一种生物碱类化合物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种生物碱类化合物，通过理化性质和现代波谱学手段，对分离得到的化合物进行了结构鉴定。本发明专利技术还运用LPS诱导RAW 264.7细胞炎症模型的活性筛选体系进行对其进行活性评价，发现该化合物对小鼠巨噬细胞系RAW 264.7有一定的保护作用，可以显著抑制PGE2，显示出较强的抗炎作用。显示出较强的抗炎作用。显示出较强的抗炎作用。

【技术实现步骤摘要】
一种生物碱类化合物及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及医药
，特别涉及一种新化合物及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]青蒿为菊科植物黄花蒿(Artemisia annua L.)的干燥地上部分，秋季花盛开时采割，除去老茎，阴干。味苦性辛寒，归肝、胆经，具有清虚热、除骨蒸、解暑热、截拒、退黄等作用。用于温邪伤阴、夜热早凉、阴虚发热、骨蒸劳热、暑邪发热、疟疾寒热、湿热黄疸。
[0003]临床治疗中抗炎药物是仅次于抗感染药物的第二大类药物,其中包括甾体类抗炎药物(SAID)与非甾体类抗炎药物(NSAID)。但是由于许多合成药物有较强的毒副反应，人们愈来愈重视从天然药物中开发抗炎药物。

