TPN10456及其制备方法和在多发性硬化症的药物中的应用技术

本发明专利技术涉及一种化合物及其药物应用，TPN10456及其制备方法和在多发性硬化症的药物中的应用。小分子化合物TPN10456，特征是。一种TPN10456及其制备多发性硬化症的药物中的应用。

【技术实现步骤摘要】
TPN10456及其制备方法和在多发性硬化症的药物中的应用
本专利技术涉及一种化合物及其药物应用。
技术介绍
多发性硬化症(Multiplesclerosis,MS)被认为是一种典型的由T细胞介导的中枢神经系统(CentralNervousSystem，CNS)自身免疫性炎症性疾病，其特征是免疫细胞浸润、脱髓鞘、轴突损伤和神经元信号中断。目前人们普遍认为MS是一种受遗传、表观遗传和环境因素影响的异质性、多因素疾病。实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimentalautoimmuneencephalomyelitis，EAE)与MS有许多临床、病理和组织学上的相似之处，是最常用的动物模型。我们对导致MS的免疫过程的理解的进步导致了超过十种FDA批准的疾病修饰药物，这些药物针对调节细胞、效应T细胞、B细胞和炎症细胞贩运到神经系统。然而，这些治疗只是部分有效地阻止MS疾病的进展，这些药物都不能带来完全缓解。治疗多发性硬化症更有效的药物通常伴随着更高的严重不良事件的风险。正如报道的那样，口服芬戈莫德在复发性多发性硬化症中的不良事件包括心动过缓、房室传导阻滞、肝酶水平升高、黄斑水肿和轻度高血压。此外，那他珠单抗以及其他免疫治疗药物与进行性多灶性白质脑病有关。多发性硬化症的治疗仍然是一个巨大的挑战。因此，这种情况促使我们找到一种新的药物，具有良好的疗效和较少的副作用。CD4+T细胞存在于MS患者的中枢神经系统病灶部位和脑脊液中。长期以来，CD4+T细胞一直被证明在调控EAE和MS中起着关键作用。Th1细胞被认为是导致自身免疫性炎症的主要效应T细胞。然而，随后的研究已经确定并强调了Th17细胞在自身免疫中的重要致病作用，这是一种分泌特征细胞因子IL-17A的CD4+T细胞亚群。在细胞因子IL-23存在下，Th17细胞被诱导产生，并在扩张后获得致病性。在缺乏IL-17或IL-17受体的小鼠中，EAE的临床症状得到了显著改善，用单克隆抗体IL-17受体的FC蛋白对细胞因子IL-17进行中和治疗也减轻了病程。这些结果表明，IL-17介导的信号在EAE中起着关键作用。此外，还进行了人类临床试验以评估阻断细胞因子IL-17对自身免疫性疾病的影响。正如欧洲抗风湿联盟会议所报道的，两种针对细胞因子IL-17A的人源化单克隆抗体在类风湿关节炎中显示出鼓舞人心的临床效果。因此，小分子直接抑制Th17细胞分化可能是治疗多发性硬化症的一种选择。
技术实现思路
技术方案一在本研究中，专利技术人首先通过结构驱动优化设计并合成了一种新型的小分子化合物TPN10456，其结构式为：Bn：苄基，也成苯甲基。技术方案二具体的，所述TPN10456的合成方法过程为：a试剂和条件：a)ethyltrifluoroacetate，-40℃，30min，然后25℃，4h；b)(Boc)2O，25℃，12h；c)NH3·H2O，70℃，12h，43％over3steps；d)BnBr，K2CO3，acetone，70℃，10h，88％；e)NaOH，methanol，70℃，4h，94％；f)(COCl)2，reflux，1h，dichloromethane；然后4，Et3N，acylchloride，25℃，10h，dichloromethane，71％；g)con.HCl，methanol，25℃，5h，73％。技术方案三此外，专利技术人进一步发现所述TPN10456在体外以剂量依赖性的方式显著抑制小鼠和人Th17的分化。有趣的是，TPN10456特异性地抑制了致病性Th17细胞的分化，而不是常规的Th17。