Toll样受体-7小分子抑制剂及其制备方法技术

本发明专利技术属于化学小分子领域，尤其涉及一种Toll样受体

【技术实现步骤摘要】
Toll样受体-7小分子抑制剂及其制备方法


[0001]本专利技术属于化学小分子领域，尤其涉及一种Toll样受体-7的小分子抑制剂。

技术介绍

[0002]Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)是一种I型跨膜蛋白，它在先天性免疫和获得性免疫中均扮演了重要的角色。TLR信号通路功能失调尤其是TLR被过量表达并激活往往会导致严重的炎症疾病和自身免疫疾病，如类风湿性关节炎，系统性红斑狼疮等。因此，TLR作为一个新的药物靶点，医药公司和研究人员都对开发其新型有效的抑制剂分子充满了热情。而其中，TLR7的特异性小分子抑制剂，文献报道较少。这是由于TLR7和TLR8蛋白同属一个亚族，其结构有高度相似性，因此开发选择性调控这两个蛋白的抑制剂具有一定的挑战。

技术实现思路

[0003]专利技术要解决的技术问题
[0004]本专利技术的目的是提供一种结构新颖、高效、无毒、特异性的TLR7的小分子抑制剂。
[0005]用于解决技术问题的方法
[0006]针对上述问题，本专利技术提出了一类Toll样受体-7的小分子抑制剂及其制备方法。
[0007]根据本专利技术的一个实施方案，提供一类Toll样受体-7小分子抑制剂，其具有以下结构：
[0008][0009]其中，A选自NO2，NH2，H；
[0010]X选自n为0-3；
[0011]Y选自酰基，亚烷基，磺酰基；
[0012]Z选自取代或未取代的芳基，杂芳基，稠环芳基，降冰片烯基，环烷基，烷基等；取代基选自氟代烷基，烷基取代胺基，烷氧基，羟基，羟烷基，硝基，卤素等。
[0013]一种实施方式为，
[0014]其中，A选自NO2，NH2，H；
[0015]X选自单键；
[0016]Y选自酰基，亚甲基，磺酰基；
[0017]Z选自取代或未取代的苯基，取代或未取代的环己基，取代或未取代的噻吩基，取代或未取代的吡啶基，取代或未取代的喹啉基，取代或未取代的金刚烷基，取代或未取代的烷基，取代基选自氟代烷基，烷基取代胺基，烷氧基，羟基，羟烷基，硝基，卤素等。
[0018]一种实施方式为，抑制剂具体为下述结构：
[0019][0020][0021]根据本专利技术的第二方面，提供一种制备上述化合物的方法，包括以下步骤：
[0022]硝基取代的溴代喹啉通过硝化反应由溴代喹啉制备，反应条件为浓硝酸、浓硫酸，室温下反应。
[0023]通过亲核取代反应，由溴代喹啉或硝基取代的溴代喹啉与1位保护的哌嗪反应制备哌嗪1位氮原子被保护的哌嗪-喹啉结构化合物，反应条件为碳酸钾、DMF，加热回流；
[0024]将哌嗪1位氮原子被保护的哌嗪-喹啉结构化合物脱除保护基；
[0025]通过酰基化反应将“Z”部分引入至哌嗪环的另一侧；
[0026]根据本专利技术的第三方面，上述化合物Toll样受体-7小分子抑制剂在医药领域的潜在应用。
[0027]本专利技术的有益效果
[0028]以筛选得到的TLR7和TLR8的共抑制剂为研究对象，通过对母体化合物的结构优化和构效关系(SAR)的研究，实现对TLR7和TLR8的选择性调控，进而开发出对TLR7有一定选择性的高效、无毒、特异性的小分子抑制剂。后续通过一系列生物学测试方法验证了其对TLR7
下游信号通路中的相关因子的生物学效果和生物活性评价。最后我们还通过对病人血液样本的测试，初步证明了该类TLR7小分子抑制剂在自身免疫疾病(系统性红斑狼疮)中有一定的效果和潜在的药用价值。
[0029]从以下示例性实施方案的描述中，本专利技术的进一步特征将变得显而易见。
附图说明
[0030]其中，S-1为筛选出的苗头化合物，S-38又被命名为TH-407a，S-42又被命名为TH-407b(该小分子为生物活性评价的重点研究对象)。
[0031]图1是母体化合物S-1分子在浓度为5μM条件下的特异性测试结果(对不同TLR的选择性)；