技术实现思路

[0004]本专利技术旨在对青蒿抗炎活性新成分进行更深入的研究，发现其发挥抗炎作用的活性成分。
[0005]有鉴于此，本专利技术提出了一种生物碱类化合物或者其药学上可接受的盐、溶剂化物、互变异构体、立体异构体、前药分子、代谢物，所述化合物结构如式I所示：
[0006][0007]本专利技术的另一目的在于提供一种上述化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
[0008]步骤1：取青蒿干燥地上部分，用3-5倍水热回流提取2-3次，每次2小时，合并提取液，减压回收溶剂至原体积的1/10，加入90％-95％乙醇直至醇浓度达到70％-90％，静置过夜，收集上清液减压浓缩得总浸膏；
[0009]步骤2：所述总浸膏溶于水，经大孔吸附树脂柱色谱分离，依次以水、45～55％乙醇、90～100％乙醇梯度洗脱，分别收集各洗脱液，减压浓缩至无醇味，得到水洗脱部位、45％～55％乙醇洗脱部位、90～100％乙醇洗脱部位；
[0010]步骤3：取所述45～55％乙醇洗脱部位，经硅胶柱色谱分离，用二氯甲烷-甲醇梯度洗脱(100:0到0:100,v/v)，收集得到A-K共11个馏分，馏分D经ODS柱色谱分离，用甲醇-水(90:10到80:20,v/v)梯度洗脱，得到D1-D3共3个馏分，馏分D2经半制备液相色谱分离，即得。
[0011]进一步地，所述步骤1为：青蒿干燥地上部分，用3-5倍水热回流提取2-3次，每次2
小时，合并提取液，减压回收溶剂至原体积的1/10，加入95％乙醇直至醇浓度达到80％，静置过夜，收集上清液减压浓缩得总浸膏。
[0012]优选地，所述步骤2的梯度洗脱为依次以水、45％乙醇、90％乙醇不同浓度的乙醇水溶液进行梯度洗脱。
[0013]具体地，所述大孔吸附树脂选自D101型大孔吸附树脂、HP-20型大孔吸附树脂、HPD-100型大孔吸附树脂、HPD-100A型大孔吸附树脂或HPD-300型大孔吸附树脂。
[0014]进一步地，所述半制备液相色谱的条件为：规格为C
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,5μm,10
×
250mm的Phenomenex Gemini柱，体积比例的甲醇-水为流动相，检测波长为238-258nm，流速1-5mL/min；优选为246-250nm，流速3-4mL/min。
[0015]优选地，所述步骤1为用3倍水热回流提取2次，每次2小时，合并提取液，减压回收溶剂至原体积的1/10，加入95％乙醇直至醇浓度达到80％，静置过夜，收集上清液减压浓缩得总浸膏。
[0016]可选地，所述半制备液相色谱的条件优选为：体积比例15:85的甲醇-水为流动相，检测波长为248nm，流速4mL/min，保留时间可为22.5min。
[0017]本专利技术的再一目的在于提供上述化合物或者其药学上可接受的盐、溶剂化物、互变异构体、立体异构体、前药分子、代谢物在制备抗炎药物中的应用。本专利技术化合物对LPS诱导RAW 264.7细胞产生PGE2有显著的抑制作用。
[0018]本专利技术还提出了一种用于治疗炎症的药物，其包括式(I)所示化合物或者其药学上可接受的盐、溶剂化物、互变异构体、立体异构体、前药分子、代谢物。所述的抗炎药是指用于治疗或预防组织受到损伤后等等所发生炎症反应的药物。
[0019]进一步地，所述药物含有治疗有效量的上述化合物以及一种或多种药学上可接受的载体。
[0020]具体地，所述药物可以是药剂学上所说的任何一种剂型，包括片剂、胶囊剂、软胶囊、凝胶剂、口服剂、混悬剂、冲剂、贴剂、软膏、丸剂、散剂、注射剂、输液剂、冻干注射剂、静脉乳剂、脂质体注射剂、栓剂、缓释制剂或控释制剂。
[0021]进一步地，所述药学上可接受的载体是指药学领域常规的药物载体，例如：稀释剂、赋形剂和水等，填充剂如淀粉、蔗糖，乳糖、微晶纤维素等；粘合剂如纤维素衍生物、藻酸盐、明胶和聚乙烯吡咯烷酮；润湿剂如甘油；崩解剂如羧甲基淀粉钠，羟丙纤维素，交联羧甲基纤维素，琼脂、碳酸钙和碳酸氢钠；吸收促进剂如季铵化合物；表面活性剂如十六烷醇，十二烷基硫酸钠；吸附载体如高龄土和皂粘土；润滑剂如滑石粉、硬脂酸钙和镁、微粉硅胶和聚乙二醇等。另外还可以加入其它辅剂如香味剂、甜味剂等。
[0022]本专利技术所述的生物碱类化合物是研究人员在青蒿中发现的新化学成分，并且发现此化合物在不同批次的青蒿中均稳定存在。专利技术人通过理化性质和现代波谱学手段(HR-MS、1H-NMR、
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C-NMR和2D-NMR等)，对上述方法分离得到的化合物进行了结构鉴定，证实其为结构如式(I)所示的新化合物。本专利技术还运用LPS诱导RAW 264.7细胞炎症模型等活性筛选体系进行活性评价，发现该化合物对小鼠巨噬细胞系RAW 264.7有一定的保护作用，可以显著抑制PGE2，显示出较强的抗炎作用，具有良好的研究开发前景。
附图说明
[0023]图1为本专利技术化合物的HR-ESI-Q-TOF-MS图谱；
[0024]图2为本专利技术化合物的UV图谱；
[0025]图3为本专利技术化合物的IR图谱；
[0026]图4为本专利技术化合物的1H-NMR谱；
[0027]图5为本专利技术化合物的
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C-NMR谱；
[0028]图6为本专利技术化合物的DEPT-135谱；
[0029]图7为本专利技术化合物的H
1-H
1 COSY谱；
[0030]图8为本专利技术化合物的HSQC谱
[0031]图9为本专利技术化合物的HMBC谱；
[0032]图10为本专利技术化合物的主要HMBC相关和H
1-H
1 COSY相关。
具体实施方式
[0033]以下将结合实验例的内容进行具体描述。
[0034]特别需要指出的是，针对本专利技术所做出的类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本专利技术。相关人员明显能在不脱离本
技术实现思路
、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本专利技术技术。显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。
[0035]本专利技术如未注明具体条件者，均按照本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种生物碱类化合物或者其药学上可接受的盐、溶剂化物、互变异构体、立体异构体、前药分子、代谢物，所述化合物结构如式I所示：2.一种如权利要求1所述化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：取青蒿用3-5倍水回流提取2-3次，合并提取液，减压回收溶剂，加入90％-95％乙醇直至醇浓度达到70％-90％，静置，收集上清液减压浓缩得总浸膏；步骤2：所述总浸膏溶于水，经大孔吸附树脂柱色谱分离，依次以水、45～55％乙醇、90～100％乙醇梯度洗脱，分别收集各洗脱液，减压浓缩，得到水洗脱部位、45％～55％乙醇洗脱部位、90～100％乙醇洗脱部位；步骤3：取所述45～55％乙醇洗脱部位，经硅胶柱色谱分离，用二氯甲烷-甲醇以100:0到0:100体积比梯度洗脱，收集得到A-K共11个馏分，馏分D经ODS柱色谱分离，用甲醇-水以90:10到80:20体积比梯度洗脱，得到D1-D3共3个馏分，馏分D2经半制备液相色谱分离。3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1包括：取青蒿用3-5倍水回流提取2-3次，每次1-3小时，合并提取液，减压回收溶剂至原体积的1/10，加入95％乙醇直至醇浓度达到70-90％，静置过夜，收集上清液减压浓缩得总浸膏。4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤2的梯度洗脱为依次以水、45％...

【专利技术属性】
技术研发人员：曹亮，肖伟，李海波，杨一帆，顾莎莎，王团结，杨彪，胡晗绯，王振中，
申请(专利权)人：江苏康缘药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：