一株天坑深色内生真菌（DSE）菌株的应用制造技术

本发明专利技术涉及生物技术领域，特别涉及内生真菌菌株LY112及其应用。本发明专利技术公开了保藏编号为CGMCC NO.21071的新菌株Byssolophis sp.LY112，该菌株能有效促进铁皮石斛和甘蔗生长，同时还具有防治香蕉枯萎病的作用：接种该菌株后，铁皮石斛的组培苗干重较对照组提高了102.70％，盆栽苗干重较对照组增加了66.67％；甘蔗盆栽苗株高、鲜重和干重分别较对照增加了18.17％、50.57％和31.32％，促生效果显著；对香蕉枯萎病的室内防治效果达71.76％，防效优良，是一株对多种植物有良好促生、防病效果的内生真菌菌株，具有良好的开发价值。

【技术实现步骤摘要】
一株天坑深色内生真菌(DSE)菌株的应用
本专利技术涉及生物
，特别涉及内生真菌菌株LY112及其应用。
技术介绍
深色有隔内生真菌(DSE)是植物内生真菌的主要类群，其主要特征是菌丝颜色较深，具有明显隔膜，定殖于植物的根、表皮、皮层甚至纤维管束组织的细胞内或细胞间隙，能与植物共生，而不会引起植物病变，DSE可以在不同生境植物中定殖，同时，还可以和ECM和AM在植物根系中共同生存，没有宿主特异性，因此，对DSE菌株的研究开发能有效提升微生物的生物促生和生物防治应用能力，申请人团队一直致力于DSE的筛选和研究，研究过程中发现了很多具有优异性能的DSE菌株。在研究过程中，申请人发现，这类微生物不同菌株之间差异巨大，有的DSE菌株能促进植物生长，有的DSE菌株却抑制植物生长，有的DSE菌株的生物防治效果明显，有的DSE菌株却防效较差或者没有效果，因此，为了加强对此类微生物的利用，有必要坚持不懈的在此领域不断的进行菌株鉴定和筛选等工作，筛选出更多性促生、生防效果更好的菌株，有助于为内生真菌的开发利用提供丰富的种质资源保障。目前，申请人团队研发并获得了多株新种DSE菌株的授权，例如：申请号为201910884589.9专利技术名称为《枝孢瓶霉菌株LJ1及其应用》的内生真菌，该真菌由申请人柳州地区甘蔗围土壤分离而得，属于Cladophiaphora属新种，具有促进铁皮石斛、西红柿生长的作用，且具有防治香蕉枯萎病的作用；申请号为202010164610.0专利技术名称为《新属内生真菌TK815及其应用》的内生真菌，该真菌由申请人从广西百色市乐业县大石围天坑群白洞天坑的土壤中分离获得，具有促进铁皮石斛生长的作用；申请号为201911188968.0专利技术名称为《新种内生真菌LZ3及其应用》的内生真菌，该菌株具有促进香蕉生长，和防治香蕉枯萎病的作用；由此可见，内生真菌在农业自然环境保护中具有广阔的开发利用前景，但是目前的难点还是在于DSE涉及的微生物种类繁多，且多数为罕见稀少的新物种，其分类鉴定比较困难，且筛选工作繁琐和缓慢，为此，为了丰富具有促生、防效作用的内生真菌，从生物防治角度减少对化学农药和化肥的依赖，有必要坚持不懈的开展此项研究。
技术实现思路
鉴于上述内容，筛选出更多性状优良促生内生真菌，促进内生真菌种质资源的开发利用，本专利技术目的在于提供内生真菌菌株LY112及其应用及其在促进甘蔗和铁皮石斛生长、防治香蕉枯萎病上的应用。为达到上述目的，本专利技术筛选出一株内生真菌菌株Byssolophissp.LY112，其保藏编号为CGMCCNO.21071。属于真菌界，Byssolophis属，未知种。所述内生真菌保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCCNO.21071，保藏日期为2020年11月27日。本专利技术还包括所述内生真菌菌株Byssolophissp.LY112在促进铁皮石斛和/或甘蔗生长上的应用。本专利技术还包括一种应用所述内生真菌菌株Byssolophissp.LY112促进铁皮石斛和/或甘蔗生长的方法，所述方法为：将菌株LY112直接接种到植物组培苗和/或植株中。本专利技术还包括所述内生真菌菌株Byssolophissp.LY112在提高香蕉对香蕉枯萎病防治上的应用。本专利技术还包括一种应用所述内生真菌菌株Byssolophissp.LY112对香蕉枯萎病进行防治的方法，所述方法为：将菌株LY112直接接种到香蕉组培苗和/或植株中。