一种针对固体样本进行全自动核酸提取的方法技术

本发明专利技术公开了一种针对固体样本进行全自动核酸提取的方法，用于解决现有的基于磁珠法的自动化核酸提取仪没有很好地解决固体不溶性杂质去除的问题；本发明专利技术将装有固体样本的双层裂解管放入自动化核酸提取仪的样本区；机械臂将样本放入加热震荡区，移液机械臂将试剂加入双层裂解管，机械臂给内管加盖加热震荡裂解；将样本放入自动配平离心机，离心，含有核酸的溶液流入外管，固体杂质残留在内管；机械臂丢弃内管，移液机械臂往外管中加入结合液，吹打混匀后将混合液转移至吸附柱中，吸附柱底部为核酸吸附硅胶膜，机械臂将吸附柱和废液槽一起放入自动配平离心机，实现了在仪器平台上自动化去除不溶性固体杂质的目标。动化去除不溶性固体杂质的目标。动化去除不溶性固体杂质的目标。

【技术实现步骤摘要】
一种针对固体样本进行全自动核酸提取的方法


[0001]本专利技术涉及核酸提取
，具体为一种针对固体样本进行全自动核酸提取的方法。

技术介绍

[0002]核酸作为遗传信息的载体，位于真核细胞的细胞核、线粒体、叶绿体等细胞器内或原核细胞的细胞质内(病毒等无细胞结构的生命体除外)。多种与核酸相关的技术，都需要首先获得纯度较高的核酸溶液，即核酸提取，例如，医学核酸检测技术、法医DNA物证鉴定技术、基因克隆技术等等。
[0003]核酸提取技术经历了酚抽提法、碱裂解法、CTAB抽提法、硅珠法、磁珠法、硅胶膜法等技术的发展，近些年，随着仪器设备的发展，基于磁珠法的自动化核酸提取仪逐渐得到了广泛的应用。无论是哪一种核酸提取技术，都必须解决几个问题，一是细胞裂解、二是核酸结合蛋白的去除、三是固体不溶性杂质的去除、四是可溶性杂质的去除，现有的基于磁珠法的自动化核酸提取仪没有很好地解决固体不溶性杂质去除的问题，对于液体样本或经消化裂解后可完全变成可溶性液体的固体样本，可以实现全部提取步骤自动化操作，而对于固体样本，则需要实验人员手动对样本进行裂解、离心去除固体杂质等操作。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的就在于为了解决现有的基于磁珠法的自动化核酸提取仪没有很好地解决固体不溶性杂质去除的问题，而提出一种针对固体样本进行全自动核酸提取的方法，实现了在仪器平台上自动化去除不溶性固体杂质的目标。
[0005]本专利技术的目的可以通过以下技术方案实现：一种针对固体样本进行全自动核酸提取的方法，包括以下步骤：
[0006]S1：将固体样本装入双层裂解管中；
[0007]S2：将装有固体样本的双层裂解管放入自动化核酸提取仪的样本区；
[0008]S3：第一机械臂将样本放入加热震荡区，移液机械臂将试剂加入双层裂解管，第一机械臂给内管加盖加热震荡裂解；
[0009]S4：将样本放入自动配平离心机，离心，含有核酸的溶液流入外管，固体杂质残留在内管；
[0010]S5：第一机械臂丢弃内管，移液机械臂往外管中加入结合液，吹打混匀后将混合液转移至吸附柱中；
[0011]S6：第一机械臂将吸附柱和废液槽一起放入自动配平离心机，离心；
[0012]S7：移液机械臂往吸附柱内加入漂洗液，离心；
[0013]S8：移液机械臂往吸附柱内再次加入漂洗液，离心，第一机械臂将吸附柱转移至洗脱管中，第一机械臂将吸附管和洗脱管一起转移至加热震荡区，50～70℃加热2～3分钟，往吸附柱内加入洗脱液，第一机械臂给吸附柱加盖，50～70℃加热2～3分钟；
[0014]S9：第一机械臂将吸附管和洗脱管放入自动配平离心机，离心，然后第一机械臂将吸附管和洗脱管放入低温保存区，完成核酸提取。
[0015]优选的，所述双层裂解管包括外管和内管，所述内管顶部开设有凹槽，所述凹槽内设置有环形凸起，且环形凸起与内管内壁固定连接；
[0016]所述凹槽底部开设有放置槽，且凹槽与放置槽连通，所述放置槽内设置有疏水滤膜，且疏水滤膜与内管底部内壁固定连接；
[0017]所述内管下方设置有外管，且外管套接固定在内管外侧，所述外管顶部开设有存储槽，所述放置槽与存储槽连通。
[0018]优选的，所述疏水滤膜由聚四氟乙烯滤膜、聚丙烯滤膜、聚醚砜滤膜的一种或多种组合构成，所述疏水滤膜的的孔径为0.1um～40um。
[0019]优选的，所述外管顶部固定有连接管，且连接管远离外管的一端与内管固定连接。
[0020]优选的，所述存储槽内设置有出料漏斗，且出料漏斗顶部与内管底部固定连接，所述出料漏斗底部开设有过滤槽，且过滤槽的顶部和底部分别与放置槽和存储槽连通。
[0021]优选的，所述过滤槽内设置有支撑筛板，且支撑筛板与内管内部的疏水滤膜相互配合，且支撑筛板顶部开设有筛选孔，筛选孔的直接为10～1000um。
