基于指纹图谱模型建立的清肺排毒汤的生产方法技术

本发明专利技术提供一种基于指纹图谱模型建立的清肺排毒汤的生产方法，包括预先使用标准供试品摸索具有最佳色谱参数的指纹质谱系统，然后用该色谱系统测试单味药的标准对照样品，一次性摸索和确定少量特定组分的指纹峰，从而建立简化的定性和定量指纹图谱模型，并利用该模型用于生产清肺排毒汤；该简化的指纹图谱模型能初步定性筛选不合格质量的清肺排毒汤产品，并能对合格产品进行定量分析，随后联合更全面的薄层色谱鉴别法对合格质量产品进行全面分析；本发明专利技术具有简化质量检测工艺、保留精确定量分析的效果、提高检测效率的技术效果。提高检测效率的技术效果。提高检测效率的技术效果。

【技术实现步骤摘要】
基于指纹图谱模型建立的清肺排毒汤的生产方法


[0001]本专利技术涉及清肺排毒汤的制备工艺的质量控制方法，具体是通过指纹图谱方法为制备“清肺排毒汤”的工艺和制剂提供所涉及中药材的鉴别、工艺参数的控制、成品质量分析的质量控制方法，以及涉及根据该质量控制方法所生产清肺排毒汤的方法。

技术介绍

[0002]清肺排毒汤来源于中医经典方剂组合，包括麻杏石甘汤、射干麻黄汤、小柴胡汤、五苓散，性味平和。该方的主要药物组成是：麻黄9g、炙甘草6g、杏仁9g、生石膏15～30g(先煎)、桂枝9g、泽泻9g、猪苓9g、白术9g、茯苓15g、柴胡16g、黄芩6g、姜半夏9g、生姜9g、紫菀9g、冬花9g、射干9g、细辛6g、山药12g、枳实6g、陈皮6g、藿香9g。
[0003]为了对中药组分进行有效地质量监控，必须对原料成分进行鉴别和有效含量的测定。其中，薄层鉴别法是药物质量标准建立中常用的方法，鉴别时将适宜的固定相涂抹在玻璃板、塑料或铝片上，从而形成均匀的薄层，展开后根据比移值(Rf)与适宜的对照物按同法所得的色谱图的比移值(Rf)进行对比，从而完成药品的鉴别、含量的测定。
[0004]近年来，利用指纹图谱技术来检测中药组分成为高效便捷的质量检测或监控的方法。所谓指纹图谱技术，是利用高效液相色谱(HPLC)对中药提取溶液进行液相色谱分析，通过图谱中表征中药特定组分的图谱特定峰线及其组合，以形成该中药特有的指纹图谱，从而完成对中药制剂的质量检测或监控。
[0005]例如，郑如文(小柴胡颗粒的高效液相指纹图谱研究，《中国医院用药评价与分析》2017 年第17卷第8期)报道了利用HPLC对小柴胡颗粒与其组成的7味中药(党参、甘草、大枣、生姜、柴胡、黄芩、半夏)的指纹图谱进行对比分析，并研究了小柴胡颗粒指纹图谱共有模式中35个共有峰中的26个峰在7味中药中的分布情况；而根据每味药材所对应的共有峰特点，可在一定程度上反应出小柴胡颗粒中药材的使用情况，从药材角度辨别出产品质量。然而，该方法需要通过大量试验测试共有的特征峰，同时所检测的指纹峰多达26个，这对于建立指纹图谱的过程带来繁琐和不便。
[0006]魏惠珍(麻杏石甘汤多波长切换指纹图谱研究，《时珍国医国药》2012年第23卷第1 期)报道了利用Agilent1100
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DAD检测器，流动相:乙腈
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0.1％磷酸，梯度洗脱，检测波长:0
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32min:215nm；32
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40min:350nm；40
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50min:254nm；进样量10μl，柱温:25℃，流速:1 ml/min，确定了麻杏石甘汤中12个共有指纹峰，从而建立HPLC指纹图谱模型。该方法可在一定程度上反应出麻杏石甘汤中药材的使用情况，从药材角度辨别出产品质量。然而，该方法需要通过大量试验测试共有的特征峰，同时所检测的指纹峰多达12个，这对于建立指纹图谱的过程带来繁琐和不便。
[0007]中国授权专利技术专利CN201510597933.8、专利技术名称“一种麻杏石甘汤配方颗粒的检测方法”公开了包括红外指纹图谱、薄层定性鉴别及HPLC含量测定来检测麻杏石甘汤的质量的方法，其中以盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱、苦杏仁苷作为特征峰，建立HPLC指纹图谱模型，取得较好的检测效果。然而，该方法需要预先进行红外指纹图谱和薄层分层分析进行初
筛，才能得到较少的3个特征指纹峰，整个过程对于建立指纹图谱的过程也带来繁琐和不便。
[0008]专利技术专利CN201711009683.7、专利技术名称“一种中药制剂的制备工艺”公开一种结合HPLC 指纹图谱检测的小柴胡汤制剂的制备方法，该方法包括对于制备的小柴胡汤颗粒提取液，根据柴胡、黄芩、人参、制半夏、炙甘草、生姜、大枣的所有HPLC质谱峰选择特征指纹图谱，从而为7种成分分别建立各自的特征指纹图谱，取得较好的检测效果。该专利技术基于该检测方法，还建立了小柴胡汤制剂的新制备方法。然而，该方法需要通过大量试验测试7种药味的各自的指纹特征峰，这对于建立指纹图谱的过程带来繁琐和不便。
[0009]此外，目前暂时没有关于五苓散和射干麻黄汤的建立指纹图谱来检测质量的相关现有技术的报道。
[0010]由此可见，现有技术中，对于通过指纹图谱来完成中药的质量检测或监控，以及通过该方法所建立的中药制备方法，普遍存在需要摸索和建立多个药味的特征指纹峰。然而，清肺排毒汤是由4种古方合并调整而成，其中药材成分多达20余种，而可检出的活性成分可能达到上百种。如果对于成品的颗粒中的不同活性成分进行逐一鉴别，并进行确定特征指纹峰，则需要相当大的筛选工作。同时，由于暂时没有关于五苓散和射干麻黄汤的建立指纹图谱来检测质量的相关现有技术的报道，因此对建立清肺排毒汤的指纹图谱检测方法带来更多的技术障碍。
[0011]此外，由于清肺排毒汤属于新近摸索确定的药方，暂时没有统一的生产标准，因此各个厂家根据实际情况进行生产，导致生产工艺各不相同，这可能对于中药制剂的标准化生产带来一定的不利影响。
[0012]因此，目前需要一种通过指纹图谱法对清肺排毒汤的产品质量进行质量监控的方法，以及需要基于该质量监控方法所带来的规范化生产方法。

