包括神经干细胞培养肉汤作为活性成分的用于抗衰老或减少皱纹的化妆品组合物和其制备方法技术

本发明专利技术涉及一种制备神经干细胞的培养肉汤的方法，肉汤具有极佳的减少皮肤皱纹或增加皮肤弹性的能力，培养肉汤包括能够抑制真皮中涉及胶原蛋白分解的MMPs(基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases))的表达以及活性的高浓度的TIMP

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】包括神经干细胞培养肉汤作为活性成分的用于抗衰老或减少皱纹的化妆品组合物和其制备方法


[0001]本专利技术涉及一种制备神经干细胞条件培养基的方法，所述神经干细胞条件培养基具有极佳的减少皮肤皱纹或增强皮肤弹性的能力且含有作为活性成分的高浓度的TIMP-1(金属蛋白酶组织抑制剂1(tissue inhibitor of metalloproteinase 1))和TIMP-1(金属蛋白酶组织抑制剂2(tissue inhibitor of metalloproteinase 2))以及低浓度的各种MMPs，且更具体地说，涉及一种制备含有高浓度的TIMP-1和TIMP-2的神经干细胞条件培养基的方法，所述神经干细胞条件培养基可减少在真皮中涉及胶原蛋白降解的各种类型的MMPs(基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase))的表达且抑制MMPs的活性。

技术介绍

[0002]皮肤保护人体免受外部环境的影响且对各种生理功能负责。皮肤主要由三个层组成：表皮、真皮以及皮下脂肪。表皮主要由形成角蛋白的细胞(也就是角质细胞)和产生黑色素的细胞(也就是黑素细胞)组成，且真皮主要由含有胶原蛋白和弹性蛋白弹性纤维的结缔组织以及基质组成并且包含肌肉、毛囊、血管、神经以及类似者。
[0003]皮肤衰老的原因包含与年龄增长相关的内部原因和起源于外部环境的外部原因。与皮肤中皱纹的形成密切相关的胶原蛋白(collagen)在皮肤的成纤维细胞中产生，占真皮的90％，且已知随着年龄的增长和在施加外部刺激(例如紫外线)后而减少(S.D.夏皮罗(S.D.Shapiro.)，细胞生物学新观点(Curr.Opin.Cell Biol.)，10，1996；内勒EC等人(Naylor EC et al.)，更年期(Maturitas)，2011)。众所周知，衰老或持续暴露于外部紫外线增加MMPs(基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase))(其降解包含胶原蛋白的结缔组织)的表达和活性，且促进皮肤真皮组织中胶原蛋白的降解，使得胶原蛋白含量降低(A.莫维埃尔(A.Mauviel.)，细胞生物化学期刊(J.Cell.Biochem.)，1993；T全等人(T Quan et al.)，皮肤病学研究期刊研讨会论文集(J.Investig.Dermatol.Symp.Proc.)2009)。此处，众所周知，MMPs的表达根据转录因子(transcription factors)AP-1和NFkB对MMPs的基因的启动子(promoter)的作用进行调节(G.J.费舍尔(G.J.Fisher)和J.J.沃里斯(J.J.Voorhees)，皮肤病学研究期刊研讨会论文集(J.Investig.Dermatol.Symp.Proc.)，1998；K.安倍山等人(K.Abeyama et al.)，临床研究期刊(J.Clin.Invest.)2000)。另外，在维持组织中的胶原蛋白的稳态时抑制MMPs的活性的TIMP(基质金属蛋白酶组织抑制剂(tissue inhibitor of matrix metalloproteinase))的平衡至关重要。
[0004]TIMP(金属蛋白酶组织抑制剂(tissue inhibitor of matrix metalloproteinase)包含TIMP-1、TIMP-2、TIMP-3以及TIMP-4，且充当活体内中存在的MMPs的抑制剂。其中，已知TIMP-1与IV型胶原蛋白酶当中的92kDa MMP-9和MMP-1的前体形式(pro form)结合，且由此不可逆地抑制MMP，并且已知TIMP-2与IV型胶原蛋白酶当中的72kDa MMP-2的前体形式(pro form)和活性形式(active form)两者结合，并且尤其是抑制所有MMPs的活性形式(Y.A.德克莱克等人(Y.A.Declerck et al.)，生物化学期刊
(Biochem.J.)1993；W.博德等人(W.Bode et al.)，纽约科学院年鉴(Ann.N.Y.Acad.Sci.)1999)。
[0005]另外，弹性蛋白(elastin)被认为是涉及皱纹形成的必需纤维组织，所述弹性蛋白与胶原蛋白一起涉及皮肤弹性，且已知弹性蛋白的降解由称为“弹性蛋白酶”的酶的效果进行调节(J.H.钟等人(J.H.Chung et al.)，皮肤病学研究期刊(J.Investig.Dermatol.)，117，2001)。
[0006]因此，由于研发能够减轻和防止皮肤皱纹且改善皮肤弹性的组合物的广泛努力，本专利技术人已发现神经干细胞条件培养基组合物可以通过培养神经干细胞(为成体干细胞)制备，所述神经干细胞条件培养基组合物含有高浓度的TIMP-1和TIMP-2并且含有低浓度的各种MMPs，所述TIMP-1和TIMP-2不可逆地抑制能够抑制皮肤中的胶原蛋白的合成并且促进胶原蛋白分解的各种MMPs的功能。基于这个发现，完成了本专利技术。