[0022]与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：
[0023]1、将装有固体样本的双层裂解管放入自动化核酸提取仪的样本区；机械臂将样本放入加热震荡区，移液机械臂将试剂加入双层裂解管，机械臂给内管加盖加热震荡裂解；将样本放入自动配平离心机，离心，含有核酸的溶液流入外管，固体杂质残留在内管；机械臂丢弃内管，移液机械臂往外管中加入结合液，吹打混匀后将混合液转移至吸附柱中，吸附柱底部为核酸吸附硅胶膜，机械臂将吸附柱和废液槽一起放入自动配平离心机，离心；移液机械臂往吸附柱内加入漂洗液，离心；移液机械臂往吸附柱内再次加入漂洗液，离心；机械臂将吸附柱转移至洗脱管中，机械臂将吸附管和洗脱管一起转移至加热震荡区，50～70℃加热2～3分钟，往吸附柱内加入洗脱液，机械臂给吸附柱加盖，50～70℃加热2～3分钟；机械臂将吸附管和洗脱管放入自动配平离心机，离心，机械臂将吸附管和洗脱管放入低温保存区，完成核酸提取；实现了在仪器平台上自动化去除不溶性固体杂质的目标。
附图说明
[0024]为了便于本领域技术人员理解，下面结合附图对本专利技术作进一步的说明。
[0025]图1为本专利技术的双层裂解管结构示意图。
具体实施方式
[0026]下面将结合实施例对本专利技术的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0027]请参阅图1所示，一种针对固体样本进行全自动核酸提取的方法，将固体样本装入双层裂解管中，所述双层裂解管包括外管10和内管4，所述内管4顶部开设有凹槽12，所述凹槽12内设置有环形凸起1，且环形凸起1与内管4内壁固定连接；
[0028]所述凹槽12底部开设有放置槽3，且凹槽12与放置槽3连通，所述放置槽3内设置有疏水滤膜5，且疏水滤膜5与内管4底部内壁固定连接；
[0029]所述内管4下方设置有外管10，且外管10套接固定在内管4外侧，所述外管10顶部开设有存储槽7，所述放置槽3与存储槽7连通。
[0030]所述疏水滤膜5由聚四氟乙烯滤膜、聚丙烯滤膜、聚醚砜滤膜的一种或多种组合构成，所述疏水滤膜5的的孔径为0.1um～40um。
[0031]所述外管10顶部固定有连接管11，且连接管11远离外管10的一端与内管4固定连接。
[0032]所述存储槽7内设置有出料漏斗6，且出料漏斗6顶部与内管4底部固定连接，所述出料漏斗6底部开设有过滤槽8，且过滤槽8的顶部和底部分别与放置槽3和存储槽7连通。
[0033]所述过滤槽8内设置有支撑筛板9，且支撑筛板9与内管4内部的疏水滤膜5相互配合，且支撑筛板9顶部开设有筛选孔，筛选孔的直接为10～1000um；
[0034]将装有固体样本的双层裂解管放入自动化核酸提取仪的样本区；自动化核酸提取仪为专利CN109628441A公开了一种全自动核酸纯化仪；
[0035]机械臂将样本放入加热震荡区，移液本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种针对固体样本进行全自动核酸提取的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：将固体样本装入双层裂解管中；S2：将装有固体样本的双层裂解管放入自动化核酸提取仪的样本区；S3：第一机械臂将样本放入加热震荡区，移液机械臂将试剂加入双层裂解管，第一机械臂给内管(4)加盖加热震荡裂解；S4：将样本放入自动配平离心机，离心，含有核酸的溶液流入外管(10)，固体杂质残留在内管(4)；S5：第一机械臂丢弃内管(4)，移液机械臂往外管(10)中加入结合液，吹打混匀后将混合液转移至吸附柱中；S6：第一机械臂将吸附柱和废液槽一起放入自动配平离心机，离心；S7：移液机械臂往吸附柱内加入漂洗液，离心；S8：移液机械臂往吸附柱内再次加入漂洗液，离心，第一机械臂将吸附柱转移至洗脱管中，第一机械臂将吸附管和洗脱管一起转移至加热震荡区，50～70℃加热2～3分钟，往吸附柱内加入洗脱液，第一机械臂给吸附柱加盖，50～70℃加热2～3分钟；S9：第一机械臂将吸附管和洗脱管放入自动配平离心机，离心，然后第一机械臂将吸附管和洗脱管放入低温保存区，完成核酸提取。2.根据权利要求1所述的一种针对固体样本进行全自动核酸提取的方法，其特征在于，所述双层裂解管包括外管(10)和内管(4)，所述内管(4)顶部开设有凹槽(12)，所述凹槽(12)内设置有环形凸起(1)，且环形凸起(1)与内管(4)内壁固定连接；所述凹槽(12)底部开设有...

【专利技术属性】
技术研发人员：张丹，熊槐，任其翾，谢文明，侯庆唐，夏冬景，何凤琴，
申请(专利权)人：安徽森芃生物科技有限责任公司，
类型：发明
国别省市：