一种能够提供治疗有效量的白介素10的试剂及其抗肿瘤应用制造技术

本发明专利技术公开了一种能够提供治疗有效量的白介素10的试剂及其抗肿瘤应用，具体公开了能够提供治疗有效量的白介素10的试剂在制备用于预防或抑制肿瘤的药物中的用途。所述能够提供治疗有效量的白介素10的试剂选自治疗有效量白介素10、能够在受试者体内表达白介素10的药物、能够刺激受试者体内产生白介素10的药物。本发明专利技术还提供了白介素10化学修饰的信使核糖核酸，所述的信使核糖核酸具有编码至少一种白介素10蛋白的开放阅读框，所述的信使核糖核酸经过至少一种化学修饰。本发明专利技术克服了技术偏见发现了白介素10能够用于抑制具有白介素10受体的肿瘤，本发明专利技术提供的白介素10化学修饰的信使核糖核酸具有抑瘤潜力。

【技术实现步骤摘要】
一种能够提供治疗有效量的白介素10的试剂及其抗肿瘤应用
本专利技术属于医药生物领域，具体涉及一种白介素10化学修饰信使核糖核酸及其制备方法和应用。
技术介绍
肿瘤作为一种恶性疾病，其患病人数逐年递增。目前常规的肿瘤治疗方法(手术疗法、放疗、化疗等)都对机体正常组织具有损害且伴有严重的毒副作用，无法满足患者日益增长的临床需求。细胞因子是一类由活化的免疫细胞或非免疫细胞经刺激所合成、分泌的能作用于本身或其他细胞，具有介导和调节免疫炎症反应等生物学活性的小分子多肽类物质。细胞因子一般通过结合相应受体调节细胞生长、分化和效应，调节免疫应答。白介素2(IL2)，干扰素(IFN)等细胞因子很早就被发现，并应用于肿瘤治疗相关研究，取得了一定成果。但直接使用细胞因子作为治疗手段会产生一些严重的毒副作用，还存在半衰期短，稳定性差，免疫原性强等问题，影响了它们的临床应用。转录是一种无时无刻发生在生物体内的过程，是由遗传信息DNA走向蛋白质合成的第一步。在体外无细胞系统中，利用含有核糖核酸(RNA)转录酶、核糖核苷酸(NTP)等条件的体系，用脱氧核糖核酸(DNA)作为模版，模仿体内转录过程生成RNA，通过这样的技术则能够控制转录的基因(模版)、转录的过程和转录后RNA的用途。体外合成信使核糖核酸(mRNA)，并将其回输回体内，并在体内表达对应有功能的蛋白质可以用于疾病治疗，但由于mRNA本身的不稳定性(易被RNA酶降解)和免疫原性限制了它的应用。
技术实现思路
为解决上述问题，本专利技术发现并首次验证了细胞因子白介素10是肿瘤的作用靶点，在受试者体内给与能够激活白介素10受体的白介素10，则能够实现抗肿瘤的作用。本专利技术进一步通过构建白介素10化学修饰信使核糖核酸，使其能够在细胞内稳定持续表达细胞因子白介素10，实现了肿瘤治疗的目的。本专利技术一个方面提供了一种能够提供治疗有效量的白介素10的试剂在制备用于预防或抑制肿瘤的药物中的用途；本专利技术第二个方面提供了一种能够提供治疗有效量的白介素10的试剂在制备用于在激活白介素10受体或白介素10受体下游抑制肿瘤的通路的药物中用途。本专利技术第三个方面提供了一种能够提供治疗有效量的白介素10的试剂在预防或治疗肿瘤的用途。