一株具有益生作用的贝莱斯芽胞杆菌及应用制造技术

本发明专利技术提供了一株具有益生作用的贝莱斯芽胞杆菌(Bacillus velezensis)及其应用，该菌分离自白羽肉鸡肠道，该菌株命名为NHB‑BvF5001，保藏编号为CGMCC No.21191。本发明专利技术的贝莱斯芽胞杆菌NHB‑BvF5001具有显著的益生性，可有效抑制肠道致病大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、伤寒沙门氏菌、沙门氏菌、志贺氏菌属、产气荚膜杆菌、彭氏变形杆菌、嗜水气单胞菌、副溶血弧菌等病原菌的生长繁殖。本发明专利技术的贝莱斯芽胞杆菌NHB‑BvF5001可有效调节动物肠道微生物平衡，抑制有害微生物生长，促进动物对营养的吸收，提高饲料转化率，提高动物生产性能。

【技术实现步骤摘要】
一株具有益生作用的贝莱斯芽胞杆菌及应用
本专利技术属于微生物学领域，具体地说，涉及一株具有益生作用的贝莱斯芽胞杆菌NHB-BvF5001及应用。
技术介绍
2019年7月9日中华人民共和国农业农村部公告第194号公告指出，自2020年7月1日起，饲料生产企业停止生产含有促生长类药物饲料添加剂(中药类除外)的商品饲料。因此，寻找抗生素的替代品和替代方案已经成为了畜牧业的重要研究内容，作为抗生素的替代品，益生菌越来越多的应用于动物营养和饲料中。益生菌是一类能改善动物胃肠道微生态平衡，有益于动物健康和生产性能发挥的微生物添加剂。其主要作用效果体现在改善动物新陈代谢，提高营养物质吸收和利用，提高免疫力，减少环境污染等方面发挥重要作用。目前，饲用益生菌主要包括乳酸菌类、芽胞类、光合细菌、酵母类、霉菌类。由于芽胞杆菌对干燥、高温、高压、氧化等不良环境抵抗力很强，这种稳定性增加了它作为益生菌的潜力。因此，获得新型具有益生特性的芽胞杆菌的研究具有重大意义。贝莱斯芽胞杆菌(Bacillusvelezensis)是一种广泛存在于环境中的多功能细菌。近年来，国内外研宄学者己经从多种环境介质中分离得到大量该菌株并且对其在工业、农业及环境修复等方面的作用进行了大量研究探索。贝莱斯芽胞杆菌是芽胞杆菌属中一种新兴的功能性菌种，已经有很多研究证明，贝莱斯芽胞杆菌在植物促生功能和抗植物病原菌方面能够发挥重要作用。另外，由于其具有将外界一氧化碳物转化为自身营养物质这一特性，贝莱斯芽胞杆菌被广泛应用于食品发酵领域，同时在环境保护、工业应用、养殖及医药等领域都具有相应的功能研究。分离和筛选抗病原菌且具有益生效果的贝莱斯芽胞杆菌，可以更好的应用于饲料添加剂，以代替抗生素。但贝莱斯芽胞杆菌作为益生菌制剂或饲料添加剂的研究与应用较少，尤其是在替代饲养抗生素和促进动物对营养的吸收，提高动物生产性能等方面。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种具有益生作用的贝莱斯芽胞杆菌NHB-BvF5001及其应用。为了实现本专利技术的目的，本专利技术的贝莱斯芽胞杆菌NHB-BvF5001(Bacillusvelezensis)是从健康白羽肉鸡肠道内容物中分离的芽胞杆菌菌株，通过菌落形态观察、抑菌性能检测、16SrDNA基因序列分析和体外益生效果评价得到，该菌株广谱抑菌、产酶丰富、益生性更加显著。其16SrDNA序列如SEQIDNO.1所示。该菌株已于2020年11月16日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101)，分类命名为贝莱斯芽胞杆菌(Bacillusvelezensis)，保藏编号为CGMCCNo.21191。本专利技术提供的贝莱斯芽胞杆菌(Bacillusvelezensis)NHB-BvF5001具有以下微生物学特征：贝莱斯芽胞杆菌NHB-BvF5001是革兰氏阳性杆菌，在营养琼脂培养基上生长良好，培养24h，菌落呈圆形，灰白色，无光泽，表面不光滑有褶皱，边缘整齐，中间有平坦凹陷。菌落直径4～6mm，菌落形态如图1，显微镜下菌体呈直杆状，好氧生长，经革兰氏染色后菌株形态如图2；贝莱斯芽胞杆菌NHB-BvF5001生长适宜温度范围：15℃-50℃，最适生长温度：25℃-45℃；生长适宜pH5.5-10，最适pH值为6-8。部分生理生化特性如表1。本专利技术提供了含有保藏编号为CGMCCNo.21191的贝莱斯芽胞杆菌NHB-BvF5001的液体菌剂。本专利技术提供了含有保藏编号为CGMCCNo.21191的贝莱斯芽胞杆菌NHB-BvF5001的动物饮水用饲料添加剂。饲料添加剂中贝莱斯芽胞杆菌NHB-BvF5001的活菌数为1.0×106-1.0×1010CFU/g。优选地，饲料添加剂中贝莱斯芽胞杆菌NHB-BvF5001的活菌数为1×107CFU/g。