技术实现思路

[0007]本专利技术的一个目标是提供一种用于制备神经干细胞条件培养基的方法，所述神经干细胞条件培养基具有改善的减轻皮肤皱纹或增强皮肤弹性的能力，且含有低浓度的能够抑制胶原蛋白产生的MMPs以及含有高浓度的能够通过抑制MMPs的表达和活性来恢复胶原蛋白和弹性蛋白的合成的TIMP-1和TIMP-2，并且提供一种含有神经干细胞条件培养基的化妆品组合物。
[0008]为了实现上述目标，本专利技术提供一种用于制备神经干细胞条件培养基的方法，所述神经干细胞条件培养基具有改善的减轻皮肤皱纹或增强皮肤弹性的能力且含有TIMP-1(金属蛋白酶组织抑制剂1(tissue inhibitor of matrix metalloproteinase 1)和TIMP-2(金属蛋白酶组织抑制剂2(tissue inhibitor of matrix metalloproteinase 2)作为活性成分，方法包含(a)永生化(immortalized)从大脑的脑室区(ventricular zone)分离的成体神经干细胞(neural stem cell；NSC)，以及(b)在非诱导培养基中培养永生化神经干细胞以获得神经干细胞条件培养基。
[0009]本专利技术还提供一种用于减轻皮肤皱纹或增强皮肤弹性的化妆品组合物，所述化妆品组合物含有作为活性成分的含有TIMP-1和TIMP-2的神经干细胞条件培养基。
[0010]本专利技术还提供一种用于使用含有TIMP-1和TIMP-2的神经干细胞条件培养基来减轻皮肤皱纹或增强皮肤弹性的方法。
[0011]本专利技术还提供一种含有TIMP-1和TIMP-2的神经干细胞条件培养基用于缓解皮肤皱纹和增强皮肤弹性的用途。
[0012]本专利技术还提供一种含有TIMP-1和TIMP-2的神经干细胞条件培养基用于制备用于减轻皮肤皱纹或增强皮肤弹性的化妆品组合物的用途。
附图说明
[0013]图1示出使用WST-1分析的结果，确认当使用神经干细胞条件培养基处理本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于制备神经干细胞条件培养基的方法，所述神经干细胞条件培养基具有改善的减轻皮肤皱纹或增强皮肤弹性的能力，且包括TIMP-1(金属蛋白酶组织抑制剂1(tissue inhibitor of metalloproteinase 1))以及TIMP-2(金属蛋白酶组织抑制剂2(tissue inhibitor of metalloproteinase 2))作为活性成分，所述方法包括：(a)永生化(immortalized)从大脑的脑室区(ventricular zone)分离的成体神经干细胞(neural stem cells，NSC)；以及(b)在非诱导培养基中培养永生化神经干细胞以获得神经干细胞条件培养基。2.根据权利要求1所述的用于制备神经干细胞条件培养基的方法，其中所述神经干细胞条件培养基进一步包括TIMP-3或TIMP-4。3.根据权利要求1所述的用于制备神经干细胞条件培养基的方法，其中所述神经干细胞条件培养基抑制MMP1(基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinases-1))、MMP-2(基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinases-2))、MMP-3(基质金属蛋白酶-3(matrix metalloproteinases-3))以及MMP-9(基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinases-9))的表达或活性。4.根据权利要求1所述的用于制备神经干细胞条件培养基的方法，其中所述神经干细胞条件培养基恢复皮肤组织中的胶原蛋白或弹性蛋白。5.根据权利要求1所述的用于制备神经干细胞条件培养基的方法，其中所述神经干细胞条件培养基抑制皮肤组织中活性氧物种(reactive oxygen species)的产生或修复DNA(脱氧核糖核酸)损伤。6.根据权利要求5所述的用于制备神经干细胞条件培养基的方法，其中通过增加Rad50、Rad51或XRCC4的活性来进行所述DNA(脱氧核糖核酸)损伤修复。7.根据权利要求1所述的用于制备神经干细胞条件培养基的方法，其中所述非诱导培养基包括DMEM(达尔伯克氏改良伊格尔氏培养基(Dulbecco's Modified Eagle's Medium))、10％FBS(胎牛血清(fetal bovine serum))以及1％青霉素/链霉素(penicillin/streptomycin)。8.一种用于减轻皮肤皱纹或增强皮肤弹性的化妆品组合物，包括作为活性成分的神经干细胞条件培养基，所述神经干细胞条件培养基包括TIMP-1(金属蛋白酶组织抑制剂1(tissue inhibitor of metalloproteinase 1))以及TIMP-2(金属蛋白酶组织抑制剂2(tissue inhibitor of metalloproteinase 1))。9.根据权利要求8所述的用于减轻皮肤皱纹或增强皮肤弹性的化妆品组...

【专利技术属性】
技术研发人员：洪性会，黄仁植，
申请(专利权)人：高丽大学校产学协力团，
类型：发明
国别省市：