技术实现思路

[0013]因此，本专利技术第一目的是提供一种基于指纹图谱模型建立的清肺排毒汤的生产方法该方法包括：取药：该方的主要药物组成是：麻黄9g、炙甘草6g、杏仁9g、生石膏15～30g(先煎)、桂枝9g、泽泻9g、猪苓9g、白术9g、茯苓15g、柴胡16g、黄芩6g、姜半夏9g、生姜9g、紫菀9g、冬花9g、射干9g、细辛6g、山药12g、枳实6g、陈皮6g、藿香9g；该方法的生产方法包括以下步骤：
[0014](1)建立简化的定性指纹图谱质谱模型，包括：
[0015]①
按比例称取适量的黄芩、枳实、款冬花、甘草和射干的单味标准对照药材，分别加水煎煮30min，过滤，取续滤液即得单味对照药材溶液；
[0016]②
将单味药材溶液进样20μl进行检测，得到色谱图；
[0017]③
分析5种单味药的指纹参数，并建立简化的指纹图谱模型，其中黄芩指纹峰的出峰时间是约27min、29min、33min、78min、86min、88min、104min；枳实的指纹峰的出峰时间是约42min、47min、53min、61min；款冬花的指纹峰的出峰时间是约46min、65min；甘草的指纹峰的出峰时间是约82min；射干的指纹峰的出峰时间是约95min；
[0018](2)取供试品颗粒1.0g，精密称定，置50ml容量瓶中，加水溶解并定容，摇匀，滤过，取续滤液；
[0019](3)将供试品溶液进样20μl进行检测，得到色谱图；
[0020](4)比较供试品溶液和上述定性指纹图谱模型在出峰时间25
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105min流出的色谱峰是否一致，如果一致则进行下一步检测，如果不一致直接判定待测样品不合格；
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于指纹图谱模型建立的清肺排毒汤的生产方法，包括取药：该方的主要药物组成是：麻黄9g、炙甘草6g、杏仁9g、生石膏15～30g(先煎)、桂枝9g、泽泻9g、猪苓9g、白术9g、茯苓15g、柴胡16g、黄芩6g、姜半夏9g、生姜9g、紫菀9g、冬花9g、射干9g、细辛6g、山药12g、枳实6g、陈皮6g、藿香9g；将上述二十一味药加水煎煮两次，滤过，合并煎液，滤液减压浓缩至清膏，加入麦芽糊精适量，干燥或粉碎，制成清肺排毒汤颗粒，对所制备的颗粒进行质量检测，并根据质量检测结果指导产品规范化生产，其特征在于：该质量检测的步骤包括：(1)建立简化的定性指纹图谱色谱模型，包括：
①
按比例称取适量的黄芩、枳实、款冬花、甘草和射干的单味标准对照药材，分别加水煎煮30min，过滤，取续滤液即得单味对照药材溶液；
②
将单味药材溶液进样20μl进行检测，得到色谱图；
③
分析5种单味药的指纹参数，并建立简化的指纹图谱模型，其中黄芩指纹峰的出峰时间是约27min、29min、33min、78min、86min、88min、104min；枳实的指纹峰的出峰时间是约42min、47min、53min、61min；款冬花的指纹峰的出峰时间是约46min、65min；甘草的指纹峰的出峰时间是约82min；射干的指纹峰的出峰时间是约95min；(2)取供试品颗粒1.0g，精密称定，置50ml容量瓶中，加水溶解并定容，摇匀，滤过，取续滤液；(3)将供试品溶液进样20μl进行检测，得到色谱图；(4)比较供试品溶液和上述定性指纹图谱模型在出峰时间25
