用于促进睑板腺再生的PEDF衍生肽及其用途制造技术

本发明专利技术是关于一种用于促进睑板腺再生或用于治疗/预防干眼综合征的药物组合物或方法，该方法包括向有其需要的个体施用包含PEDF衍生短肽(PDSP)或该PDSP的变体的药物组合物，其中，该PDSP包含人类色素上皮衍生因子(PEDF)的残基93至106。的残基93至106。的残基93至106。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于促进睑板腺再生的PEDF衍生肽及其用途


[0001]本专利技术涉及PEDF衍生肽以及其在睑板腺再生或在治疗干眼中的用途。

技术介绍

[0002]睑板腺功能障碍(Meibomian gland dysfunction，MGD)的特征在于睑板腺分泌物的量减少和/或质的变化、泪膜脂质层的不稳定性以及眼发炎的症状1‑3。由于MGD占干眼病(dry eye disease，DED)所有案例多达三分之二，因此MGD被视为日益增长的公共问题，尤其在老年人群中
1,2
。然而，当前临床MGD治疗模式(包括局部用药、睑板腺(MG)表达、睑板腺热脉动治疗仪(Lipiflow)以及强脉冲光(intense pulsed light，IPL)治疗)主要为缓解性的，因为其通常主要目的在于缓解DED的症状，从而预防进一步MG萎缩，而不直接地修复MGD的潜在致病机制
1,2,4
。
[0003]存在三种形式的MGD：过度分泌性MGD、分泌不足性MGD以及阻塞性MGD5。阻塞性MGD被认为是最常见的且被认为涉及管口的角化过度，从而造成导管堵塞及进一步腺泡萎缩
3,5
。然而，患有MGD的患者及小鼠MG的孔口处的非角质化导管上皮细胞中粘膜皮肤的前移位的发现并不支持角化过度的已知理论作为MGD的主要机制
5,6
。对于年龄相关的MGD，在人类及小鼠睑板腺两者中观测到伴随细胞增殖减少的腺萎缩
7,8
。腺泡组织萎缩可能为导致脂质与导管细胞之间的不平衡或促成孔口堵塞的脂质/蛋白质比率的改变的主要病因
5,9
。
[0004]虽然睑板腺功能障碍(MGD)影响诸多患者，但当前治疗大部分为缓解性的。因此，对于MGD而言需要更有效治疗。