本专利技术具有以下有益效果：本申请的新菌株Byssolophissp.LY112能够有效促进铁皮石斛和甘蔗生长，同时还具有防治香蕉枯萎病的作用：该菌株接种铁皮石斛组培苗后的干重较对照组提高了102.70％，接种铁皮石斛盆栽苗干重比对照组增加了66.67％，促生效果相当明显，且其对甘蔗的促生效果也非常明显，经过盆栽实验处理组的株高比对照组增加了18.17％；鲜重比对照组增加了50.57％；干重比对照组增加了31.32％；促生效果显著；对香蕉枯萎病的室内防治效果达71.76％；防效明显，是一株对多种植物有良好促生、防病效果的内生真菌菌株；在农业生物菌肥和病害生物防治领域具有很好的应用前景。【附图说明】图1为本专利技术LY112菌株在CMMY培养基上的菌落形态；图2为本专利技术菌株LY112的ITS系统发育树；图3为接种本专利技术菌株LY112对铁皮石斛组培苗生长的影响，图中左边平皿为不接种LY112的对照组，右边平皿为接种LY112的处理组；图4为接种本专利技术菌株LY112对甘蔗盆栽苗生长的影响图中左边盆栽为接种LY112的处理组，右边盆栽为不接种LY112的对照组。【具体实施方式】下面结合附图和实施例和试验对本专利技术作进一步说明。实施例1：本专利技术筛选出一株内生真菌菌株Byssolophissp.LY112，其保藏编号为CGMCCNO.21071。属于真菌界，Byssolophis属，未知种。所述内生真菌保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCCNO.21071，保藏日期为2020年11月27日。菌株LY112采用诱捕法分离自广西百色市乐业县大石围天坑群的原始森林。对菌株LY112进行研究后，认为其属于新种菌株，其分类标准如下：1、菌株的形态学分类该菌株在CMMY培养基上长速较慢，28℃下培养两周后菌落形态如图1所示：直径达45mm，气生菌丝浓密，菌落浅灰色，近圆形，绒毡状，菌落边缘平整。菌丝有隔，褐色，1.5-4.8μm。未观察到分生孢子和厚垣孢子。2、分子生物学鉴定该菌株的ITS序列NCBI网上比对结果与unculturedAscomycota相似性最高(99％)；LSU序列与Byssolophissphaerioides相似性最高(99％)；SSU序列与包括Byssolophissphaerioides在内的多个属种的相似性都高达99％。基于这3个基因，在网上下载相似性较高的序列分别构建了系统发育树，结果显示ITS进化树与unculturedAscomycota单独聚为一支，支持率为84％；结果显示三个系统树的拓扑结构差异较大，其中只有LSU进化树上LY112菌株与Byssolophissphaerioides以93％的支持率单独聚为一支，基于目前所掌握的鉴定信息，将LY112菌株鉴定为Byssolophis属下的未知种Byssolophissp.，其基于LSU序列构建的系统发育树如图2所示。图中可见，LY112与Byssolophissphaerioides的亲缘关系较近，单独聚类为一支。基于目前所掌握的鉴定信息，将LY112菌株鉴定为Byssolophis属下的未知种Byssolophissp.。实施例2：对铁皮石斛组培苗的促生长作用：(1)将LY112菌株活化后接种于燕麦培养基本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.内生真菌菌株Byssolophis sp.LY112，其保藏编号为CGMCC NO.21071。/n

【技术特征摘要】
1.内生真菌菌株Byssolophissp.LY112，其保藏编号为CGMCCNO.21071。


2.如权利要求1所述内生真菌菌株Byssolophissp.LY112在促进铁皮石斛和/或甘蔗生长上的应用。


3.一种应用如权利要求1所述内生真菌菌株Byssolophissp.LY112促进铁皮石斛和/或甘蔗生长的方法，其特征在于，所述方法为...

【专利技术属性】
技术研发人员：谢玲，龙艳艳，陈艳露，张艳，覃丽萍，曾凤花，农倩，
申请(专利权)人：广西壮族自治区农业科学院微生物研究所，
类型：发明
国别省市：广西;45