多肽化合物及其制备方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种多肽化合物及其制备方法与应用，多肽化合物的结构式为：(Cys

【技术实现步骤摘要】
多肽化合物及其制备方法与应用


[0001]本专利技术涉及生物医药领域，特别是涉及一种多肽化合物及其制备方法与应用。

技术介绍

[0002]自从1962年从铃蟾皮肤中分离获得由22个氨基酸组成的铃蟾抗菌肽之后，人们已从两栖动物皮肤中发现了多种抗菌肽。1980年在美国天蚕体内发现了第一个昆虫来源的抗菌多肽，以后在微生物、水产动物、脊椎动物、哺乳动物中也陆续发现具有抗菌防御功能的多肽分子。生物体产生抵御致病微生物的肽类分子被统称为“抗菌肽”，或被称为宿主“防御素”。“抗菌肽”或“防御素”构成了宿主抵抗外来病原菌感染的第一道防线，保护宿主自身不受致病微生物的侵害。
[0003]抗菌肽(antibacterial peptide)的特征是由氨基酸组成的肽分子，氨基酸数目少于100，常携带正电荷，具有确定的抗菌活性。目前发现的生物体产生的天然抗菌肽有抑制革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、真菌、病毒、寄生虫等功能。抗菌肽最为吸引人关注的优点包括：大多数抗菌肽的氨基酸数目在15-45个氨基酸之间，作用靶点为细菌的细胞膜，对宿主无毒或低毒，无耐药性，具有良好的热稳定性及生物安全性。与人类友好伴生的益生菌乳酸菌产生的乳链菌肽(Nisin)是目前研究得最为清楚的抗菌肽，Nisin是由34个氨基酸组成的直链肽分子，它对引起食品腐败的革兰氏阳性菌中的葡萄球菌、链球菌、微球菌具有良好的抑制生长作用，被美国、欧盟、中国的食品药品监督管理局批准作为食品添加剂应用于食品保存。
[0004]由于自然界中的抗菌肽不易产生耐药性，具有良好的生物安全性、环境安全性等，从而吸引了科学家以天然抗菌肽为先导化合物进行各种方式的分子改良，以期获得更为高效的抗菌效果、更长久的稳定性、更良好的生理适应性，更易于应用于日常或临床实施，更便于人工合成的抗菌肽。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是针对现有技术中存在的技术缺陷，第一方面，提供一种多肽化合物，其结构式见式Ⅰ，为：(Cys-poly-B
m
)
2-K-(poly-A
n
)，
[0006][0007]其中poly-B
m
与poly-A
n
均为直链肽，K为赖氨酸(Lys,K)，Cys为半胱氨酸，(Cys-poly-B
m
)
2-K是以K为分支点，连接有分支片段为poly-B
m
的两分支肽，两分支肽片段poly-B
m
的末端氨基酸均为半胱氨酸Cys，且两分支肽片段末端的两个半胱氨酸通过二硫键(经氧化形成的)连接，使得两分支肽片段poly-B
m
形成环肽(环肽由K、poly-B
m
、Cys、Cys、poly-B
m
依次首尾连接形成)；
[0008]m为poly-B
m
直链肽所包含的氨基酸数目，n为poly-A
n
直链肽所包含的氨基酸数目；优选的，m为2-10，n为4-15；更优选的，m为2-7，n为6-12；再优选的，m为3-5，n为7-10；最优选的，m为4，n为8。
[0009]poly-A
n
主要由碱性氨基酸组成，碱性氨基酸选自精氨酸(Arg，R)、赖氨酸(Lys，K)、组氨酸(His，H)中的一种或几种，优选精氨酸(Arg，R)。
[0010]poly-B
m
主要由疏水性氨基酸组成，可由同一种疏水氨基酸组成，或由多种不同疏水氨基酸组成；所述疏水性氨基酸选自苯丙氨酸(Phe，F)、丙氨酸(Ala，A)、亮氨酸(Leu，L)、异亮氨酸(Ile，I)、色氨酸(Trp，W)、脯氨酸(Pro，P)、缬氨酸(Val，V)、蛋氨酸(Met，M)和甘氨酸(Gly，G)中的一种或几种；优选亮氨酸(Leu，L)、异亮氨酸(Ile，I)、色氨酸(Trp，W)、脯氨酸(Pro，P)、缬氨酸(Val，V)中的一种或几种。
[0011]所述环肽可以选用L型氨基酸，也可选用D型氨基酸，也可夹杂个别具有氨基酸特性的分子组成环肽。