此外，与对照组相比，TPN10456处理的小鼠表现出较轻的EAE症状，包括较低的EAE临床评分，减少了中枢神经系统中白细胞浸润和减弱了脱髓鞘现象。值得注意的是，在外周淋巴器官、脾脏、引流淋巴结和中枢神经系统中，Th17细胞是EAE/MS进展中的主要致病效应CD4+T细胞之一，其比例明显降低。综上所述，我们的发现表明TPN10456可以通过抑制Th17细胞，有效改善EAE临床症状，这可能为MS提供一种有前途的临床干预，并可能是其他自身免疫性和炎症性疾病的潜在治疗策略。总而言之，我们的数据表明TPN10456在调控MS病理中具有关键作用，可为MS治疗提供新可供选择的药物。多发性硬化症(Multiplesclerosis，MS)及其动物模型，实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimentalautoimmuneencephalomyelitis，EAE)，是一种中枢神经系统(CNS)的慢性神经炎和脱髓鞘疾病。其中，免疫系统中多种成分与中枢神经系统中复杂元素之间的相互作用决定了MS的发病机理。越来越多的证据表明，阻断Th17分化的小分子在治疗自身免疫性疾病方面具有有益的作用。附图说明图1：TPN10456抑制离体Th17细胞分化图2：TPN10456特异性抑制致病性Th17和人Th17细胞图3：TPN10456缓解EAE小鼠临床症状图4：TPN10456抑制CNS中Th17细胞分化图5：TPN10456抑制脾脏Th17细胞分化图6：TPN10456抑制淋巴结和外周血中Th17细胞具体实施方式以下结合实施例和附图对本专利技术技术方案做进一步介绍和验证。实施例材料与方法动物C57BL/6小鼠购自南京模式动物中心(南京，中国)。所用C57BL/6小鼠为8-10周龄，饲养于同济大学实验动物中心SPF级实验室，自由食用水和饲料。所有实验均获得批准，并按照同济大学的动物保护委员会的指导进行。EAE诱导及治疗C57BL/6小鼠(8-10周)皮下注射200μg完全溶于完全弗氏佐剂并包含有热灭活结核杆菌(H37Ra，5mg/ml，BDDiagnostics)的MOG35-55(MEVGWYRSPFSRVVHLYRNGK)。免疫第0天及第2天每只小鼠腹腔注射200ng/只百日咳毒素(Calbiochem)。每天根据临床症状为小鼠评分，评分标准如下：0分，无临床症状；1分，尾部瘫痪；2分，轻度瘫痪(单侧或双侧后肢无力，不完全瘫痪)；3分，截瘫(双侧后肢完全瘫痪)；4分，截瘫并前肢无力或瘫痪；5分，濒死状态或死亡。药物治疗，TPN10456溶于无菌水中并按照(10mg/kg,30mg/kg,100mg/kg,200mg/kg)剂量在免疫第0天灌胃给药直至实验结束，相同体积的200μL无菌水作为对照。组织病理和免疫组织化学分析每只小鼠用200μL10％水合氯醛进行深度麻醉，然后0.9％NaCl心脏灌流去除各器官中的外周血，4％(w/v)多聚甲醛灌流进行固定。取腰髓组织样品4％多聚甲醛4℃固定过夜。石蜡包埋后H&E染色分析炎症浸润，快蓝染色分析脊髓脱髓鞘，Image-Pro软件进行统计分析。细胞染色和流式分析脾脏细胞或体外CD4+T分化实验细胞用PMA(50n本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种新型的小分子化合物TPN10456，特征是，其结构式为：/n

【技术特征摘要】
1.一种新型的小分子化合物TPN10456，特征是，其结构式为：



Bn：苄基，也成苯甲基。


2.如权利要求1所述化合物的合成方法，特征是，TPN10456的合成方法过程为：




a试剂和条件：a)ethyltrifluoroacetate，-40℃，30min，然后25℃，4h；b)(Boc)2O，25℃，12h；c)NH3·H2O，70℃，12h，43％ove...

【专利技术属性】
技术研发人员：杜昌升，吕婕，
申请(专利权)人：同济大学，
类型：发明
国别省市：上海;31