一种化合物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术通过对银杏叶进行提取，得到清膏；然后将得到的清膏进行分离，选择特定出峰时间的化合物，且通过细胞实验发现，该化合物对H2O2所致H9c2细胞损伤和垂体后叶素致大鼠实验性心肌缺血具有保护作用，显著降低LDH水平、显著升高血浆中CK水平和显著降低血浆MDA水平，可开发成抗心脑血管疾病药物，具有良好的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种化合物及其制备方法和应用
本专利技术涉及医药
，尤其涉及一种化合物及其制备方法和应用。
技术介绍
心脑血管疾病是心脏血管和脑血管疾病的统称，泛指由于高脂血症、血液粘稠、动脉粥样硬化、高血压等导致的心脏、大脑及全身组织发生的缺血性或出血性疾病。心脑血管疾病患病率高、致残率高、死亡率高，已经成为全世界范围内严重威胁人类健康的头号杀手。随着经济发展，人们生活水平逐步提高，生活节奏不断加快，使心脑血管疾病的发病率不断攀升，而预防和治疗心脑血管疾病的药物需求也随之增加，在国际药品市场上占有举足轻重的地位，因此研究和开发心脑血管疾病用药成为当今最热门的研究领域之一。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术提供一种从银杏叶中分离制备出一种抗心脑血管疾病的化合物及其制法和应用。本专利技术提出了一种具有式I所示结构的化合物或者其药学上可接受的盐、溶剂化物、异构体、前药分子或代谢物，该化合物具有如下结构：本专利技术还提出了式I所示化合物的制备方法，其特征在于，该方法包括：A)对银杏叶进行提取，得到清膏；B)将得到的清膏进行分离，得到式I所示化合物。其中，本专利技术对银杏叶提取的方法没有特殊限制，本领域公知的用于溶剂提取中草药成分的方法均可，本专利技术优选采用一定浓度的乙醇水溶液提取。具体的，银杏叶与乙醇的用量比(以质量计)优选为1：(6～10)，在本专利技术的某些具体实施例中，所述用量比为1:8；所述提取的次数优选为1～3次，在本专利技术的某些具体实施例中，所述提取的次数为2次；所述提取的时间优选为0.5～3小时，更优选为1.5～2.5小时；本专利技术对采用的乙醇并无特殊限定，可以为普通市售乙醇，优选为百分含量50％～95％的乙醇，更优选为百分含量60％的乙醇。具体地，所述步骤B)包括：将得到的清膏通过大孔吸附树脂柱色谱、反相柱色谱、凝胶柱色谱和制备型液相色谱进行分离，得到式I所示化合物。具体地，所述大孔吸附树脂柱色谱中的大孔吸附树脂选自D101型大孔吸附树脂、HP-20型大孔吸附树脂、HPD-450型大孔吸附树脂、HPD-950型大孔吸附树脂和AB-8型大孔吸附树脂中的一种或几种。其中，所述洗脱液优选为乙醇-水溶液；乙醇与水的体积比为(x)：(100-x)的溶液，其中，0≤x≤95，更优选为依次采用水，(20～35)％乙醇-水溶液进行洗脱，收集(20～35)％乙醇-水溶液洗脱部位，得到大孔树脂分离后的粗品。具体地，所述反相柱色谱选自动态轴向压缩色谱、高效液相色谱或中低压制备色谱；采用的洗脱液为甲醇-水溶液或者乙腈-水溶液。所述洗脱剂优选为乙腈-水溶液，且为了能够更好分离杂质和所需化合物，本专利技术优选采用梯度洗脱，所述梯度洗脱程序为0～70min，20～80％乙腈-水溶液，流速100mL/min，收集25～35min洗脱液，得反相柱色谱分离后的粗品。具体地，所述凝胶柱色谱中的凝胶选自SephadexLH-20、SephadexG15或SephadexG50。具体地，所述制备型液相色谱采用的流动相为甲醇-水溶液或者乙腈-水溶液。其中，所用流动相优选为乙腈-水溶液，优选的为(15～45)％乙腈-水溶液，最优选为(20～40)％乙腈-水溶液；所述流速优选为3～100mL/min，最优选为5～30mL/min；检测波长为340nm，得到式I所示化合物。更具体地，本专利技术式I所示化合物的制备方法包括：将银杏叶与50％～95％的乙醇按1：(6～10)混合，提取1～3次，每次提取0.5～3小时，将提取液浓缩得到清膏；将得到的清膏通过大孔吸附树脂柱，依次采用水、(20～35)％乙醇-水溶液进行洗脱，收集(20～35)％乙醇-水溶液洗脱部位，得到大孔树脂分离后的粗品；将大孔树脂分离后的粗品通过反相柱色谱分离，其采用梯度洗脱，所述梯度洗脱程序为0～70min，20～80％乙腈-水溶液，收集25～35min洗脱液，得到反相柱色谱分离后的粗品；将反相柱色谱分离后得到的粗品通过SephadexLH-20凝胶柱色谱分离，洗脱液为甲醇，得到凝胶分离后的粗品；将凝胶分离后的粗品通过制备型液相色谱分离，所用流动相为(15～45)％乙腈-水溶液，所述流速为3～100mL/min。优选地，本专利技术式I所示化合物的制备方法包括：干燥的银杏叶10kg，粉碎过筛后加入10倍量的60％乙醇，提取3次，每次1.5h，过滤，过滤浓缩、回收乙醇得到清膏；取上述清膏加入水使溶解，室温静置，取上清液经HP-20大孔吸附树脂柱分离，依次采用水，35％乙醇-水溶液进行洗脱，收集35％乙醇-水溶液的洗脱部位；将35％35％乙醇-水溶液的洗脱部位，经反相C18动态轴向压缩柱色谱分离，以0～70min，20～80％乙腈-水溶液进行梯度洗脱，流速100mL/min，收集25～35min洗脱液；取前述洗脱液，经SephadexLH-20柱色谱分离，甲醇洗脱，进行纯化。将纯化后的样品，经制备型HPLC分离，以20％乙腈-水溶液为流动相，检测波长为340nm，流速15mL/min。本专利技术还提出了式I所示化合物或者其药学上可接受的盐、溶剂化物、异构体、前药分子或代谢物在制备抗心脑血管疾病药物中的应用。本专利技术还提出了一种抗心脑血管疾病药物，其特征在于，包括权利要求1所述的化合物或者其药学上可接受的盐、溶剂化物、异构体、前药分子或代谢物，和药学上可接受的辅料。其中，该辅料可根据剂型和实际情况进行恰当选择，例如常用的辅料有淀粉、低取代羟丙基纤维素、微粉硅胶、硬脂酸镁、淀粉浆、蔗糖、糊精、羧甲基淀粉钠、滑石粉、聚山梨酯、聚乙二醇、注射用大豆磷脂和注射用甘油等；利用本专利技术得到的式I所示化合物，制备所需药物的各种剂型时，可以按照药剂学领域的常规生产方法制备。如将该提取物与一种或多种载体混合，然后制成相应的剂型。具体地，所述抗心脑血管疾病药物的剂型为口服给药剂型、注射给药剂型或外用给药制剂。进一步地，所述抗心脑血管疾病药物可以是药剂学上所说的任何一种剂型，包括片剂、胶囊剂、软胶囊、凝胶剂、口服剂、混悬剂、冲剂、贴剂、软膏、丸剂、散剂、注射剂、输液剂、冻干注射剂、静脉乳剂、脂质体注射剂、栓剂、缓释制剂或控释制剂。本专利技术还提出了化合物阿魏酰基槲皮素或山奈酚，其中，阿魏酰基槲皮素或山奈酚，是指槲皮素或山奈酚或它们的苷类成分中的至少一羟基氢原子被阿魏酰基取代。可选地，它们的苷类成分被取代的羟基为6位OH。如：进一步可选地为quercetin3-O-(6-trans-feruloyl)-β-glucopyranosyl-(1→2)-β-glucopyranoside。本专利技术还提出了槲皮素、山奈酚、阿魏酰基槲皮素或山奈酚，或其(槲皮素、山奈酚、阿魏酰基槲皮素或山奈酚)药学上可接受的盐、溶剂化物、异构体、前药分子或代谢物在制备抗心脑血管疾病药物中的应用。本专利技术通过对银杏叶进行提取，得到清膏；然后将得到的清膏进行分离，选择特定出峰时间的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.具有式I所示结构的化合物或者其药学上可接受的盐、溶剂化物、异构体、前药分子或代谢物，该化合物具有如下结构：/n

