作为佐剂的溶瘤病毒制造技术

本文描述了用作免疫佐剂的溶瘤病毒。通过施用所述溶瘤病毒和至少一种抗原性肽(后者不是通过前者编码的)，提供了辅佐对哺乳动物对象中抗原性蛋白的免疫应答的方法。在不要求所述病毒编码所述抗原性蛋白的情况下，可以容易地使疗法个体化或配制所述疗法。所述病毒可以是减毒或失活的。还提供了用于肿瘤的初免：加强免疫疗法，其中所述初免包括至少一种抗原性蛋白，所述加强免疫包括病毒和至少一种抗原性蛋白，所述初免的至少一种抗原性蛋白和所述加强免疫的至少一种抗原性蛋白基于相同的至少一种肿瘤相关抗原，并且所述加强免疫的至少一种抗原性蛋白不是所述加强免疫的病毒所编码的。的。的。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】作为佐剂的溶瘤病毒


[0001]本专利技术公开涉及用于增强免疫应答的佐剂。更具体地，本专利技术公开涉及作为佐剂的溶瘤病毒。

技术介绍

[0002]病原体和疾病细胞包含可以通过免疫系统检测和靶向的抗原，因此提供了基于免疫的疗法的基础，其包括免疫原性疫苗和免疫疗法。在癌症治疗的背景中，例如，免疫疗法基于以下事实：癌细胞通常在它们的细胞表面上具有可以识别和靶向的分子。
[0003]部分出于它们直接杀死疾病细胞的能力，还已在癌症疗法中使用了病毒。例如，溶瘤病毒(OVs)特异性感染恶性细胞，在所述细胞中复制并杀死所述细胞，从而留下不受影响的正常组织。几种OVs已达到用于治疗多种赘生物的临床评价的晚期阶段(Russell SJ.等人,(2012)Nat Biotechnol 30:658-670)。除水泡性口膜炎病毒(VSV)之外(Stojdl DF.等人,(2000)Nat Med 6:821-825；Stojdl DF.等人,(2003)Cancer Cell4:263-275)，最近已描述了显示出溶瘤活性的其它弹状病毒(Brun J.等人,(2010)Mol Ther 18:1440-1449；Mahoney DJ.等人,(2011)Cancer Cell 20:443-456)。其中，非VSV马拉巴病毒显示出最广泛的体外肿瘤趋性(WO 2009/016433)。工程设计了具有改善的肿瘤选择性和在正常细胞中具有低毒力的突变体马拉巴病毒。减毒株是含有G蛋白(Q242R)和M蛋白(L123W)突变两者的双重突变株。体内，称为MG1或马拉巴MG1的这种减毒株在小鼠中的异种移植和同基因肿瘤模型中显示出有效的抗-肿瘤活性，其具有优于减毒VSV，VSVΔM51(WO 2011/070440)的治疗效力。
[0004]已发展了多种策略来改善OV-引起的抗-肿瘤免疫性(Pol J.等人,(2012)Virus Adaptation and Treatment 4:1-21)。这些策略利用了OV本身的溶瘤活性和对肿瘤-相关抗原产生免疫性的能力两者。定义为溶瘤疫苗的一种策略包括从OV表达肿瘤抗原(Russell SJ.等人,(2012)Nat Biotechnol 30:658-670)。先前，已表明VSV也可以用作癌症疫苗载体(Bridle BW.等人,(2010)Mol Ther 184:4269-4275)。当在治疗鼠科黑素瘤模型的异源初免：加强免疫环境中应用时，VSV-人多巴色素互变异构酶(hDCT)溶瘤疫苗不仅引起对DCT的高肿瘤-特异性免疫，而且还引起了相伴的降低的抗病毒适应性免疫。因此，通过中值和长期存活两者的升高，显著改善了治疗效力(WO2010/105347)。在PCT专利申请No.PCT/CA2014/050118中公开了三种具体的初免：加强免疫组合疗法。组合疗法包括编码抗原：人乳头状瘤病毒(HPV)E6/E7融合蛋白、人前列腺6次跨膜上皮抗原(huSTEAP)蛋白或者癌症睾丸抗原1的慢病毒；和编码相同抗原的马拉巴MG1病毒。PCT专利申请No.PCT/CA2014/050118也公开了使用编码MAGEA3作为抗原的腺病毒和编码相同抗原的马拉巴MG1病毒的初免：加强免疫组合疗法。PCT专利申请No.PCT/IB2017/000622公开了包括感染、复制和杀死恶性细胞的溶瘤病毒的组合初免：加强免疫疗法。工程设计病毒以编码和表达基于肿瘤相关抗原的抗原性蛋白。抗原性蛋白(i)产生免疫性和(ii)引起获得治疗效果的免疫应答。
