CST1-CTSH复合物作为食管癌诊断标志物的应用制造技术

本发明专利技术涉及医学诊断学领域，具体而言，涉及一种CST1

【技术实现步骤摘要】
CST1-CTSH复合物作为食管癌诊断标志物的应用


[0001]本专利技术涉及医学诊断学领域，具体而言，涉及一种CST1-CTSH复合物作为食管癌诊断标志物的应用。

技术介绍

[0002]食管癌(Esophageal carcinoma)是常见的消化道肿瘤，是世界上最常见的十大恶性肿瘤之一。
[0003]研究发现在肿瘤的侵袭转移过程中，肿瘤细胞必须穿越周围的基质，基质的降解主要与各种组织蛋白水解酶有关，研究表明肿瘤细胞的侵袭转移能力与组织蛋白酶降解细胞外基质的能力密切相关。
[0004]组织蛋白酶H(Cathepsin H,CTSH)是一种溶酶体半胱氨酸蛋白酶，广泛存在于人体组织细胞中，该酶是一种肽链内切酶，但同时也具有外切酶活性，该酶通常以无活性的前体形式被合成，其内肽酶活性在溶酶体的酸性PH中通过自溶获得，而外肽酶活性则通过内肽酶活性获得。CTSH的表达在大多数的恶性肿瘤中上调，如胸，肺，胃，黑色素瘤，神经胶质瘤，而且其表达水平与肿瘤恶性程度相关。半胱氨酸蛋白酶抑制剂SN(cystatins SN，CST1)是组织蛋白酶抑制剂的一种，由CST1基因编码的含141个氨基酸的蛋白质，分子量为16.4kDa。CST1分子中含有两个二硫键，为典型的分泌蛋白，它能抑制细胞内、外的组织蛋白酶活性，在肿瘤的生长、血管生成、浸润和转移中起重要作用，并且有研究表明CST1的高表达与多种癌症相关。
[0005]目前对于食管癌的肿瘤标记物分析主要包括CA125、CEA、CA199、SCCA和SCC等，但是临床检测阳性率不高于30％。由于CTSH用作肿瘤诊断标志物时组织特异性较差，很难定位到具体肿瘤类型，不仅仅在胃癌中有高表达，在胃癌、神经胶质瘤、黑色素瘤等患者中也存在表达。虽然CST1在食管癌中有一定的区分度，但是由于其序列上与同家族的半胱氨酸蛋白酶抑制剂S(cystatins S，CST4)存在高度同源性，因此CST1作为食管癌靶标也具有一定的局限性。

