一种用于单个核细胞密度梯度分离的装置制造方法及图纸

本实用新型专利技术涉及一种用于单个核细胞密度梯度分离的装置，由管体、管帽、阻隔件、抗凝剂和密度梯度分离液组成，同时具有一定量的真空，用于静脉采血、离心获得单个核细胞的富集。本设计能够简化现有的单个核细胞分离步骤，减少样本转移造成的污染和变质风险，降低对操作人员的技术要求，提高分离效果的有效性和一致性。

【技术实现步骤摘要】
一种用于单个核细胞密度梯度分离的装置
本技术涉及一种用于单个核细胞密度梯度分离的装置，具体地说是一种从血液样本分离靶细胞群的装置。
技术介绍
外周血单个核细胞(Periphearalbloodmononuclearcell，PBMC)作为临床的体外研究中的重要原料，是基础研究和细胞治疗中最为常用的细胞群。因此，将靶细胞从血液样本中分离对于这些领域的研究以及免疫学的诊断和治疗十分关键。当前用于从血液样本中分离靶细胞的技术大体上包括去除红血细胞的初始步骤。传统的密度分离方法是从外周血中去除红血细胞最常用的方法之一。Ficoll-PaqueTM（Ficoll）是目前使用最为广泛的密度分离液。在Ficoll密度分离中，离心前需要将样本层叠在Ficoll分离液上。离心后，由于单个核细胞、粒细胞和红细胞之间的密度差异，红细胞和粒细胞沉淀到底部，靶细胞群保持在Ficoll和血浆之间。加样时，血液样本与Ficoll分离液不能直接混合，因此在离心之前需要将血液小心地层叠到Ficoll层上。在离心过程中，离心管不平衡或离心机在高速旋转下瞬时刹车，都会引起单个核细胞与分离液混合，从而影响单个核细胞的富集效率。该方法存在如下缺陷：耗时长，操作过程繁琐，在加入样本及提取白膜层时需格外谨慎，对技术人员的操作要求高。因此，需要一种用于密度梯度分离的装置，易于装载样本和密度分离液，同时能够从外周血中快速地分离出纯度较高的单个核细胞，节省成本，提升效率，给使用者提供便利。
技术实现思路
本技术提供一种结构简单、设计科学的分离装置，用于外周血中单个核细胞的密度梯度分离，应用该技术不仅操作简便，节省成本，给使用者提供便利，而且极大地提高了单个核细胞的富集效率。技术方案为实现更高效地从外周血中分离单个核细胞，本技术将通过以下技术方案实现：在一个实施例中，所述分离装置，包括采血管，其真空度范围为8-12ml。由塞帽件、抗凝剂、管体、阻隔件以及密度梯度分离液等组成，所述采血管用于静脉采血及采血后血液样本中单个核细胞的富集。所述分离装置的塞帽件由胶塞和安全帽组成，与分离装置管体通过压塞连接。所述分离装置的抗凝剂均匀分布在装置内壁上，所述抗凝剂包括肝素、枸橼酸钠、双草酸盐等。所述分离装置的阻隔件与管体通过预设卡槽紧密连接或通过血液相容性树脂固定粘连形成一体，阻隔静脉血与密度梯度分离液的剧烈混合。所述分离装置管底为半球形或抛物线形，所述管底预加有密度梯度分离液，如Ficoll-PaqueTM分离液，所加分离液液面要求不没过阻隔件顶部。在一个实施例中，所述分离装置，包括离心管，所述离心管规格包括10ml、15ml以及50ml容积，所述离心管由管盖、管体、阻隔件、管底以及阻隔件中设置的通孔等组成，所述分离装置用于抗凝血样本中单个核细胞的富集。所述分离装置的管体可选用环烯烃类共聚物（COC）、聚对苯二甲酸类（PET）、聚乙烯（PE）、聚碳酸酯（PC）、聚丙烯（PP）等塑料材质，所述分离装置的管盖通过错位螺纹与管体耦合。所述分离装置的阻隔件包括通孔和阻隔构件，阻隔构件将离心管内部成上下部分，阻止抗凝血与密度梯度分离液的剧烈混合。所述分离装置的管底为倒锥形或倒圆台形，所述密度梯度分离液通过中心通孔加入分离装置底部，并将抗凝血样本倒入阻隔件上方。在一个实施例中，所述阻隔装置由顶部凹面、顶部外缘、通孔、装置的支撑体以及底部等组成。所述阻隔装置用于离心管或采血管的密度梯度离心，富集外周血样本中的单个核细胞。在一个实施例中，所述弧孔阻隔装置由顶部凹面、顶部外缘、通孔、弧孔以及装置的支撑架等组成。在一个实施例中，所述弹性阻隔装置由顶部凹面、顶部外缘、通孔、弹性件以及装置的支撑体等组成。所述阻隔装置的顶部呈凹面特征，所述凹面与顶部外缘所在平面所形成的夹角范围在5°~90°之内，所述阻隔装置的支撑体为中空结构，所述支撑体外表面与管壁紧密贴合。所述阻隔装置的材质可选用环烯烃类共聚物（COC）、聚对苯二甲酸类（PET）、聚乙烯（PE）、聚碳酸酯（PC）、聚丙烯（PP）等塑料材质。在一个实施例中，所述阻隔装置的顶部外缘呈圆形或有一定宽度的圆环，所述外缘宽度为0~4mm，所述阻隔装置通过活塞推入采血管或离心管中时，所述阻隔装置与管底间距离10~25mm，所述顶部外缘与管内壁紧密贴合。在一个实施例中，所述阻隔装置的底部为中空结构，以填充密度梯度分离液，所述阻隔装置的支撑体与装置的底部接触，其外径与采血管或离心管底部内径极为接近或契合，不易发生滑动。所述分离装置的阻隔件中设置有若干通孔，包括中心通孔和外缘通孔，其中所述中心通孔直径为0.8~1.8mm，所述外缘通孔直径为0.2~0.8mm。所述阻隔装置中设置了有若干通孔，所述通孔呈为圆孔、椭圆孔、网孔、倒圆台形或圆柱形，所述通孔直径为0.2~1.8mm。在一个实施例中，所述阻隔装置中设有一个中心通孔，所述通孔为倒圆台孔或沙漏孔，所述通孔直径为0.5~1.5mm。在一个实施例中，所述阻隔装置中设有若干弧形孔，所述弧形孔与圆心所成角度为30°~90°，所述弧形孔数量为3~9个，所述弧形孔宽度为0.1~0.4mm。在一个实施例中，所述阻隔装置的设有若干弹性件，所述弹性件与装置的支撑体构件为一体连接，所述弹性件向斜上方凸起或向斜下方凸起。在一个实施例中，将所述阻隔装置推入离心管或采血管时，所述弹性件与支撑体以及管内壁相切，因弹力作用使其阻隔装置固定在管壁上。在一个实施例中，所述阻隔装置的底部由中空的支撑架组成，所述支撑架为硬质塑料材质，所述支撑架为2~3个支撑脚，所述支撑脚长度为10~30mm。在一个实施例中，所述支撑架所在圆直径稍大于阻隔装置所在的离心管内径，所述支撑架与管壁紧密贴合。对比现有技术，本技术的改进效果有：本技术提供一种用于外周血中单个核细胞的密度梯度分离的分离装置，可以直接通过离心获得纯度较高的外周血单个核细胞，将大大缩短单个核细胞的获取时间，而且操作简单，无需小心添加样本及简化了提取白膜层的步骤，提高了单个核细胞的获得率。附图说明图1是本技术用于真空采血管的结构示意图。图2是本技术用于离心管的结构示意图。图3是本技术阻隔装置的结构示意图。图4-1、图4-2是本技术弹性阻隔装置的结构示意图。图5-1、图5-2、图5-3是本技术弧孔阻隔装置的结构示意图。具体实施方式本技术是一种用于单个核细胞密度梯度分离的装置，在密度梯度离心富集单个核细胞的过程中，通过物理阻隔的方法将靶细胞群从样本中分离出来，从而达到单个核细胞分离的目的。本技术的其它特征和优点在下面的实施例中将更为详细地描述，但这些示例仅用于进一步解释本专利技术，而不是对本专利技术范围的限制。实施例1：一种用于单个核细胞密度梯本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于单个核细胞密度梯度分离的装置，包括管体、管帽、抗凝剂、阻隔件以及密度梯度分离液，阻隔件与管体连接形成一体，阻隔件包括通孔和阻隔构件，阻隔构件将管体内部分成上下两部分，阻隔静脉血与密度梯度分离液的剧烈混合。/n

