一种抗肿瘤药物载体、其制备方法以及含有其的药物制剂技术

本发明专利技术公开了一种抗肿瘤药物载体及其制备方法。所述药物载体是源自凋亡肿瘤细胞的细胞囊泡，通过用γ射线在强度4～10Gy照射肿瘤细胞4～10分钟，使细胞凋亡并释放而产生，制备简便，粒径小且均一性高。含有上述肿瘤细胞囊泡的药物制剂在肿瘤部位的渗透性更好，疗效更高。

【技术实现步骤摘要】
一种抗肿瘤药物载体、其制备方法以及含有其的药物制剂
本专利技术属于药物制剂领域，涉及一种抗肿瘤药物载体、其制备方法以及含有该药物载体的药物制剂，更具体地涉及一种以源自凋亡肿瘤细胞的细胞囊泡作为药物载体，其制备方法以及含有所述细胞囊泡的药物制剂。
技术介绍
化疗是恶性肿瘤治疗的重要手段之一，尤其对于中晚期患者。一直以来全身化疗受限于药物在肿瘤部位浓度不高，而全身毒性较大而限制了其临床效果。近几十年来，肿瘤学家和药学家们等致力于高效低毒的新型化疗药物的研发，出现了许多改良型的化疗药物和化药的新剂型。微颗粒(Microparticle，MP)是真核细胞在活化或凋亡时从细胞膜表面剥落下来的囊泡状结构，亦称“细胞囊泡”，粒径在100-1000nm。采用微颗粒包裹化疗药物是一种新型的生物性药物制剂，选择性地在肿瘤部位释放化疗药物，降低化疗药物对正常细胞的毒副作用，克服了人工合成的外源性载体的毒副作用，是一种较为优化的肿瘤治疗药物制剂。微颗粒作为一种新型的囊泡载药系统，其制备条件多采用物理或化学方法诱导细胞凋亡释放，最常使用的方法为紫外线UVB照射，例如中国专利ZL201110241369.8公开了一种肿瘤细胞来源的囊泡包裹化疗药物的药物制剂，其制备方法包括：使用紫外线照射肿瘤细胞，使肿瘤细胞凋亡，收集凋亡肿瘤细胞所释放的细胞囊泡，然后将所述细胞囊泡与作为有效成分的化疗药进行孵育，使化疗药被细胞囊泡包裹后获得上述药物制剂。但根据现有技术制备的微颗粒存在产量低，粒径均一性差的缺陷，限制了微颗粒的大规模制备生产和体内使用效果，也限制了该药物制剂的发展应用。因此，进一步研究如何提高微颗粒的产量，并控制微颗粒粒径的均一性，提高载药细胞囊泡在体内的吸收，对上述新型高效的抗肿瘤药物制剂的开发应用具有重要意义。
技术实现思路
本专利技术的目的之一是提供一种易于制备、粒径均一、更易于吸收的源自凋亡肿瘤细胞的细胞囊泡，其可作为抗肿瘤药物载体，通过包裹化疗药物制备新型的生物性药物制剂，本专利技术的目的之二是提供含有上述肿瘤细胞囊泡的药物制剂。本专利技术的目的之三是提供上述肿瘤细胞囊泡的制备方法。根据上述目的，本专利技术提供以下技术方案：第一方面，本专利技术提供一种抗肿瘤药物载体，其特征在于，所述药物载体是源自凋亡肿瘤细胞的细胞囊泡，通过用γ射线照射肿瘤细胞，使细胞凋亡而释放产生所述细胞囊泡，并且所述细胞囊泡的粒径为100～150nm。例如，所述细胞囊泡的粒径为110nm、120nm、130nm、140nm等，或其中的任意范围，优选为110～150nm，例如130～150nm，140～150nm。相应地，本专利技术还提供γ射线照射在制备抗肿瘤药物中的应用，其中用γ射线照射肿瘤细胞，使所述肿瘤细胞凋亡而释放产生细胞囊泡，将所述细胞囊泡作为药物载体制备抗肿瘤药物。第二方面，本专利技术提供一种药物制剂，其特征在于，包含上述源自凋亡肿瘤细胞的细胞囊泡和包裹在所述细胞囊泡内作为有效成分的化疗药。所述化疗药可以是临床上用于治疗各类肿瘤的化疗药，如：治疗卵巢癌、乳腺癌、肺癌、胃癌、肠癌(结肠癌、直肠癌)、肝癌、膀胱癌或白血病的化疗药，可以是单一化疗药或多种化疗药联合。本专利技术优选的化疗药物为顺铂、甲氨蝶呤或阿霉素。第三方面，本专利技术提供一种制备抗肿瘤药物载体的方法，其特征在于，所述药物载体是源自凋亡肿瘤细胞的细胞囊泡；所述方法包括用γ射线照射所述肿瘤细胞，使细胞凋亡，并释放细胞囊泡。上述制备方法可包括下述一个或多个特征：所述γ射线照射采用60Co照射源。所述照射强度可以是4～10Gy，优选6～10Gy，例如8～10Gy。所述照射时间可以是4～10分钟，例如6～10分钟，例如8～10分钟。所述照射剂量率为1Gy/min。所述细胞囊泡的粒径为100～150nm。