电子表制造技术

本发明专利技术的指针扫描式运行电子表，复位时利用具有禁止向分频电路输入时钟信号的门电路或者设有切断振荡电路的电源，使振荡电路停止振荡的开关元件的简单结构，可使对时时向游丝补充能量的周期性不会紊乱，游丝的恢复力矩与油转子的负载转矩的平衡点不发生变化。这样，在对时结束后，将表把按进去时，秒针立即便可以正常的角速度平滑地扫描式运行。（*该技术在2009年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
专利说明 本专利技术涉及一种免疫学检测方法，即通过使用结合有一种免疫活性反应组分的固相，根据异源免疫检测法测定可免疫检测的物质，还涉及适用于此的反应容器及标准反应容器地使用。 免疫检测法通常被用来测定能被特异结合的物质。在本方法中，使能够相互特异结合的结合对的一个成员与其通过已知方法标记的特异性受体反应。然后，进一步使这两种物质的结合物与一受体反应，此受体特异于结合物或其两个成员之一。可采用许多方式来进行这类免疫学检测。在这类方法中，最好是使受体之一与固相结合。这有助于使结合的和未结合的反应成员分离。在测定能被特异结合的物质时，根据已知方法测量与固相结合的标记的反应成员的量，或测定存在于溶液中的标记的反应成员的量，并计算待测的反应成员的量。 在免疫学方法中通常作为固相使用的有塑料试管或微量滴定板，其内表面结合有反应成员，或反应成分结合在其外表面的小球体。 在这些方法中，特异性反应成员与不同表面的结合必须以这样的方式进行，即它在结合后不丧失与能与其特异结合的物质进行特异性结合的能力。由于此原因，反应成员通常通过吸附作用结合于固相。因此，已有建议指出，反应成员与固相的结合应当通过介导结合作用的偶联剂进行。在此方法中，应当注意不要使反应成员与结合剂的结合破坏分子中进行特异性反应的区域，或者说应使反应成员以这样的方式结合，即使其反应位点背对固相并向着它的结合成员。 所有这些已知方法的缺陷是必须为每种特异反应提供专门的固相。这意味着对每个单独的测试来说，必须制备和贮存另一种固相，然后用来进行测定，这些步骤是很繁琐费时的。 因此，本专利技术的目的是提供一种方法和一种适用于许多不同的检测法的反应容器。在日常的临床诊断中，由一份血液样品测定许多不同的参数，例如激素、肿瘤标记等，并测定感染、过敏性或受孕等的参数。待测参数的浓度范围很广。低浓度参数如TSH和催乳激素的范围是10-10-10-12mol/l，而高浓度参数如T3和T4的浓度大约为10-7-10-8mol/l。就此而言，每次进行单项测定时最好不必使用不同的试管，而是能够在所有测定中使用一个标准的反应容器。 此目的是通过一种免疫学检测方法达到的，即通过使用结合有一种免疫活性反应组分的固相，根据异源免疫检测法测定可免疫检测的物质，其中使用一种反应容器作为固相，其内表面结合有抗生蛋白链菌素或抗生物素蛋白，结合量为每毫升反应体积有0.1～2.5μg。所列数量是指在免疫反应过程中，可由结合成员(其形式为生物素化的蛋白质或半抗原)接近的抗生蛋白链菌素或抗生物素蛋白。 本专利技术的方法适用于所有的测定法，其中，受体可以是抗体或抗原，使它固定于固相上并与生物素结合。本专利技术与固相结合的抗生蛋白链菌素或抗生物素蛋白能很好地粘附于所有的试管材料，而且这种结合对于洗涤剂是稳定的。在对许多免疫学方法进行评价时都需要建立标准曲线，在此过程中，与固相结合的抗生蛋白链菌素或抗生物素蛋白产生很陡的标准曲线，而空白的读数很小，因此提高了精确度。另一优点是，每批之间所包裹的抗生蛋白链菌素量的差别对测量结果只有可以忽略的影响。本专利技术方法的特别突出的优点是，可以调节与固相结合的抗生蛋白链菌素或抗生物素蛋白的量，从而使它能够用于所有已知的以异源免疫检测法为基础的方法。进一步的优点是可用本专利技术的方法同时测定好几种物质，尤其是抗体，但也包括抗原。实例7将对此作更详细的说明。 在一个尤其优选的具体方案中，用作固相的反应容器可同时用作对标记进行光度学测定的小杯。这一点是尤其有利的，因为进行所有的反应时只需使用一个容器。在这种情况下，所制造的反应容器在相互对立的两面应当具有光学透明的壁。所有的壁区域都可以用抗生蛋白链菌素或抗生物素蛋白包裹。 根据本专利技术，用作固相的反应容器在其内表面上结合有抗生蛋白链菌素或抗生物素蛋白。