寨卡病毒优势T细胞表位肽及其在疫苗和诊断中的应用制造技术

本发明专利技术提供了一种寨卡病毒表位肽及其应用。具体地，本发明专利技术提供了一种针对寨卡病毒的CD4+、CD8+T细胞表位肽及其组合，包括SEQ ID NO.1‑27所示的多肽。本发明专利技术的表位肽既包括CD4+T细胞表位，又包括CD8+T细胞表位，均能够在小鼠体内激起较强的T细胞免疫反应，并提供针对寨卡病毒的保护作用。本发明专利技术的寨卡病毒表位肽还可以用于寨卡病毒的检测，具有广泛的应用。

【技术实现步骤摘要】
寨卡病毒优势T细胞表位肽及其在疫苗和诊断中的应用
本专利技术涉及生物医药及免疫学领域，更具体地涉及寨卡病毒CD4+、CD8+T细胞优势表位肽及其应用。
技术介绍
寨卡病毒于1947年在乌干达寨卡森林被首次发现，但直到2015年南美洲寨卡疫情爆发，才受到了国际社会的广泛关注。寨卡病毒属于黄病毒科黄病毒属，在热带亚热带地区与登革病毒广泛共流行。病毒表面覆盖包膜，内部核衣壳组成二十面体结构，其基因组为大小约11kb的正义单链RNA。通常，寨卡病毒感染人体引起的症状较轻，包括发热、斑疹、关节痛和结膜炎，但近来也逐渐发现，寨卡病毒与神经并发症相关，包括孕期母亲感染导致的初生儿眼睛视觉病变、小头畸形、脑积水和癫痫，以及在成人中表现出的与寨卡病毒相关的格林-巴利综合征。寨卡病毒可能存在的垂直传播、性传播、血液传播等诸多传播途径，也导致寨卡病毒的防治更为艰难，更易造成严重的公共卫生危机。目前，尚没有获得商业许可的寨卡疫苗，处于临床研究阶段的寨卡疫苗多数聚焦于增强寨卡病毒特异性中和抗体的产生。然而，寨卡病毒的抗体免疫可产生负作用，即寨卡病毒的抗体能够在体内或体外协助登革病毒增强对机体或细胞的感染(ADE)，反之亦然。因此在两种病毒共流行的疫区单独使用基于抗体反应的疫苗，必然存在较大的隐患。另一方面，寨卡病毒的记忆性CD4+和CD8+T细胞反应已被证实具有针对寨卡病毒的保护作用。因此寨卡病毒T细胞表位的确定及T细胞疫苗的开发将是对现有寨卡T细胞免疫研究和疫苗开发的重要补足。此外亦有研究显示，寨卡病毒和登革病毒感染激起的优势T细胞表位的分布存在较大差别，未来可应用于诊断区分两种病毒的感染。CD8+T细胞和CD4+T细胞(包括Th1和Th2细胞)的功能和作用机制存在差异，而前期有研究显示CD8+T细胞在寨卡病毒首次感染过程中便可协助机体清除病毒，起到保护作用。CD4+T细胞则被证明通过促炎细胞因子和支持抗体反应仅产生针对于二次感染的保护。因此，在研究寨卡病毒T细胞反应和开发T细胞疫苗的过程中，仍需将两类表位和反应区分研究。综上，本领域迫切需要开发寨卡病毒的CD4+、CD8+T细胞优势表位肽及其应用。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供寨卡病毒的CD4+、CD8+T细胞优势表位肽及其相关应用。在本专利技术的第一方面，提供了一种针对寨卡病毒的T细胞表位肽组合，所述的表位肽组合包括两种或两种以上选自下组的多肽：(a)如SEQIDNO.:1-27所示的多肽；(b)将SEQIDNO:1-27氨基酸序列经过一个、两个或三个氨基酸残基取代、缺失或添加而形成的、能够与T细胞表面受体结合的衍生多肽；(c)与SEQIDNO：1-27所示氨基酸序列的同源性≥90％，且能够与T细胞表面受体结合的多肽；其中，所述表位肽组合中的表位肽针对的T细胞表面受体(TCR)不相同。在另一优选例中，所述的多肽(b)和多肽(c)具有免疫原性。在另一优选例中，所述的表位肽及其表位肽组合中至少含有一种或一种以上选自SEQIDNO.:1-11所示的多肽。在另一优选例中，所述的表位肽及其表位肽组合中至少含有一种或一种以上选自SEQIDNO.:5，6，7，8，10所示的多肽。在另一优选例中，所述的表位肽及其表位肽组合至少包含SEQIDNO.:1-11所示的多肽，较佳地包含SEQIDNO.:5，6，7，8，10所示的多肽，并且所述的表位肽组合为CD4+T细胞表位肽组合。在另一优选例中，所述的表位肽及其表位肽组合中至少含有一种或一种以上选自SEQIDNO.:1，7，11-27所示的多肽。在另一优选例中，所述的表位肽及其表位肽组合中至少含有一种或一种以上选自SEQIDNO.:11，16，20，21，22所示的多肽。在另一优选例中，所述的表位肽及其表位肽组合至少包含SEQIDNO.:1，7，11-27所示的多肽，较佳地包含SEQIDNO.:11，16，20，21，22所示的多肽，并且所述的表位肽组合为CD8+T细胞表位肽组合。在另一优选例中，所述的表位肽及其表位肽组合中至少含有SEQIDNO.:1，7，11所示的多肽。在另一优选例中，SEQIDNO.:1，7，11所示的表位肽为CD4+T细胞表位肽，且为CD8+T细胞表位肽。在另一优选例中，所述的表位肽组合既包含CD4+T细胞表位肽，也包含CD8+T细胞表位肽。在本专利技术的第二方面，提供了一种针对寨卡病毒的T细胞表位肽，所述的表位肽选自下组：(a)如SEQIDNO.:1-27所示的多肽；(b)将SEQIDNO:1-27氨基酸序列经过一个、两个或三个氨基酸残基取代、缺失或添加而形成的具有免疫原性的衍生多肽；(c)与SEQIDNO：1-27所示氨基酸序列的同源性≥90％，且能够与T细胞表面受体结合的多肽；其中，所述表位肽组合中的表位肽针对的T细胞表面受体(TCR)不相同。在另一优选例中，所述的表位肽为CD4+T细胞表位肽或CD8+T细胞表位肽。在本专利技术的第三方面，提供了一种分离或串联的多核苷酸组合，所述的多核苷酸组合中的多核苷酸分别编码本专利技术第一方面所述的表位肽组合中的表位肽、或编码本专利技术第二方面所述的表位肽。在另一优选例中，所述的多核苷酸包括脱氧核糖核苷酸和信使核糖核苷酸。在另一优选例中，所述的裸露形式的多核苷酸、包裹形式的多核苷酸。在本专利技术的第四方面，提供了一种载体，所述载体含有本专利技术第三方面所述的多核苷酸组合。在另一优选例中，所述的组合包括两种或多种所述的多核苷酸。在本专利技术的第五方面，提供了一种遗传工程化的宿主细胞，所述的宿主细胞含有本专利技术第四方面所述的载体或染色体整合有本专利技术第三方面所述多核苷酸组合中的多核苷酸。在本专利技术的第六方面，提供了一种制备针对寨卡病毒的表位肽或表位肽组合的方法，所述方法包括步骤：(a)在适合表达的条件下，培养本专利技术第五方面所述的宿主细胞；(b)从培养物中分离出针对寨卡病毒的表位肽。在另一优选例中，所述的方法还包括将(b)中获得的表位肽进行混合，从而制备成针对寨卡病毒的表位肽组合。在另一优选例中，所述的表位肽组合可以是混合物，或是含有多个串联的表位肽的组合形式。在本专利技术的第七方面，提供了一种融合蛋白，所述的融合蛋白包含本专利技术第一方面所述表位肽组合、或本专利技术二方面所述的表位肽。在另一优选例中，所述的融合蛋白包含一种或多种(如2、3、4、5种)本专利技术第一方面所述表位肽组合中的表位肽。在另一优选例中，所述的融合蛋白包括p-MHC四聚体。在另一优选例中，所述的融合蛋白还可以包含来源于寨卡病毒或登革病毒的其他蛋白(其他寨卡病毒或登革病毒表位肽)。在另一优选例中，所述的融合蛋白还包含载体蛋白。在另一优选例中，所述的载体蛋白是病原体蛋白，包括病毒蛋白、细菌蛋白、衣原体蛋白、支原体蛋白、或其组合。在另一优选例中，所述的载体蛋白包括B本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种针对寨卡病毒的T细胞表位肽组合，其特征在于，所述的表位肽组合包括两种或两种以上选自下组的多肽：/n(a)如SEQ ID NO.:1-27所示的多肽；/n(b)将SEQ ID NO:1-27氨基酸序列经过一个、两个或三个氨基酸残基取代、缺失或添加而形成的、能够与T细胞表面受体结合的衍生多肽；/n(c)与SEQ ID NO：1-27所示氨基酸序列的同源性≥90％，，且能够与T细胞表面受体结合的多肽，/n其中，所述表位肽组合中的表位肽针对的T细胞表面受体(TCR)不同。/n

