一种快速简易消除血清中羟苯磺酸钙、酚磺乙胺药物干扰的尿酸试剂盒的制备方法技术

本发明专利技术的一种快速简易消除血清中羟苯磺酸钙、酚磺乙胺药物干扰的尿酸试剂盒的制备方法，其技术方案要点是包括以下步骤：R1试剂配制：称取缓冲液

【技术实现步骤摘要】
一种快速简易消除血清中羟苯磺酸钙、酚磺乙胺药物干扰的尿酸试剂盒的制备方法
本案为分案申请，具体为申请号：2020108215098，名称为：一种可消除血清中羟苯磺酸钙，酚磺乙胺药物干扰的尿酸试剂盒及其制备方法，申请日为：2020.08.15的分案申请。


[0001]本专利技术属于医学检验
，本专利技术涉及一种快速简易消除血清中羟苯磺酸钙、酚磺乙胺药物干扰的尿酸试剂盒的制备方法。

技术介绍

[0002]尿酸(Uric Acid，UA)是体内嘌呤类化合物代谢的终产物，呈弱酸性。尿酸既可以来自体内，也可以来自于食物中嘌呤的分解代谢。在体内，尿酸主要在肝脏中生成，小部分可经肝脏随胆汁排泄，其余大部分均从肾脏排泄。尿酸的溶解度较小，因而在体内浓度偏高时容易析出结晶。尿酸被认为与痛风、心脑血管疾病、代谢综合征、输尿管结石和肾脏疾病等的发生、发展密切相关。近年来，随着人们生活水平的提高和包含结构的改变，特别是富含蛋白质和嘌呤食物摄入的增加，高尿酸血症和痛风发病人数呈上升趋势。因此，临床检测血清尿酸浓度具有非常重要的参考价值和意义，其检测原理如下：血清尿酸浓度具有非常重要的参考价值和意义，其检测原理如下：现行市售检测试剂盒均为双试剂，基于Trinder反应的尿酸酶
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过氧化物酶偶联法具有灵敏度、适用于自动生化分析仪等优点，试剂R1内含过氧化物酶及Trinder
’
s A试剂，加入R2后，R2里含尿酸酶及Trinder
’
s试剂B，尿酸酶将尿酸水解成尿囊素及H2O2，H2O2再与R1里的过氧化物酶及Trinder
’
s A试剂共同存在下呈色进行测定。此反应过程均利用了酶的专一性，但生成的H2O2为强氧化剂，极易被血清中的还原性药物消耗而产生负干扰。
[0003]尿酸为嘌呤的最终代谢产物，当嘌呤代谢异常或肾脏对尿酸的排泄障碍均可引起血液中尿酸浓度升高或降低；痛风、肾功能障碍，恶性肿瘤，镉、铅等重金属中毒均可能引起血液尿酸浓度升高，药物如水杨酸、嘌呤醇的服用，严重肝病，肾脏排泄增加均会使血液尿酸含量降低。羟苯磺酸钙作为微血管保护及治疗的常用药，酚磺乙胺作为止血的常用药，这些药物均为强还原剂，当服用这些药物的病人在测定血浆尿酸含量时，这些还原性药物会与尿酸酶分解尿酸产生的H2O2直接反应，消耗掉H2O2造成尿酸值会严重的负偏差，造成医师诊断治疗时的误判。