[0005]将期望提供更容易适合于靶标和/或对个体敏感的疗法。
[0006]专利技术简述
[0007]以下专利技术简述旨在向读者介绍本文所述的一种或多种专利技术，而不是限制它们中的任一种。
[0008]本专利技术公开的目标在于避免或降低先前方法的至少一种缺点。
[0009]意外地发现溶瘤病毒可以用作佐剂。本专利技术公开的作者发现施用于哺乳动物的溶瘤病毒可以辅佐对所施用的非所述病毒所编码的抗原性蛋白的免疫应答。因此，根据本专利技术公开的疗法不需要病毒-编码的抗原。在初免：加强免疫疗法的背景中，例如，初免、加强免疫或两者可以包括病毒和单独的非病毒编码的抗原性蛋白。这些结果是意外的，因为先前认为编码抗原的病毒表达对于对所述抗原性蛋白的免疫应答的刺激是重要的。由于不需要修饰编码抗原性蛋白的溶瘤病毒，因此疗法可以更适合于不同的靶标，例如，使用合成肽。它们可以更易于个体化，例如，以靶向给定肿瘤的肿瘤-相关抗原。
[0010]在一个方面，提供了用于在哺乳动物对象中引起免疫应答的组合初免：加强免疫疗法，其中：所述初免包括至少一种抗原性蛋白，其配制以在所述哺乳动物中产生免疫应答；并且所述加强免疫包括病毒和至少一种抗原性蛋白，其配制以在所述哺乳动物中引起免疫应答；其中所述初免的至少一种抗原性蛋白和所述加强免疫的至少一种抗原性蛋白基于相同的至少一种肿瘤相关抗原，并且其中所述加强免疫的至少一种抗原性蛋白不被所述加强免疫的病毒所编码。
[0011]在一个方面，在组合初免：加强免疫治疗中提供了用于在哺乳动物对象中引起免疫应答的包含初免或加强免疫的组合物，其中：所述初免包括至少一种抗原性蛋白，其配制以在所述哺乳动物中产生免疫应答；并且所述加强免疫包括病毒和至少一种抗原性蛋白，其配制以在所述哺乳动物中引起免疫应答；其中所述初免的至少一种抗原性蛋白和所述加强免疫的至少一种抗原性蛋白基于相同的至少一种肿瘤相关抗原，并且其中所述加强免疫的至少一种抗原性蛋白不被所述加强免疫的病毒所编码。
[0012]在一个方面，在组合初免：加强免疫治疗中提供了用于在哺乳动物对象中引起免疫应答的包含初免的组合物，其中：所述初免包括至少一种抗原性蛋白，其配制以在所述哺乳动物中产生免疫应答；并且所述加强免疫包括病毒和至少一种抗原性蛋白，其配制以在所述哺乳动物中引起免疫应答；其中所述初免的至少一种抗原性蛋白和所述加强免疫的至少一种抗原性蛋白基于相同的至少一种肿瘤相关抗原，并且其中所述加强免疫的至少一种抗原性蛋白不被所述加强免疫的病毒所编码。
[0013]在一个方面，在组合初免：加强免疫治疗中提供了用于在哺乳动物对象中引起免疫应答的包含加强免疫的组合物，其中：所述初免包括至少一种抗原性蛋白，其配制以在所述哺乳动物中产生免疫应答；并且所述加强免疫包括病毒和至少一种抗原性蛋白，其配制以在所述哺乳动物中引起免疫应答；其中所述初免的至少一种抗原性蛋白和所述加强免疫的至少一种抗原性蛋白基于相同的至少一种肿瘤相关抗原，并且其中所述加强免疫的至少一种抗原性蛋白不被所述加强免疫的病毒所编码。
[0014]在另一个方面，提供了用于在哺乳动物对象中引起免疫应答的试剂盒，其中所述试剂盒包含：包括至少一种抗原性蛋白的初免，所述抗原性蛋白配制以在所述哺乳动物中产生免疫应答；和包括病毒和至少一种抗原性蛋白的加强免疫，所述抗原性蛋白配制以在所述哺乳动物中引起免疫应答；其中所述初免的至少一种抗原性蛋白和所述加强免疫的至
少一种抗原性蛋白基于相同的至少一种肿瘤相关本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.用于在哺乳动物对象中引起免疫应答的方法，其包括：a.施用包括能够在所述哺乳动物中产生免疫应答的至少一种抗原性蛋白的初免；和b.施用包括溶瘤病毒和至少一种抗原性蛋白的加强免疫，其配制以在所述哺乳动物中引起免疫应答；其中所述初免的至少一种抗原性蛋白和所述加强的至少一种抗原性蛋白来源于相同肿瘤抗原，和其中所述加强免疫的至少一种抗原性蛋白不被所述加强的病毒所编码。