[0012]所述多肽化合物可以是与有机酸或无机酸形成的盐类化合物；或所述多肽化合物所带有的羟基可形成但不限于所形成的醚、酯、苷或甙等的化合物；或所述多肽化合物所带有的巯基可形成但不限于所形成的硫醚、硫苷，或与半胱氨酸或含半胱氨酸的肽所形成的含有二硫键的化合物；或所述多肽化合物所带有的氨基可形成但不限于所形成的酰化物、烃化物、与糖类物质所形成的苷类物质等；或所述多肽化合物所带有的羧基可形成但不限于所形成的酯、酰胺类化合物等；或所述多肽化合物所带有的亚氨基可形成但不限于所形成的苷、酰化物、烃化物等；或所述多肽化合物所带有的酚羟基可形成但不限于所形成的酯、醚、苷、甙类化合物，与有机碱或无机碱所形成的盐类化合物；或所述多肽化合物与金属离子所形成的配合物、络和物或螯合物；或所述多肽化合物所形成的水合物或溶剂物。
[0013]第二方面，本专利技术提供一种药物组合物，含有上述多肽化合物，其几何异构体、其药学上可接受的盐或溶剂化合物、可药用载体或赋形剂。
[0014]第三方面，本专利技术提供制备上述多肽化合物的方法，依次包括分支肽(Cys-poly-B
m
)
2-K-(poly-A
n
)的合成，和对两分支肽片段Cys-poly-B
m
末端的Cys进行氧化形成环肽的过程。
[0015]所述分支肽(Cys-poly-B
m
)
2-K-(poly-A
n
)的合成为：首先采用多肽固相Fmoc/tBu合成法从多肽的羧基端向氨基端逐一接枝延长，直至完成目标肽链的合成；
[0016]所述分支肽(Cys-poly-B
m
)
2-K-(poly-A
n
)的合成具体包括：
[0017](1)、肽链的合成：以Fmoc-Rink Amide树脂(取代值为0.3mmol/g)为起始原料，用含六氢吡啶的DMF溶液去除N端Fmoc保护基使N端成为自由氨基，然后加入Fmoc-AA(Pbf)-OH、HOBt和DIC进行接枝反应以引入氨基酸残基；反应完成后用纯DMF洗涤树脂，采用Kaiser Test检测接枝效率，若氨基酸接枝反应显示不完全，重复接枝反应；每接枝一个目标氨基酸都要经过去除保护基、接枝氨基酸、洗涤树脂的过程，完成一个氨基酸残基在目标肽链上的延伸，直至完成目标肽段poly-A
n
的合成；
[0018](2)、分支：继续去除N端Fmoc后，加入Fmoc-Lys(Fmoc)-OH、HOBt和DIC进行接枝反应以引入分支氨基酸残基Lys(K)；用含六氢吡啶的DMF溶液去除N端以及Lys侧链Fmoc保护基，使此处产生两个自由氨基(氮端以及侧链处)>K-poly-A
n
；
[0019](3)、分支肽的延伸：加入Fmoc-本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种多肽化合物，其特征在于，其结构式见式Ⅰ，为：(Cys-poly-B
m
)
2-K-(poly-A
n
)，其中poly-B
m
与poly-A
n
均为直链肽，K为赖氨酸(Lys,K)，Cys为半胱氨酸，(Cys-poly-B
m
)
2-K是以K为分支点，连接有分支片段为poly-B
m
的两分支肽，两分支肽片段poly-B
m
的末端氨基酸均为半胱氨酸Cys，且两分支肽片段末端的两个半胱氨酸通过二硫键(经氧化形成的)连接，使得两分支肽片段poly-B
m
形成环肽(环肽由K、poly-B
m
、Cys、Cys、poly-B
m
依次首尾连接形成)；m为poly-B
m
直链肽所包含的氨基酸数目，n为poly-A
n
直链肽所包含的氨基酸数目；优选的，m为2-10，n为4-15；更优选的，m为2-7，n为6-12；再优选的，m为3-5，n为7-10；最优选的，m为4，n为8。2.根据权利要求1所述多肽化合物，其特征在于，poly-A
n
主要由碱性氨基酸组成，碱性氨基酸选自精氨酸(Arg，R)、赖氨酸(Lys，K)、组氨酸(His，H)中的一种或几种，优选精氨酸(Arg，R)。3.根据权利要求1或2所述多肽化合物，其特征在于，poly-B
m
主要由疏水性氨基酸组成，可由同一种疏水氨基酸组成，或由多种不同疏水氨基酸组成；所述疏水性氨基酸选自苯丙氨酸(Phe，F)、丙氨酸(Ala，A)、亮氨酸(Leu，L)、异亮氨酸(Ile，I)、色氨酸(Trp，W)、脯氨酸(Pro，P)、缬氨酸(Val，V)、蛋氨...

【专利技术属性】
技术研发人员：韩苏，
申请(专利权)人：韩苏，
类型：发明
国别省市：