通过现有技术的方法(EP122209)进行抗生蛋白链菌素或抗生物素蛋白的结合。抗生蛋白链菌素或抗生物素蛋白可以直接结合在固相上，或也可以通过间隔物或介导结合作用的物质进行结合。 在本专利技术优选的具体方案中，使抗生蛋白链菌素或抗生物素蛋白与分子量高于大约500000的可溶性蛋白偶联，然后根据例如专利申请P3640412.8所述方法，使此结合物吸附于疏水性固相上。优选使用已经使之具有疏水性的蛋白质。 可通过下述方式提高疏水性，即利用热处理、甲酸、变性剂和/或促溶离子处理和/或通过磺酰方法与疏水化合物偶联。用这些试剂处理还导致分子量的上升。通过下述方式也能使分子量上升即利用双或多功能蛋白剂进行交联。 可以作为酸使用的有例如乙酸、丙酸、乳酸或盐酸。通常的浓度是1-100mmol/l，反应时间为10分钟至16小时。 合适的促溶离子有例如硫氰酸盐、碘化物、氟化物、溴化物、高氯酸盐和硫酸盐。合适的变性剂有例如盐酸胍或脲。它们的浓度通常为10mmol/l至6mol/l。 对于用疏水化合物进行衍生来说，优选使用可溶性脂肪酸、低或高分子量的类脂以及合成聚合物如聚丙烯二醇或可溶性的聚苯乙烯共聚物。用本领域公知的方法进行衍生。 利用已知的蛋白结合剂通过双或多功能化合物进行交联。这些化合物至少具有两个功能基团，它们可以是相同的或不同的，这些化合物能通过这些功能基团与蛋白质的功能基团反应。优选使用由烷基链组成的化合物，在其末端具有琥珀酰亚胺、马来酰亚胺和/或醛基。 通过已知方法使蛋白质与双或多功能化合物交联，即使可溶性蛋白与双或多功能化合物反应。 为了提高疏水性和/或进行交联，优选使用分子量为10000-700000的蛋白质。尤其优选牛血清清蛋白、酯酶或免疫-γ-球蛋白。 然后利用已知方法使抗生蛋白链菌素或抗生物素蛋白与蛋白质交联。合适的偶联方法见于(例如)Ishikawa，J.Immunoassay4209-327，1983。 然后，由抗生蛋白链菌素或抗生物素蛋白和蛋白质得到的结合物吸附于用作固相的塑料表面。在使蛋白质和抗生蛋白链菌素或抗生物素蛋白的结合物吸附于疏水固相之前，也可以对固相进行化学或物理预处理。例如，可预先使塑料表面溶胀或以另一种已知方法活化。与固相的吸附结合是通过强和弱相互作用、疏水力、偶极子-偶极子或离子-偶极子相互作用产生的。 由表面张力小于可溶性疏水蛋白的表面张力的支持材料(即比蛋白质具更强的疏水性)制成的反应容器特别适于用作疏水固相。优选使用表面张力为40erg/cm2的支持材料。特别合适的材料有聚苯乙烯、聚甲基丙烯酸酯、聚四氟乙烯、聚酰胺、苯乙烯和丙烯腈的共聚物、玻璃和纤维素产品等。 本专利技术生产的固相材料被用于测定许多不同的参数。在此方法中，使一种能与待测参数结合的物质与生物素结合，再使其与分别结合在固相上的抗生蛋白链菌素和抗生物素蛋白结合。通过这种方式，能够固定由免疫检测法产生的特异复合物并进行测定。因此，根据本专利技术，分别与固相结合的抗生蛋白链菌素或抗生物素蛋白，在每毫升反应体积中有0.1～2.5μg可用来与能进行特异结合的生物素化物质结合。 所述反应体积是指样品体积和试剂体积之和。 优选以这样的方式来包裹固相材料使得可用来与能进行特异结合的生物素化物质结合的抗生蛋白链菌素或抗生物素蛋白分别为1-2μg。能进行特异结合的生物素化物质量的范围在10-16至10-8mol/反应体积。 本专利技术进一步本文档来自技高网...

【技术保护点】
电子表具有振荡电路、分频电路、驱动器、储能元件、释放控制器、指针和调正器，分频电路对上述振荡电路的输出信号进行分频；驱动器根据上述分频电路的输出信号以Ｎ赫频率间歇式地进行驱动；储能元件存储上述驱动器的功能；释放控制器使上述储能元件存储的能量平滑地以转动能的形式进行释放；指针依靠上述平滑地释放的转动能进行转动；调正器在修正时间时使上述指针停止转动；本专利技术的特征是，在上述电子表中设有分频状态保持器，该保持器利用上述调正器使上述指针停止运行时，可以保持住上述调正器起动时上述分频电路的状态。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：宫泽修，高桥理，早川求，
申请(专利权)人：精工爱普生株式会社，
类型：发明
国别省市：JP[日本]