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述初免的至少一种抗原性蛋白的氨基酸序列和所述加强的至少一种抗原性蛋白的氨基酸序列至少70％是相同的。3.根据权利要求2所述的方法，其中所述初免的至少一种抗原性蛋白的氨基酸序列和所述加强的至少一种抗原性蛋白的氨基酸序列至少80％是相同的。4.根据权利要求3所述的方法，其中所述初免的至少一种抗原性蛋白的氨基酸序列和所述加强的至少一种抗原性蛋白的氨基酸序列至少90％是相同的。5.根据权利要求4所述的方法，其中所述初免的至少一种抗原性蛋白的氨基酸序列和所述加强免疫的至少一种抗原性蛋白的氨基酸序列是相同的。6.根据权利要求1所述的方法，其中：a.所述初免的至少一种抗原性蛋白包含多种抗原性蛋白，并且所述加强的至少一种抗原性蛋白包含多种抗原性蛋白，其每一个不被所述加强的病毒所编码，和b.所述初免的多种抗原性蛋白和所述加强的多种抗原性蛋白基于相同的多种肿瘤相关抗原。7.根据权利要求6所述的方法，其中所述初免的多种抗原性蛋白和所述加强的多种抗原性蛋白是相同的。8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述加强免疫的病毒是溶瘤病毒。9.根据权利要求1至8所述的方法，其中所述加强免疫的病毒是弹状病毒。10.根据权利要求9所述的方法，其中所述弹状病毒是马拉巴病毒。11.根据权利要求10所述的方法，其中所述马拉巴病毒是MG1。12.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述加强的病毒为腺病毒、牛痘病毒或者水泡性口膜炎病毒。13.根据权利要求1至12中任一项所述的方法，其中将所述加强免疫配制用于静脉内、肌内或肿瘤内施用。14.根据权利要求1至13中任一项所述的方法，其中将所述初免配制用于静脉内、肌内或肿瘤内施用。15.根据权利要求1至14中任一项所述的方法，其中所述加强免疫的病毒是失活的。16.根据权利要求15所述的方法，其中所述加强的病毒是UV-灭活的。17.根据权利要求1至16中任一项所述的方法，其中所述初免还包含非病毒佐剂。18.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述初免还包括病毒，其中所述初免的病毒与所述加强免疫的病毒是免疫原性相异的。19.根据权利要求18所述的方法，其中所述初免的病毒为腺病毒。20.根据权利要求17至19中任一项所述的方法，其中所述初免的病毒是失活的。
21.根据权利要求20所述的方法，其中所述初免的病毒是UV-灭活的。22.用于在哺乳动物对象中引起免疫应答的初免：加强免疫疫苗，其中：a.包括能够在所述哺乳动物中产生免疫应答的至少一种抗原性蛋白的所述初免；和b.包括溶瘤病毒和至少一种抗原性蛋白的所述加强免疫，其配制以在所述哺乳动物中引起免疫应答；其中所述初免的至少一种抗原性蛋白和所述加强免疫的至少一种抗原性蛋白来源于相同肿瘤抗原，和其中所述加强免疫的至少一种抗原性蛋白不被所述加强免疫的病毒所编码。23.根据权利要求22所述的所用的初免：加强免疫疫苗，其中所述初免的至少一种抗原性蛋白的氨基酸序列和所述加强免疫的至少一种抗原性蛋白的氨基酸序列是至少70％同一的。24.根据权利要求23所述的所用的初免：加强免疫疫苗，其中所述初免的至少一种抗原性蛋白的氨基酸序列和所述加强免疫的至少一种抗原性蛋白的氨基酸序列是至少80％同一的。25.根据权利要求24所述的所用的初免：加强免疫疫苗，其中所述初免的至少一种抗原性蛋白的氨基酸序列和所述加强免疫的至少一种抗原性蛋白的氨基酸序列是至少90％同一的。26.根据权利要求25所述的所用的初免：加强免疫疫苗，其中所述初免的至少一种抗原性蛋白的氨基酸序列和所述加强免疫的至少一种抗原性蛋白的氨基酸序列是相同的。27.根据权利要求22所述的所用的初免：加强免疫疫苗，其中：a.所述初免的至少一种抗原性蛋白包含多种抗原性蛋白，并且所述加强免疫的至少一种抗原性蛋白包含多种抗原性蛋白，其每一个不被所述加强免疫的病毒所编码，和b.所述初免的多种抗...

【专利技术属性】
技术研发人员：玛丽克劳德，
申请(专利权)人：特斯通有限责任合伙公司，
类型：发明
国别省市：