在本专利技术的技术方案中，所述能够提供治疗有效量的白介素10的试剂选自治疗有效量白介素10、能够在受试者体内表达白介素10的药物、能够刺激受试者体内产生白介素10的药物；在本专利技术的技术方案中，所述能够在受试者体内表达白介素10的药物选自能够编码白介素10的DNA、能够编码白介素10的RNA或者包含上述编码序列的载体；所述的载体选自水溶液、盐溶液、缓冲液、葡萄糖溶液、脂质体、阳离子脂质体、阳离子聚合物、溶血磷脂、病毒载体、质粒载体、mRNA载体、微环载体或化学合成的载体；在本专利技术的技术方案中，所述能够刺激受试者体内产生白介素10的药物选自诱导单核巨噬细胞、T辅助细胞、树突状细胞、B细胞、细胞毒性T细胞、γδT细胞、NK细胞、肥大细胞、中性粒细胞和嗜酸性细胞任意一种或多种的细胞合成并分泌白介素10的药物。例如，脂多糖、儿茶酚胺、CD36和p38丝裂原激活蛋白(MAP)激酶。在本专利技术的技术方案中，所述治疗有效量白介素10选自长循环、主动靶向肿瘤和或低降解的白介素10；优选地，所述长循环和或主动靶向肿瘤的白介素10通过长循环和或主动靶向的制剂负载白介素10，和或通过化学修饰白介素10实现长循环和或主动靶向的效果；所述低降解的白介素10为抑制白介素10的抑制剂，或所述抑制剂与白介素10联用。在本专利技术的技术方案中，所述能够提供治疗有效量的白介素10的试剂为，能够在受试者体内提供激活白介素10受体转录浓度的白介素10的试剂；优选地，能够在受试者体内表达白介素10的药物为能够在受试者体内表达激活白介素10受体转录浓度的白介素10的药物；能够刺激受试者体内产生白介素10的药物为能够刺激受试者内源分泌白介素，且分泌的白介素浓度达到激活白介素10受体转录浓度的药物。在本专利技术的技术方案中，肿瘤为实体瘤或非实体瘤，优选为实体瘤选自膀胱瘤、结直肠瘤、乳腺瘤、黑色素瘤、睾丸瘤、前列腺瘤、肾瘤、肾上腺瘤、腮腺瘤、肝瘤、子宫瘤、脑瘤、卵巢瘤、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、头颈癌、霍奇金淋巴瘤、食道瘤、胃癌、宫颈癌瘤、胰腺瘤、子宫内膜癌、胃肠道间质瘤、鼻腔和鼻旁窦癌、鼻咽癌、口腔和口咽癌、甲状腺癌、小肠癌、骨肉瘤、神经胶质瘤、多发性骨髓瘤、皮肤癌、胆囊癌、胆管癌、成视网膜细胞瘤、输卵管癌、腹膜癌、骨癌、胶质母细胞瘤；非实体瘤选自白血病、慢性淋巴细胞白血病、慢性粒细胞白血病、急性髓细胞白血病、突变的慢性髓性白血病，急性淋巴细胞白血病。在本专利技术的技术方案中，肿瘤为所述肿瘤部位的免疫细胞表面表达IL10受体的肿瘤，优选地，所述的免疫细胞选自单核巨噬细胞、T辅助细胞、树突状细胞、B细胞、细胞毒性T细胞、γδT细胞、NK细胞、肥大细胞、中性粒细胞和嗜酸性细胞。本专利技术第四个方面提供了一种化学修饰的信使核糖核酸，所述的信使核糖核酸具有编码至少一种白介素10蛋白的开放阅读框，所述的信使核糖核酸经过至少一种化学修饰。