【技术特征摘要】
1.一种针对寨卡病毒的T细胞表位肽组合，其特征在于，所述的表位肽组合包括两种或两种以上选自下组的多肽：
(a)如SEQIDNO.:1-27所示的多肽；
(b)将SEQIDNO:1-27氨基酸序列经过一个、两个或三个氨基酸残基取代、缺失或添加而形成的、能够与T细胞表面受体结合的衍生多肽；
(c)与SEQIDNO：1-27所示氨基酸序列的同源性≥90％，，且能够与T细胞表面受体结合的多肽，
其中，所述表位肽组合中的表位肽针对的T细胞表面受体(TCR)不同。


2.如权利要求1所述的表位肽组合，其特征在于，所述的表位肽组合中至少含有两种或两种以上选自SEQIDNO.:1-11所示的多肽，并且所述的表位肽组合为CD4+T细胞表位肽组合。


3.如权利要求1所述的表位肽组合，其特征在于，所述的表位肽组合中至少含有两种或两种以上选自SEQIDNO.:1，7，11-27所示的多肽，并且所述的表位肽组合为CD8+T细胞表位肽组合。


4.一种针对寨卡病毒的T细胞表位肽，其特征在于,所述的表位肽选自下组：
(a)如SEQIDNO.:1-27所示的多肽；
(b)将SEQIDNO:1-27氨基酸序列经过一个、两个或三个氨基酸残基取代、缺失或添加而形成的具有免疫原性的衍生多肽；
(c)与SEQIDNO：1-27所示氨基酸序列的同源性≥90％，且能够与T...

【专利技术属性】
技术研发人员：金侠，孙瑾，郑智航，
申请(专利权)人：中国科学院上海巴斯德研究所，
类型：发明
国别省市：上海;31