技术实现思路

[0006]本专利技术涉及半胱氨酸蛋白酶抑制剂SN与Cathepsin H复合物(CST1-CTSH复合物)的定量检测剂在制备用于食管癌的诊断、辅助诊断或预后分析的试剂盒中的应用。
[0007]可选的，所述定量检测剂为所述半胱氨酸蛋白酶抑制剂SN以及所述Cathepsin H的特异性抗体，所述抗体可用于执行免疫共沉淀或酶联免疫吸附试验以对所述CST1-CTSH复合物。
[0008]可选的，所述定量检测剂为所述CST1-CTSH复合物的特异性抗体。
[0009]可选的，所述特异性抗体为单克隆抗体或多克隆抗体。
[0010]可选的，所述特异性抗体由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列免疫得到。
[0011]可选的，所述特异性抗体具有用于指示信号强度的标记。
[0012]可选的，所述用于指示信号强度的标记选自发色团、地高辛标记探针、电子致密物质、胶体金或酶中的任一种或多种。
[0013]本专利技术还涉及食管癌诊断、辅助诊断或预后分析试剂盒，其包含如上所定义的特异性抗体。
[0014]可选的，所述试剂盒还包含固相载体、封闭液、显色剂、CST1-CTSH融合抗原的校准品以及洗涤缓冲液中的至少一种。
[0015]可选的，所述固相载体为化学发光板。
[0016]通过CST1-CTSH复合物的检测能够有效的提高标志物的组织特异性，还能够有效提高对早期食管癌的检测率。
附图说明
[0017]为了更清楚地说明本专利技术具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本专利技术的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0018]图1为本专利技术一个实施例中CST1-CTSH重组蛋白纯化后的SDS-PAGE电泳图；
[0019]图2为本专利技术一个实施例中CST1-CTSH检测试剂盒校准曲线；
[0020]图3为本专利技术一个实施例中CST1-CTSH对食管癌和正常人检测结果的样本浓度散点图；
[0021]图4为本专利技术一个实施例中CST1-CTSH对食管癌诊断的ROC曲线。
具体实施方式
[0022]现将详细地提供本专利技术实施方式的参考，其一个或多个实例描述于下文。提供每一实例作为解释而非限制本专利技术。实际上，对本领域技术人员而言，显而易见的是，可以对本专利技术进行多种修改和变化而不背离本专利技术的范围或精神。例如，作为一个实施方式的部分而说明或描述的特征可以用于另一实施方式中，来产生更进一步的实施方式。
[0023]因此，旨在本专利技术覆盖落入所附权利要求的范围及其等同范围中的此类修改和变化。本专利技术的其它对象、特征和方面公开于以下详细描述中或从中是显而易见的。本领域普通技术人员应理解本讨论仅是示例性实施方式的描述，而非意在限制本专利技术更广阔的方面。
[0024]本专利技术涉及半胱氨酸蛋白酶抑制剂SN与Cathepsin H复合物(CST1-CTSH复合物)的定量检测剂在制备用于食管癌的诊断、辅助诊断或预后分析的试剂盒中的应用。
[0025]本专利技术提供了一种用于诊断的新标志物：CST1-CTSH复合物。据文献报道，CTSH可被CST1抑制而结合形成复合物，而CST4不具备此能力。因此通过CST1-CTSH复合物的检测能够有效的提高标志物的组织特异性，还能够有效提高对早期食管癌的检测率。
[0026]本文使用的术语“标志物”指要用作分析患者实验样品的靶标的分子。这样的分子靶标的实例是蛋白或多肽。在本专利技术中用作标志物的蛋白或多肽预期包括所述蛋白的天然存在的变体以及所述蛋白或所述变体的片段，特别是免疫学上可检测的片段。免疫学上可检测的片段优选地包含所述标志物多肽的至少5、6、7、8、9、10、11、12、15或20个连续氨基
酸。本领域的技术人员可认识到，由细胞释放的蛋白或存在于胞外基质中的蛋白可能受到损害(例如，在炎症过程中)，且可被降解或切割成这样的片段。某些标志物以无活性形式合成，其可以随后通过蛋白酶解来激活。如熟练的技术人员将明白的，蛋白或其片段也可以作为复合物的部分而存在。这样的复合物也可以用作本专利技术意义上的标志物。另外，或在替代方案中，标志物多肽或其变体可以携带翻译后修饰。翻译后修饰的非限制性实例是糖基化、酰化和/或磷酸化。特别地，所述标志物应当位于CST1-CTSH复合物中CST1和CTSH结合部位，这种“结合”是指CST1和CTSH相互作用时氨基酸序列互相接触的部位，可以是线性表位或空间表位。
[0027]在一些实施方式中，所述定量检测剂为所述半胱氨酸蛋白酶抑制剂SN以及所述Cathepsin H的特异性抗体，所述抗体可用于执行免疫共沉淀或酶联免疫吸附试验以对所述CST1-CTSH复合物。
[0028]定量检测剂通常是特异性地检测CST1-CTSH复合物的试剂，例如，特异性结合CS本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.半胱氨酸蛋白酶抑制剂SN与Cathepsin H复合物(CST1-CTSH复合物)的定量检测剂在制备用于食管癌的诊断、辅助诊断或预后分析的试剂盒中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述定量检测剂为所述半胱氨酸蛋白酶抑制剂SN以及所述Cathepsin H的特异性抗体，所述抗体可用于执行免疫共沉淀或酶联免疫吸附试验以对所述CST1-CTSH复合物。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述定量检测剂为所述CST1-CTSH复合物的特异性抗体。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述特异性抗体为单克隆抗体或多克隆抗体。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述特异性抗体...

【专利技术属性】
技术研发人员：王力军，孙玉龙，杨亚云，王弢，
申请(专利权)人：上海良润生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：