技术实现思路

[0004]本专利技术公开一种快速简易消除血清中羟苯磺酸钙、酚磺乙胺药物干扰的尿酸试剂
盒，在试剂R1中加入高氧化还原电位之氧化型上述金属酸盐或五氧化二钒或三氯氧钒之一种或一种以上混合，利用所述金属酸盐或五氧化二钒或三氯氧钒之氧化特性，先将羟苯磺酸钙及酚磺乙胺氧化，避免了在加入试剂R2后尿酸酶分解尿酸产生的H2O2被消耗掉，操作简单，迅速得到准确的尿酸测定值。
[0005]本专利技术还公开一种快速简易消除血清中羟苯磺酸钙、酚磺乙胺药物干扰的尿酸试剂盒，包括试剂R1和试剂R2，所述试剂R1中包含缓冲液、过氧化物酶、抗坏血酸氧化酶、防腐剂、Trinder
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s反应剂A、金属酸盐；所述试剂R2包含缓冲液、血清白蛋白、尿酸酶、防腐剂、及Trinder
’
s反应剂B。选择合适的金属酸盐，做为氧化剂来消除尿酸测定时血清中羟苯磺酸钙及酚磺乙胺的干扰造成的负偏差，同时不影响试剂R1及试剂R2中各组分的稳定性，可以在加入尿酸酶(试剂R2)之前先将血清中的羟苯磺酸钙及酚磺乙胺氧化，避免其消耗在尿酸测定时产生的H2O2，使尿酸测定值准确。
[0006]优选的，所述金属酸盐包括氧化态镍酸盐、铁酸盐、钴酸盐、铬酸盐、锰酸盐、钒酸盐中的一种或几种，所述钒酸盐为偏钒酸盐、多聚钒酸盐、五氧化二钒或三氯氧钒一种或一种以上混合，所述的高氧化还原电位金属酸盐，包含所述含金属酸的钠、钾、铵盐。在多次试验中发现了采用元素周期表中23、24、25、26、27、28位各金属元素酸盐，选择氧化还原电位高的氧化态镍酸盐、钴酸盐、铬酸盐、锰酸盐、钒酸盐、偏钒酸盐、多聚钒酸盐、五氧化二钒或三氯氧钒均可做为氧化剂来消除尿酸测定时血清中羟苯磺酸钙及酚磺乙胺的干扰造成的负偏差，同时不影响试剂R1及试剂R2中各组分的稳定性。
[0007]优选的，所述的Trinder
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s反应剂A为4－氨基安替比林(4
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Aminoantipyrine,简称4－AAP)。本专利技术在一系列试验中发现必须将4
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AAP加在试剂R1中才可与上述金属酸盐或五氧化二钒及三氯氧钒及试剂R1中其他组分共同存在，Trinder
’
s反应另一试剂苯酚类化合物必须与尿酸酶共同存在试剂R2中，才可使本尿酸试剂盒除了可消除羟苯磺酸钙及酚磺乙胺的干扰外，才可使本试剂盒在保持2～8℃一年以上的稳定，而抗坏血酸氧化酶的量在上述范围内时可以有效地降低血液标本中抗坏血酸对尿酸测定所造成的干扰。
[0008]优选的，所述试剂R1中，缓冲液浓度为5～200mM，pH6.5～9.5；过氧化物酶含量1.0～10ku/升；抗坏血酸氧化酶1.0～10ku/升；Trinder
’
s反应剂A 0.3～5mM/升；防腐剂重量比为0.01％
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0.5％时，采用含量在0.1～10mM的金属酸盐氧化剂或五氧化二钒或三氯氧钒氧化剂。
[0009]优选的，所述试剂R1的缓冲液为BES、BICINE、DIPSO、EPPS、PIPES、HEPES、MOPS、TAPS、TAPSO、TES、Tricine、Tris、双甘肽、磷酸盐中的一种或一种以上混合；试剂R2所述的缓冲液为BES、BICINE、DIPSO、EPPS、PIPES、HEPES、MOPS、TAPS、TAPSO、TES、TRICINE、TRIS、双甘肽、磷酸盐中的一种或一种以上混合。
[0010]优选的，所述试剂R1及试剂R2中还含有非离子表面活性剂，其重量比含量为0.01％～0.3％，所述非离子表面活性剂具体为BRIJ，EMULGEN，TRITON，TWEEN中的一种或两种。
[0011]优选的，所述防腐剂为Proclin、硫酸庆大霉素、PARABEN、氯霉素、叠氮钠、硼砂之一种或两种。防腐剂能够阻却试剂中生物酶的作用，使试剂在一定时间内保持功效稳定，如
硼砂、叠氮钠等。
[0012]优选的，所述试剂R2中，缓冲液浓度为10～200mM、pH6.5～9.0；尿酸酶含量5
‑
20ku/升；Trinder
’
s反应剂B含量为0.1～20mM。
[0013]优选的，所述试剂R2内之Trinder
’
s反应剂B为TOOS、DHBS、DAOS、HDAOS、TBHBA、TOPS、TODB、4－氯酚的一种或两种以上混合。
[0014]一种快速简易消除血清中羟苯磺酸钙、酚磺乙胺药物干扰的尿酸试剂盒的制备方法：试剂R1配制：称取缓本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种快速简易消除血清中羟苯磺酸钙、酚磺乙胺药物干扰的尿酸试剂盒的制备方法，其特征在于包括以下步骤：R1试剂配制：称取缓冲液
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加入防腐剂
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搅拌溶解
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用氢氧化钠或盐酸调PH至8.0
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加入氧化剂
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搅拌溶解
→
调PH至8.0
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加入Trinder
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s反应剂A和非离子表面活性剂，混合均匀
→
2～8℃隔夜
→
加入抗坏血酸氧化酶和过氧化物酶
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搅拌溶解
→
2～8℃隔夜
→
检测、分装；所述的Trinder
’
s反应剂A为4－氨基安替比林，所述氧化剂包括五氧化二钒、高铁酸钠、偏钒酸钠、三氯氧钒中的任一种；R2试剂配制：称取缓冲液
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加入防腐剂
→
搅拌溶解
→
调PH至8.0
→
加入Trinder
’
s反应剂B和表面活性剂
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混合均匀
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2～8℃隔夜
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加入血清白蛋白，尿酸酶
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混合均匀
→
2～8℃隔夜
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检测、分装，所述Trinder
’
s反应剂B为TOOS、DHBS、HDAOS、TBHBA、TOPS、TODB、4－氯酚的一种或两种以上混合；所述试剂盒包括试剂R1和试剂R2，所述试剂R1中包含缓冲液、过氧化物酶、抗坏血酸氧化酶、防腐剂、Trinder
’
s反应剂A、氧化剂和非离子表面活性剂；所述试剂R2包含缓冲液、血清白蛋白、尿酸酶、防腐剂、Trinder
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s反应剂B和非离子表面活性剂；所述的Trinder
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s反应剂A为4－氨基安替比林，所述氧化剂包括五氧化二钒、高铁酸钠、偏钒酸钠、三氯氧钒中的任一种，所述Trinder

【专利技术属性】
技术研发人员：俞永标，
申请(专利权)人：中山标佳生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：