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105min流出的色谱峰是否一致，如果一致则进行下一步检测，如果不一致直接判定待测样品不合格；(5)分别将供试品溶液和柚皮苷对照品、橙皮苷对照品、新橙皮苷对照品、黄芩苷对照品、汉黄芩苷对照品进样10μl进行检测，得到色谱图；(6)比较供试品溶液和上述对照品溶液在45
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90min流出的色谱峰以及mAU值是否一致，如果一致则判定待测样品符合初级质量标准，如果不一致直接判定待测样品不合格；(7)比较步骤(6)中供试品溶液和对照品溶液的峰值强度差异，并根据对照品溶液的标准浓度，确定供试品溶液中柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、黄芩苷、汉黄芩苷的含量；其中，上述任一步骤中，所述色谱参数为：柱温：30℃，进样量：20μl，流速：1ml/min，检测波长：278nm，流动相：2.根据权利要求1所述的基于指纹图谱模型建立的清肺排毒汤的生产方法，其特征在于：其中步骤(5)和步骤(6)用于建立定量的指纹图谱色谱模型，在步骤(5)中，取柚皮苷对照品、橙皮苷对照品、新橙皮苷对照品、黄芩苷对照品、汉黄芩苷对照品适量，精密称定，加甲醇分别制成每1ml含柚皮苷40μg、橙皮苷40μg、新橙皮苷40μg、汉黄芩苷40μg、黄芩苷100μg的溶液，即得对照品溶液；所述待测柚皮苷的指纹峰的出峰时间是约47min；待测橙皮苷的
指纹峰的出峰时间是约52min；待测新橙皮苷的指纹峰的出峰时间是约60min；待测黄芩苷(S)的指纹峰的出峰时间是约77min；待测汉黄芩苷的指纹峰的出峰时间是约87min。3.根据权利要求1或2所述的基于指纹图谱模型建立的清肺排毒汤的生产方法，其特征在于：其中步骤(6)中的判定一致的过程包括：将黄芩苷参照物峰相应的峰为S峰，计算各主要峰与S峰的相对保留时间和相对峰面积；其中供试品指纹图谱与对照指纹图谱的相似度不得低于0.90，且相对保留时间及相对峰面积在规定值的
±
10％之内，表明待测样品符合初级质量标准，如果未达到上述标准直接判定待测样品不合格。4.根据权利要求1
‑
3所述的基于指纹图谱模型建立的清肺排毒汤的生产方法，其特征在于：其中将二十一味药加水煎煮两次，其中第一次加10倍量水，浸泡0.5小时，煎煮1.0小时；第二次加10倍量水，煎煮1.0小时，合并煎液，滤过，合并煎液，滤液在70℃减压浓缩至相对密度1.03～1.05的清膏，加入麦芽糊精适量，干燥，或粉碎，制成颗粒。5.根据权利要求4所述的基于指纹图谱模型建立的清肺排毒汤的生产方法，其特征在于：其中每个处方量制成总量为40g，离心后的清膏含固量约为处方量10.5％，然后加入适量麦芽糊精，溶解，混匀，喷雾干燥，得浸膏粉；然后加适量粘合剂，沸腾制粒，整粒，制成颗粒1000g，并将颗粒分装成10g/袋，复合膜包装。6.一种联合指纹图谱模型和薄层色谱法来对清肺排毒汤制剂生产进行质量控制的方法，包括将二十一味药加水煎煮两次，滤过，合并煎液，滤液减压浓缩至清膏，加入麦芽糊精适量，干燥或粉碎，制成清肺排毒汤颗粒，对所制备的颗粒进行质量检测，并根据质量检测结果指导产品规范化生产，其特征在于：该质...

【专利技术属性】
技术研发人员：方铁铮，陆锡傍，姚振弘，赵留栓，龙飞，廖嘉媛，杨凯，
申请(专利权)人：广东一片天医药集团制药有限公司，
类型：发明
国别省市：