技术实现思路

[0005]本专利技术的实施方式是关于使用衍生自色素上皮衍生因子(pigment epithelium
‑
derived factor，PEDF)的短肽以促进睑板腺再生及治疗干眼的方法。
[0006]本专利技术的一个方面是关于促进睑板腺再生的方法。根据本专利技术的一种实施方式的方法包括向有其需要的个体施用包含PEDF衍生短肽(PDSP)或该PDSP的变体的药物组合物，其中，该PDSP包含人类色素上皮衍生因子(PEDF)的残基93至106。
[0007]本专利技术的一方面是关于用于治疗干眼综合征的方法。根据本专利技术的一种实施方式的方法包含向有其需要的个体施用包含PEDF衍生短肽(PDSP)或该PDSP的变体的药物组合物，其中，该PDSP包含人类色素上皮衍生因子(PEDF)的残基93至106。
[0008]本专利技术的其他方面将通过以下详细的描述及所附的权利要求变得显而易见。
附图说明
[0009]图1展示衰老小鼠中的MG萎缩以及泪膜不稳定性。图(A)展示自用油
‑
红
‑
O(Oil
‑
Red
‑
O，ORO)染色的幼龄及老龄小鼠采集的上眼睑及下眼睑。睑脂(红色)在主导管(箭头)及腺泡(箭头头部)中为可见的。代表性影像来自7个老龄小鼠的眼睑及6个幼龄小鼠的眼睑。图(B)展示睑板腺萎缩的分级，如基于萎缩区域的百分比所计算且转换成MG得分。图(C)展
示来自用ORO染色的老龄及幼龄小鼠的上眼睑的冷冻切片。图(D)展示泪膜破裂时间，如自8只幼龄小鼠的16只眼睛以及6只老龄小鼠的12只眼睛所评估。数据报导为平均值
±
SE。相比于幼龄小鼠，*P<0.05。相比于幼龄小鼠，**P<0.001。
[0010]图2展示在幼龄及老龄小鼠的上眼睑中的PEDF表达。经PEDF染色的代表性横截面展示幼龄小鼠(A)及老龄小鼠(B)的腺泡。具有第二抗体的免疫染色单独充当阴性对照(C)。低放大率影像(上图)中的方框指示较高放大率影像(下图)的位置，其展示PEDF主要表达于祖细胞(黑色箭头；(D)及(E))的核中。PEDF表达在整个腺泡中可见且在腺泡基底处的细胞质中更强。(F)基于染色强度、腺泡基底处的细胞质的强度以及PEDF
‑
阳性细胞核的百分比来计算PEDF得分。从用于分析的各眼睑捕获三个随机影像。代表性影像来自各群组中的6只不同小鼠的6个眼睑(原始放大倍数：
×
400)。相比于幼龄组，*P<0.05。比例尺：50μm。
[0011]图3展示29聚体促进衰老小鼠中的腺泡祖细胞增殖。为检测DNA合成，29聚体治疗后立即腹膜内注射BrdU且在24小时采集眼睑。在正常条件下(无任何处理)，老龄小鼠(A)展现比幼龄小鼠(D)更少的BrdU
‑
阳性细胞。29聚体增加老龄(C)及幼龄小鼠(F)的腺泡基底中的BrdU
‑
阳性细胞，而DMSO不具有效果(B及E)。红色虚线环指示中枢导管。黑色箭头指示BrdU
‑
阳性祖细胞。(G)基于腺泡基底中的BrdU
‑
阳性细胞来计算PEDF治疗效果。从用于分析的各眼睑捕获三个随机影像。代表性影像来自各群组中的6只不同小鼠的6个眼睑(原始放大倍数：
×
400)。代表性影像来自各群组中的3只不同小鼠的3个眼睑(原始放大倍数：
×
400)。相比于幼龄小鼠正常条件，#P<0.05；相比于用DMSO或18聚体治疗的老龄小鼠，*P<0.05。相比于幼龄小鼠正常条件或用载剂DMSO治疗的幼龄小鼠，**P<0.05。比例尺：50μm。
[0012]图4展示治疗后5天上眼睑中的细胞增殖。在单次结膜下注射后，在第0天及第3天腹膜内注射BrdU。接着，在第5天采集眼睑。(A)及(C)分别展示用DMSO治疗老龄及幼龄小鼠的对照。(B)及(D)分别展示老龄及幼龄小鼠中的PDSP治疗。BrdU
‑
阳性细胞主要为腺泡祖细胞(黑色箭头)且少数巨噬细胞对于BrdU染色是阳性的(D，红色箭头)。(E)基于腺泡基底中的BrdU
‑
阳性细胞来计算PEDF治疗效果。自用于分析的各眼睑捕获三个随机影像。代表性影像来自各群组中的3只不同小鼠的3个眼睑(原始放大倍数：
×
400)。相比于用DMSO治疗的老龄小鼠，*P<0.001。比例尺：50μm。
[0013]图5展示在单次治疗后5天上眼睑中的干细胞标记物p63表达的免疫组织化学分析。(A)及(B)分别展示老龄及幼龄小鼠中的基线p63表达。(C)及(D)分别展示老龄小鼠中的DMSO及PDSP治疗。红色虚线环指示中枢导管。(E)评估每个腺泡的p63
‑
阳性细胞的数目。代表性影像来自各群组中的3只不同小鼠的3个眼睑(原始放大倍数：
×
400)。自用于分析的各眼睑捕获三个随机影像。相比于幼龄小鼠，*P<0.001；相比于用DMSO治疗的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于促进睑板腺再生或用于治疗和/或预防干眼综合征的药物组合物，包含：PEDF衍生短肽(PDSP)或所述PDSP的变体，其中，所述PDSP包含人类色素上皮衍生因子(PEDF)的残基93至106，且其中所述PDSP的变体含有所述PDSP的丝氨酸
‑
93、丙氨酸
‑
96、谷氨酰胺
‑
98、异亮氨酸
‑
103、异亮氨酸
‑
104及精氨酸106并且在其他位置处含有一或多个氨基酸取代，其中，残基位置编号基于人类PEDF中的残基位置编号。2.如权利要求1的药物组合物，其特征在于，所述PDSP包含序列S
‑
X
‑
X
‑
A

【专利技术属性】
技术研发人员：李文机，范乃文，何宗权，曹友平，
申请(专利权)人：全福生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：