在本专利技术的技术方案中，所述的化学修饰选自核苷酸的碱基修饰为5’甲基胞嘧啶、假尿嘧啶、N6-甲基腺苷、肌苷、5羟甲基胞嘧啶、N1甲基腺苷、2-硫尿嘧啶、2-硫代胞嘧啶、3-甲基胞嘧啶、5-羟基胞嘧啶、5-溴胞嘧啶、5-氟胞嘧啶、5-氯胞嘧啶、6-偶氮胞嘧啶、氮杂胞嘧啶、5,6-二氢胞嘧啶、N4-乙基胞嘧啶、5-溴尿嘧啶，5-氯尿嘧啶，5-氟尿嘧啶、5-碘尿嘧啶、5-甲基尿嘧啶、5-甲基-2-硫尿嘧啶，2-硫尿嘧啶，4-硫尿嘧啶中的至少一种。在本专利技术的技术方案中，所述的开放阅读框上有还包含编码信号肽的序列。本专利技术第五个方面提供了一种组合物，所述组合物中包含前述的化学修饰信使核糖核酸。在本专利技术的技术方案中，所述的组合物中还包含至少一种介质，所述介质选自水溶液、盐溶液、缓冲液、葡萄糖溶液、脂质体、阳离子脂质体、阳离子聚合物、溶血磷脂、病毒载体、质粒载体、mRNA载体、微环或化学合成的载体。本专利技术第六个方面提供了一种抗肿瘤药物组合物，所述的抗肿瘤药物组合物包含治疗有效量前述的化学修饰的信使核糖核酸或者前述的组合物。在本专利技术的技术方案中，所述的肿瘤为肿瘤为所述肿瘤部位的免疫细胞表面表达白介素10受体的肿瘤，优选地，所述的免疫细胞选自单核巨噬细胞、T辅助细胞、树突状细胞、B细胞、细胞毒性T细胞、γδT细胞、NK细胞、肥大细胞、中性粒细胞和嗜酸性细胞。在本专利技术的技术方案中，所述的肿瘤选自膀胱瘤、结直肠瘤、乳腺瘤、黑色素瘤、睾丸瘤、前列腺瘤、肾瘤、肾上腺瘤、腮腺瘤、肝瘤、子宫瘤、脑瘤、卵巢瘤、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、头颈癌、霍奇金淋巴瘤、食道瘤、胃癌、宫颈癌瘤、胰腺瘤、子宫内膜癌、胃肠道间质瘤、鼻腔和鼻旁窦癌、鼻咽癌、口腔和口咽癌、甲状腺癌、小肠癌、骨肉瘤、神经胶质瘤、多发性骨髓瘤、皮肤癌、胆囊癌、胆管癌、成视网膜细胞本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.能够提供治疗有效量的白介素10的试剂在制备用于预防或抑制肿瘤的药物中的用途；/n优选地，所述能够提供治疗有效量的白介素10的试剂选自治疗有效量白介素10、能够在受试者体内表达白介素10的药物、能够刺激受试者体内产生白介素10的药物；/n更优选地，所述治疗有效量白介素10选自长循环、主动靶向肿瘤和或低降解的白介素10；所述长循环和或主动靶向肿瘤的白介素10通过长循环和或主动靶向的制剂负载白介素10获得，和或通过主动靶向和或长循环的化学修饰获得的白介素10；所述低降解的白介素10为抑制白介素10的抑制剂，或所述抑制剂与白介素10联用；/n更优选地，所述能够在受试者体内表达白介素10的药物选自能够编码白介素10的DNA、能够编码白介素10的RNA或者包含上述编码序列的载体；所述的载体选自水溶液、盐溶液、缓冲液、葡萄糖溶液、脂质体、阳离子脂质体、阳离子聚合物、溶血磷脂、病毒载体、质粒载体、mRNA载体、微环载体或化学合成的载体；/n更优选地，能够刺激受试者体内产生白介素10的药物选自诱导单核巨噬细胞、T辅助细胞、树突状细胞、B细胞、细胞毒性T细胞、γδT细胞、NK细胞、肥大细胞、中性粒细胞和嗜酸性细胞任意一种或多种的细胞合成并分泌白介素10的药物。/n...