本专利技术提供了含有保藏编号为CGMCCNo.21191的贝莱斯芽胞杆菌NHB-BvF5001的药物，所述药物为预防或治疗动物腹泻的药物。本专利技术提供了含有保藏编号为CGMCCNo.21191的贝莱斯芽胞杆菌NHB-BvF5001或含有其的菌剂在提高饲料转化率，提高动物生产性能中的应用。本专利技术提供了含有保藏编号为CGMCCNo.21191的贝莱斯芽胞杆菌NHB-BvF5001或含有其的菌剂在制备预防或治疗动物腹泻的药物中的应用。本专利技术提供了含有保藏编号为CGMCCNo.21191的贝莱斯芽胞杆菌NHB-BvF5001或含有其的菌剂在制备广谱抗菌剂中的应用。所述广谱抗菌剂的抗菌谱包括抗以下菌：肠道致病大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、伤寒沙门氏菌、沙门氏菌、志贺氏菌属、产气荚膜杆菌、彭氏变形杆菌、嗜水气单胞菌、副溶血弧菌。本专利技术提供了含有保藏编号为CGMCCNo.21191的贝莱斯芽胞杆菌NHB-BvF5001或含有其的菌剂在食品制造中的应用。优选地，所述的食品为动物用食品。本专利技术中所述贝莱斯芽胞杆菌NHB-BvF5001的培养方法如下：取贝莱斯芽胞杆菌NHB-BvF5001(保藏编号为CGMCCNo.21191)种子液(活菌浓度为109CFU/mL)3mL，接种于300mL摇瓶发酵培养基中进行摇瓶发酵培养。所述摇瓶发酵培养基由下述组分组成：玉米粉1-5％，蔗糖0.1-3％，酵母浸粉1-5％，硫酸铵0.5-5％，磷酸氢二钾0.1-5％，硫酸镁0.1-4％，氯化钠0.1-4％，余量为水，pH6-8。其中，优选为：玉米粉1.5％，蔗糖0.5％，酵母浸粉2.5％，硫酸铵1.5％，磷酸氢二钾0.5％，硫酸镁0.4％，氯化钠0.2％，余量为水，pH7.5。所述摇瓶发酵条件为：接种量0.5-10％，发酵温度20-45℃，发酵时间8-24h，pH值6.0-8.0，转速为100-300r/m；优选为：接种量1％，发酵温度为37℃、pH7.5、180r/min，发酵时间10h。10L种子罐罐培养基与摇瓶发酵培养基相同，10L发酵罐发酵条件为：罐压0.01-0.10MPa，装液量为5-7.5L培养基，接种量为25-750mL摇瓶种子液，发酵温度为20-45℃，发酵时间5-20h，pH值6.0-8.0，搅拌转速100-300r/min，通气量5-50L/min。其中，优选为：罐压0.03-0.05MPa，装液量为7L培养基，接种量为70mL，发酵温度为37℃，发酵时间14h，pH值7.5，搅拌转速200r/min，通气量10L/min。100L发酵罐的培养基成分及发酵条件为：1-30％麸皮浸出液、1-15％豆粕粉(粉碎过60目筛)、1-5％玉米浆干粉、1-5％酵母粉、1-10％硫酸铵、0.1-5％磷酸氢二钾，0.1-1％硫酸镁，0.1-2.0％氯化钠，0.1-1.0％碳酸钙，余量为水，pH6.0-8.0，装液量为50-75L培养基，罐压0.01-0.10MPa，接种量为5-7.5L，发酵温度为20-45℃，发酵时间10-48h，pH值5-8，搅拌转速1本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一株贝莱斯芽胞杆菌，分类命名为贝莱斯芽胞杆菌(Bacillus velezensis)NHB-BvF5001，于2020年11月16日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC No.21191，保藏地址为中国北京。/n

【技术特征摘要】
1.一株贝莱斯芽胞杆菌，分类命名为贝莱斯芽胞杆菌(Bacillusvelezensis)NHB-BvF5001，于2020年11月16日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCCNo.21191，保藏地址为中国北京。


2.权利要求1所述的贝莱斯芽胞杆菌NHB-BvF5001在饲料添加剂中的应用。


3.根据权利要求2所述的贝莱斯芽胞杆菌NHB-BvF5001在饲料添加剂中的应用，其特征在于饲料添加剂中贝莱斯芽胞杆菌NHB-BvF5001的活菌数为1.0×106-1.0×1010CFU/g，优选地，饲料添加剂中贝莱斯芽胞杆菌NHB-BvF5001的活菌数为1×107CFU/g。


4.权利要求1所述的贝莱斯芽胞杆菌NHB-BvF5001在动物饲料中的应用。

【专利技术属性】
技术研发人员：张遨然，尹望，周航，周桂莲，蔡姬姮，王红梅，李敬先，郭建强，李巍，
申请(专利权)人：新希望六和股份有限公司，四川新希望畜牧科技有限公司，成都枫澜科技有限公司，
类型：发明
国别省市：四川;51