【技术特征摘要】
1.具有式I所示结构的化合物或者其药学上可接受的盐、溶剂化物、异构体、前药分子或代谢物，该化合物具有如下结构：





2.如权利要求1所述的式I所示化合物的制备方法，其特征在于，该方法包括：
A)对银杏叶进行提取，得到清膏；
B)将得到的清膏进行分离，得到式I所示化合物。


3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤B)包括：
将得到的清膏通过大孔吸附树脂柱色谱、反相柱色谱、凝胶柱色谱和制备型液相色谱进行分离，得到式I所示化合物。


4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，
所述大孔吸附树脂柱色谱中的大孔吸附树脂选自D101型大孔吸附树脂、HP-20型大孔吸附树脂、HPD-450型大孔吸附树脂、HPD-950型大孔吸附树脂和AB-8型大孔吸附树脂中的一种或几种。


5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，
所述反相柱色谱选自动态轴向压缩色谱、高效液相色谱或中低压制备色谱；采用的洗脱液为甲醇-水溶液或者乙腈-水溶液；
所述凝胶柱色谱中的凝胶选自SephadexLH-20、SephadexG15或SephadexG50；
所述制备型液相色谱采用的流动相为甲醇-水溶液或者乙腈-水溶液。


6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，该方法包括：
将银杏叶与50％～95％的乙醇按1：(6～10)混合，提取1～3次，每次提取0.5～3小时，将提取液浓缩得到清膏；
将得到的清膏通过大孔吸附树脂柱，依次采用水、(20～35)％乙醇-水溶液进行洗脱，收集(20～35)％乙醇-水溶液洗脱部位，得到大孔树脂分离后的粗品；
将大孔树脂分离后的粗品通过反相柱色谱分离，其采用梯度洗脱，...

【专利技术属性】
技术研发人员：肖伟，谢雪，温建辉，徐殿红，倪付勇，李明，王永香，殷红梅，吴云，王振中，
申请(专利权)人：江苏康缘药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32