【技术特征摘要】
1.能够提供治疗有效量的白介素10的试剂在制备用于预防或抑制肿瘤的药物中的用途；
优选地，所述能够提供治疗有效量的白介素10的试剂选自治疗有效量白介素10、能够在受试者体内表达白介素10的药物、能够刺激受试者体内产生白介素10的药物；
更优选地，所述治疗有效量白介素10选自长循环、主动靶向肿瘤和或低降解的白介素10；所述长循环和或主动靶向肿瘤的白介素10通过长循环和或主动靶向的制剂负载白介素10获得，和或通过主动靶向和或长循环的化学修饰获得的白介素10；所述低降解的白介素10为抑制白介素10的抑制剂，或所述抑制剂与白介素10联用；
更优选地，所述能够在受试者体内表达白介素10的药物选自能够编码白介素10的DNA、能够编码白介素10的RNA或者包含上述编码序列的载体；所述的载体选自水溶液、盐溶液、缓冲液、葡萄糖溶液、脂质体、阳离子脂质体、阳离子聚合物、溶血磷脂、病毒载体、质粒载体、mRNA载体、微环载体或化学合成的载体；
更优选地，能够刺激受试者体内产生白介素10的药物选自诱导单核巨噬细胞、T辅助细胞、树突状细胞、B细胞、细胞毒性T细胞、γδT细胞、NK细胞、肥大细胞、中性粒细胞和嗜酸性细胞任意一种或多种的细胞合成并分泌白介素10的药物。


2.能够提供治疗有效量的白介素10的试剂在制备用于在激活白介素10受体或白介素10受体下游抑制肿瘤的通路的药物中用途；
优选地，所述能够提供治疗有效量的白介素10的试剂选自治疗有效量白介素10、能够在受试者体内表达白介素10的药物、能够刺激受试者体内产生白介素10的药物；
更优选地，所述治疗有效量白介素10选自长循环、主动靶向肿瘤和或低降解的白介素10；所述长循环和或主动靶向肿瘤的白介素10通过长循环和或主动靶向的制剂负载白介素10获得，和或通过主动靶向和或长循环的化学修饰获得的白介素10；所述低降解的白介素10为抑制白介素10的抑制剂，或所述抑制剂与白介素10联用；
更优选地，所述能够在受试者体内表达白介素10的药物选自能够编码白介素10的DNA、能够编码白介素10的RNA或者包含上述编码序列的载体；所述的载体选自水溶液、盐溶液、缓冲液、葡萄糖溶液、脂质体、阳离子脂质体、阳离子聚合物、溶血磷脂、病毒载体、质粒载体、mRNA载体、微环载体或化学合成的载体；
更优选地，能够刺激受试者体内产生白介素10的药物选自诱导单核巨噬细胞、T辅助细胞、树突状细胞、B细胞、细胞毒性T细胞、γδT细胞、NK细胞、肥大细胞、中性粒细胞和嗜酸性细胞任意一种或多种的细胞合成并分泌白介素10的药物。


3.能够提供治疗有效量的白介素10的试剂在预防或治疗肿瘤的用途；
优选地，所述能够提供治疗有效量的白介素10的试剂选自治疗有效量白介素10、能够在受试者体内表达白介素10的药物、能够刺激受试者体内产生白介素10的药物；
更优选地，所述治疗有效量白介素10选自长循环、主动靶向肿瘤和或低降解的白介素10；所述长循环和或主动靶向肿瘤的白介素10通过长循环和或主动靶向的制剂负载白介素10获得，和或通过主动靶向和或长循环的化学修饰获得的白介素10；所述低降解的白介素10为抑制白介素10的抑制剂，或所述抑制剂与白介素10联用；
更优选地，所述能够在受试者体内表达白介素10的药物选自能够编码白介素10的DNA、能够编码白介素10的RNA或者包含上述编码序列的载体；所述的载体选自水溶液、盐溶液、缓冲液、葡萄糖溶液、脂质体、阳离子脂质体、阳离子聚合物、溶血磷脂、病毒载体、质粒载体、mRNA载体、微环载体或化学合成的载体；
更优选地，所述能够刺激受试者体内产生白介素10的药物选自诱导单核巨噬细胞、T辅助细胞、...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘陈立，陈茜，董宇轩，郭旋，胡勇，张昊，
申请(专利权)人：深圳先进技术研究院，
类型：发明
国别省市：广东;44