoL/L的 Ca
2+

溶液混合均匀后,与...

【专利技术属性】
技术研发人员:曹美霞吴丹丹苟晓会李珍珍杨琼靳莉
申请(专利权)人:东莞自然衡健康科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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