[0032]图2是TH-407b分子(即S-42分子)的生物活性测试结果(对TLR7的抑制效果)。表示：TH-407b能以剂量依赖性的方式抑制R848诱导的TLR7激活，其IC
50
为0.23
±
0.03μM，而其类似物S-28的效力要低得多。
[0033]图3表示TH-407b分子(即S-42分子)的细胞毒性；
[0034]图4表示以S-28为对照，在HEK-Blue TLR7细胞中，不同浓度的TH-407b可以抑制R848(2μg/mL)激活的白细胞介素8(IL-8)-mRNA表达量。
[0035]图5a和图5b表示经ELISA检测，TH-407b可剂量依赖性地抑制2μg/mL R848处理的RAW 264.7细胞的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)的表达量。
[0036]图6表示TH-407b可抑制TLR7下游信号通路中TRAF3和p-IKBα的表达。
[0037]图7a、图7b和图7c表示TH-407b的药学潜力。TH-407b可剂量依赖性地抑制来自SLE患者的PBMCs中的TNF-α、IL-6和IL-1β表达量。每个数据点代表一个独立的样本。中心线表示均值，胡须线表示
±
s.e.m。(P值采用单因素方差分析；*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001)。
具体实施方式
[0038]以下对本公开的一个实施方式具体地说明，但本公开并非限定于此。
[0039]通过实施例更详细地描述本专利技术，但本专利技术不限于下述实施例。
[0040]实施例1
[0041]初始筛选得到的苗头化合物S-1的合成
[0042]第一步：以5-溴喹啉(1g,4.8mmol)为原料，在冰浴条件下缓慢滴加3mL 98％的浓硫酸，再缓慢滴加1.5倍当量的浓硝酸，在冰浴条件下搅拌30min，体系由淡黄色浓稠液体变成深棕褐色液体。3h后，取100ul体系中的样品，加入2M的NaOH溶液中和至pH等于8左右，立即有大量淡黄色固体析出。加入100ul乙酸乙酯溶解、萃取，以石油醚：乙酸乙酯＝4：1的极性进行TLC爬板，发现只在R
f
约为0.5处有一个新点。随后，在反应体系中滴加入2M的NaOH溶液(中和至pH等于8左右)，直到有大量的淡黄色固体析出，抽滤，用纯水洗涤三次，抽滤至较干，将固体转移至圆底烧瓶中，在液氮中冻成固体，于冻干机上冻干，得到1.15g淡黄色固体，产率为95％。1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ9.09(dd,J＝4.2,1.5Hz,1H),8.63(dd,J＝8.6,1.6Hz,1H),7.91(d,J＝1.7Hz,2H),7.67(dd,J＝8.6,4.2Hz,1H).
13
C NMR(101MHz,CDCl3)δ153.16,本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种Toll样受体-7小分子抑制剂，其具有以下结构：其中，A选自NO2，NH2，H；X选自n为0-3；Y选自酰基，亚烷基，磺酰基；Z选自取代或未取代的芳基或杂芳基，稠环芳基，降冰片烯基，环烷基，烷基等；取代基选自氟代烷基，烷基取代胺基，烷氧基，羟基，羟烷基，硝基，卤素等。2.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，其中，其中，A选自NO2，NH2，H；X选自单键；Y选自酰基，亚甲基，磺酰基；Z选自取代或未取代的苯基，取代或未取代的环己基，取代或未取代的噻吩基，取代或未取代的吡啶基，取代或未取代的喹啉基，取代或未取代的金刚烷基，取代或未取代的烷基，取代基选自氟代烷基，烷基取代胺基，烷氧基，羟基，羟烷基，硝...

【专利技术属性】
技术研发人员：尹航，蒋双双，陈和恺，
申请(专利权)人：清华大学，
类型：发明
国别省市：