例如，所述细胞囊泡的粒径为110nm、120nm、130nm、140nm等，或其中的任意范围，优选为110～150nm，例如130～150nm，140～150nm。所述肿瘤可选自卵巢癌、乳腺癌、肺癌、胃癌、肠癌(结肠癌、直肠癌)、肝癌、膀胱癌和白血病，更优选地所述肿瘤为肺癌、肠癌或白血病。所述肿瘤细胞的凋亡率优选为20～30％。相应地，本专利技术提供根据上述任一方法制备的抗肿瘤药物载体。有益效果：1)本专利技术通过γ射线诱导肿瘤细胞凋亡，释放的细胞囊泡产量高，比现有技术中紫外线诱导的囊泡产量提升3～5倍，且制备简单、方便；2)现有技术紫外线诱导的囊泡粒径均一性较差，通常为100～500nm，优化后达到200～250nm，本专利技术通过γ射线诱导的细胞囊泡的粒径集中在100～150nm，甚至140～150nm，粒径小，均一性非常高，在肿瘤部位的渗透性更好，疗效更高。附图说明图1～3分别显示实施例1中60Co辐射源在不同强度照射三种细胞(肺癌细胞NCI-H292、肠癌细胞HCT-116、白血病细胞HL60)、不同培养时间下诱导的细胞凋亡率；图4～6分别显示实施例1中60Co辐射源在不同强度照射三种细胞(肺癌细胞NCI-H292、肠癌细胞HCT-116、白血病细胞HL60)、不同培养时间获得的细胞囊泡数量；图7A和7B分别显示实施例1中60Co辐射源和紫外线UVB照射NCI-H292细胞产生的细胞囊泡的粒径分布图；图8～10分别显示实施例1中60Co辐射源在不同强度照射三种细胞(肺癌细胞NCI-H292、肠癌细胞HCT-116、白血病细胞HL60)生产的细胞囊泡的粒径分布范围；γ射线诱导的囊泡粒径范围主要在140-150nm，不同照射强度和孵育时间对粒径影响较小，可以看出γ射线诱导产生的囊泡粒径均一性较好。图11显示实施例2中分别以60Co辐射源和紫外线UVB照射三种细胞(肺癌细胞NCI-H292、肠癌细胞HCT-116、白血病细胞HL60)生产的细胞囊泡的数量；图12显示实施例2中分别以60Co辐射源和紫外线UVB照射三种细胞(肺癌细胞NCI-H292、肠癌细胞HCT-116、白血病细胞HL60)生产的细胞囊泡的粒径；图13显示实施例3中分别以60Co辐射源和紫外线UVB照射三种细胞(肺癌细胞NCI-H292、肠癌细胞HCT-116、白血病细胞HL60)生产的含药细胞囊泡对肿瘤细胞的体外杀伤效果；图14显示实施例4中分别以60Co辐射源(图A)和紫外线UVB(图B)照射三种细胞(肺癌细胞NCI-H292、肠癌细胞HCT-116、白血病细胞HL60)生产的含药细胞囊泡在小鼠肿瘤部位的分布。具体实施方式以下实施例用于进一步详细描述本专利技术的特点和优点，应理解的是，实施例的内容仅为示例性解释说明，而不以任何方式限制本专利技术的保护范围。如无特别说明，实施例中采用的材料和试剂均为普通市售产品。实施例1：不同剂量的60Co照射对肿瘤细胞囊泡释放的影响1.实验材料：肺癌细胞NCI-H29本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗肿瘤药物载体，其特征在于，所述药物载体是源自凋亡肿瘤细胞的细胞囊泡，通过用γ射线照射肿瘤细胞，使细胞凋亡而释放产生所述细胞囊泡，并且所述细胞囊泡的粒径为100～150nm。/n

【技术特征摘要】
1.一种抗肿瘤药物载体，其特征在于，所述药物载体是源自凋亡肿瘤细胞的细胞囊泡，通过用γ射线照射肿瘤细胞，使细胞凋亡而释放产生所述细胞囊泡，并且所述细胞囊泡的粒径为100～150nm。


2.γ射线照射在制备抗肿瘤药物中的应用，其中用γ射线照射肿瘤细胞，使所述肿瘤细胞凋亡而释放产生细胞囊泡，将所述细胞囊泡作为药物载体制备抗肿瘤药物。


3.一种药物制剂，其特征在于，包含权利要求1所述的源自凋亡肿瘤细胞的细胞囊泡和包裹在所述细胞囊泡内作为有效成分的抗肿瘤药。


4.一种制备抗肿瘤药物载体的方法，其特征在于，所述药物载体是源自凋亡肿瘤细胞的细胞囊泡，所述方法包括用γ射线照射所述肿瘤...

【专利技术属性】
技术研发人员：张一，李凯，陈彬，
申请(专利权)人：湖北盛齐安生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北;42