【技术特征摘要】
1.一种用于单个核细胞密度梯度分离的装置，包括管体、管帽、抗凝剂、阻隔件以及密度梯度分离液，阻隔件与管体连接形成一体，阻隔件包括通孔和阻隔构件，阻隔构件将管体内部分成上下两部分，阻隔静脉血与密度梯度分离液的剧烈混合。


2.如权利要求1所述的一种用于单个核细胞密度梯度分离的装置，其特征在于该装置具有8-12ml的真空。


3.如权利要求1所述的一种用于单个核细胞密度梯度分离的装置，其特征在于该装置的管体可选用的塑料材质有环烯烃类共聚物（COC）、聚对苯二甲酸类（PET）、聚乙烯（PE）聚碳酸酯（PC）。


4.如权利要求1所述的一种用于单个核细胞密度梯度分离的装置，其特征在于管帽通过压塞与管体连接，或错位螺纹与管体耦合。


5.如权利要求1所述的一种用于单个核细胞密度梯度分离的装置，其特征在于阻隔件与管体通过预设卡槽紧密连接或通过血液相容性树脂固定粘连形成一体。


6.如权...

【专利技术属性】
技术研发人员：王思娜，
申请(专利权)人：广州市虎克生物科技有限公司，
类型：新型
国别省市：广东;44