一种检测动脉斑块稳定性的方法技术

本发明专利技术涉及检验医学和心脑血管病领域。本发明专利技术涉及化验人外周血的方法，一种检测动脉斑块稳定性的方法，所述方法是通过检验外周血中肺炎衣原体基因组特异性核酸序列来检测外周血中和动脉斑块内的肺炎衣原体感染来判断动脉斑块的稳定性。具体以下三个方面：外周血中肺炎衣原体感染作为动脉斑块发生发展和相关疾病发病的新的血液危险因素；新的检测动脉斑块稳定性的方法还根据个体动脉斑块内肺炎衣原体感染状况和感染程度，对动脉斑块炎症反应进行分型和分期；根据检测的人外周血液中和动脉斑块内肺炎衣原体感染状况确定实施稳定动脉斑块和降低炎症反应的用药方案中用途的方法。本发明专利技术以上方法具有良好的社会价值和经济价值。价值。

【技术实现步骤摘要】
一种检测动脉斑块稳定性的方法


[0001]本专利技术涉及化验抽取的人体外周血液的方法，特别是一种通过PCR技术检验人体外周血中肺炎衣原体来检测动脉斑块内肺炎衣原体感染的方法，进一步涉及检测动脉斑块稳定性并确定实施稳定斑块药物方案中用途的方法。本专利技术涉及检验医学和心脑血管病领域。
[0002]专利技术背景
[0003]动脉斑块，也称动脉粥样硬化斑块，是导致心脑血管病的主要原因。目前，动脉斑块发生发展相关的血液危险因素检测指标包括高总胆固醇、高低密度脂蛋白胆固醇、高小而密的低密度脂蛋白胆固醇、高甘油三酯、高血糖、高同型半胱氨酸、高脂蛋白(a)或高超敏C-反应蛋白水平等(Yuhua Sun，et al.Clin.Cardiol，2007，30：576-580)。这些血液危险因素多是人体血液的正常成分，只不过其值高于正常水平，而且，近半数动脉斑块和临床心脑血管病患者的以上血液指标在正常范围。其实，人体血液中任何正常成分水平过低或过高都对心脑血管病没有益处(Yuhua Sun，Yuejin Yang.Future Lipidol，2008，3：127-128)。因此，还存在与动脉斑块发生发展和心脑血管病发生相关的其它血液危险因素。
[0004]绝大多数动脉斑块病变局部表现为内膜增厚、斑块形成及管腔狭窄等。动脉斑块相关临床疾病，特别是心脑血管病的发生受动脉斑块负荷、管腔狭窄程度等因素的影响，更与不稳定性动脉斑块发生破裂或侵蚀，及血栓形成直接相关。目前，检查有无动脉斑块、钙化和非钙化病变、动脉管腔狭窄程度，主要是通过颈动脉超声、冠脉CT、冠状动脉造影或脑血管造影等技术。动脉斑块是否为薄纤维帽斑块，是否发生过破裂或愈合，斑块内是否有新生血管等这些斑块易损特征，则主要依靠血管内超声、光学相干断层成像及核磁共振等技术检查，这些检查能直接观察斑块的形态结构，也有助于判断动脉斑块的稳定性。然而，我们还需要从理论创新的角度来提高对动脉斑块炎症本质的认识，并为之提供一种更具前瞻性的有效认知动脉斑块稳定性的方法。
[0005]动脉斑块的病理本质是炎症反应(孙余华，王凤连。国外医学免疫学分册，1992，1：16-19)，其发生发展过程包括血管内皮损伤、血中物质在局部沉积、血管平滑肌细胞增生并向分泌型转化、炎性细胞产生各种炎症因子、炎性渗出、细胞坏死、纤维化及钙化等。有的动脉斑块病变局部也证实有微生物存在。绝大多数学者认为微生物只是“无辜的旁观者”，动脉斑块属于无菌性炎症。本专利技术人认为，动脉斑块内的“外来的，非人体固有的”微生物参与了炎症的发生发展过程，并决定着动脉斑块发生破裂的不稳定性。在几种感染微生物中(Yuhua Sun，et al.Atherosclerosis，2005，179：133-137)，最受重视的是肺炎衣原体(孙余华，等。中华医学杂志，2004，84：1990-1993)。
[0006]肺炎衣原体(Chlamydia pneumoniae，Cp，有文献中也缩写成C.pneumoniae，CP或CPn)是1965年首次在中国台湾儿童的眼结膜分泌物中分离出一株与其它衣原体不同的衣原体，当时命名为TW(Taiwan)-183，1983年又在美国西雅图1名急性呼吸道感染的大学生咽部分泌物中，分离出另一株衣原体而命名为AR-39(Acute respiratory-39)，后经研究鉴定，发现此两株实为同一种衣原体，1989年正式命名为TWAR，又称肺炎衣原体。
[0007]Cp属于一种特殊的微生物，大小介于细菌和病毒之间，是呼吸道感染的常见病原体。Cp有独特的生长周期，有2种互变的形态和功能表型：原体和始体。原体代谢停滞，有传染性，能在细胞外短暂存活；始体是细胞内Cp繁殖的状态，不具传染性。Cp很容易逃避宿主免疫反应，抗生素也很难杀灭它。
[0008]1988年，瑞典学者首次报道急性心梗和冠心病患者的血清抗Cp抗体阳性率显著高于对照(Saikku P，et al.Lancet，1988，ii：983-986)。此后，一些横断面血清学研究也证实了Cp感染与冠心病相关(Yuhua Sun，et al.International Journal of Cardiology，2004，97：199-203)。许多组织学研究在动脉斑块处检测出Cp病原体。受不同研究和不同检测技术的影响，免疫组化Cp检出阳性率约为33-71％(Caroline WATSON.Clinical Science，2008，114：509-531)。动物实验研究也提示，反复Cp感染能促进动脉斑块发生发展，且具有种属特异性。Cp病原体能通过单核巨噬细胞和淋巴细胞从肺部移行至正常的或已有病变的动脉血管壁内，持续存活在血管内皮细胞，感染血管平滑肌细胞，参与动脉斑块的炎症反应。外周血中也能检测出Cp病原体，而且，外周血的Cp病原体DNA与动脉斑块内CpDNA检出率和检出量呈正相关。然而，欧美国家进行的抗生素用于冠心病患者的前瞻性临床研究却没能进一步证实Cp感染与冠心病的相关性(Grayston JT，et al.N Engl J Med，2005，325：1637-1645.Cannon CP，et al.N Engl J Med，2005，325：1646-1654)。本专利技术人认为，那些前瞻性临床研究的设计需要更加严谨，还不能排除Cp感染在动脉斑块及相关疾病发生发展中的作用。我们知道，从动脉斑块发生发展和破裂或侵蚀，到局部血栓形成，再到系列临床症状出现及各种治疗措施对相关疾病预后影响的机制是非常复杂的(Sun Yuhua，Wang Baoping.Perfusion，2018，33：89-95)。
[0009]目前，世界范围内，动脉斑块及相关疾病发生发展的理论，主要还是70年前美国福莱明翰心脏研究提出的胆固醇学说，它影响着动脉斑块相关疾病的防治措施。其实，相比人类200多万年的历史，现代医学200年对人类健康和疾病的认知，只能算是刚刚起步。胆固醇是人体的正常成分，是人类生存代谢的基本物质，如果像现在这样，只盯着胆固醇恐怕很难解决动脉斑块相关疾病的问题。鉴于心脑血管病对人类健康影响的严峻形势，需要新思想和新概念来催生检测动脉斑块稳定性的新方法。

技术实现思路

[0010]本专利技术首先提供一种新的检测个体动脉斑块发生发展和心脑血管病发病相关的血液危险因素的方法，特征是通过化验动脉斑块患者的外周静脉全血、血清、血浆或分离的单个核细胞，检测Cp基因组特异性核酸序列，标识Cp感染状态和感染程度。如果检测出有Cp基因组特异性核酸序列，它一方面表示血液中有Cp病原体感染，也表明动脉斑块内有Cp感染，同时，还作为动脉斑块发生发展及相关临床疾病，特别是心脑血管病发病的血液危险因素。
[0011]人体外周循环血液中有Cp感染，它一方面表明动脉斑块内有Cp感染，同时，循环血液中的Cp病原体与特异性抗体结合，也影响血液形成血栓。具体地讲，抗原和抗体水平高时，抗体与抗原结合形成大分子免疫复合物的量就多，血液趋于高凝状态或前血栓状态，动脉斑块破裂后形成血栓的危险性就高。所述抗原是本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种检测人体动脉斑块稳定性的方法，所述方法是检测动脉斑块内肺炎衣原体感染来判断人体动脉斑块稳定性。2.根据权利要求1所述的方法，所述检测动脉斑块内肺炎衣原体感染是检测人体外周血中的肺炎衣原体基因组特异性核酸序列，表示其血液中和动脉斑块内肺炎衣原体感染。3.根据权利要求2所述方法，所述检测肺炎衣原体基因组特异性核酸序列包括肺炎衣原体基因组包涵体膜蛋白基因保守序列。4.根据权利要求2所述的方法，所述检测人体外周血中的肺炎衣原体基因组特异性核酸序列，其检测方法包括利用PCR、荧光定性PCR或荧光定量PCR技术等。5.根据权利要求4所述的方法，所述荧光定量PCR技术检测人体外周血中的肺炎衣原体基因组特异性核酸序列是指检测所述核酸序列拷贝数量的多少。6.根据权利要求2所述的方法，所述检测人外周血中的肺炎衣原体基因组特异性核酸序列，其外周血包括抽取的静脉全血、血清、血浆或分离的单个核细胞等。7.一种分类个体动脉斑块的方法，所述方法是根据权利要求1所述的动脉斑块内有或无肺炎衣原体感染来分类人体动脉斑块，动脉斑块内有肺炎衣原体感染为有菌型动脉斑块，动脉斑块内无肺炎衣原体感染为无菌型动脉斑块。8.一种分类个体动脉斑块稳定性的方法，所述方法是根据权利要求7所述的有菌型或无菌型动脉斑块来分类动脉斑块的稳定性，有菌型动脉斑块属于不稳定性动脉斑块，无菌型动脉斑块属于稳定性动脉斑块。9.一种检测个体动脉斑块相关疾病发病血液危险因素的方法，所述方法是根据权利要求2所述检测血液中肺炎衣原体感染来判断动脉斑块相关疾病发病的危险性。10.一种检测个体动脉斑块稳定性的方法，所述方法是根据权利要求1所述检测动脉斑块内...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙余华，
申请(专利权)人：孙余华，
类型：发明
国别省市：