细胞培养用片制造技术

一种细胞培养用片，其具有多个开口部的口径为直径1000μm以下的凹部，该凹部的内侧面具有细胞非粘附性表面，并且该凹部的底面具有细胞粘附性表面；以及一种细胞培养用片的制造方法，其中，将具有多个直径1000μm以下的贯通孔的具有细胞非粘附性表面的层和具有细胞粘附性表面的层进行层叠。本发明专利技术的细胞培养片能够简便地制备，并且细胞培养的操作本身也能够高效地进行，因此能够适合用于例如含球状体的制剂等细胞制剂的领域。制剂等细胞制剂的领域。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】细胞培养用片


[0001]本专利技术涉及细胞培养用片。更详细而言，本专利技术涉及细胞培养用片及其制造方法、包含该片的细胞培养用器具、以及使用上述片或器具的球状体的制造方法。

技术介绍

[0002]在细胞培养中，从能够进一步模仿生物组织等观点出发，近年来对培养细胞进行三维培养的技术受到关注。
[0003]例如，专利文献1中记载了：通过在具有多个细胞保持腔的微芯片中使该腔的底面包含显示细胞粘附性的粘附性区域和围绕该粘附性区域且显示细胞非粘附性的非粘附性区域，能够形成形状和尺寸均匀的细胞组织体。另外，专利文献2中公开了在具有贯通孔的多孔膜上对细胞进行培养的方法，并公开了下述方法：该多孔膜表面由细胞粘附性区域和细胞非粘附性区域构成，在顺畅地进行新鲜培养液的供给和代谢物的排出的同时，高效地对三维组织体进行培养。
[0004]现有技术文献
[0005]专利文献
[0006]专利文献1：日本特开2006-121991号公报
[0007]专利文献2：日本特开2008-199962号公报

技术实现思路

[0008]专利技术所要解决的问题
[0009]但是，现有技术的方法中，细胞培养用器具的制备繁杂、或者所得到的细胞组织体的均匀性尚不充分，期望更好的技术。
[0010]本专利技术的目的在于提供新型的细胞培养用片。
[0011]本专利技术的目的在于提供能够简便地制备、并且还能够高效地进行细胞培养的细胞培养用片及其制造方法、包含该片的细胞培养用器具、以及使用上述片或器具的球状体的制造方法。
[0012]用于解决问题的方法
[0013]本专利技术人为了实现上述目的进行了深入研究，结果发现，通过以特定的表面形成细胞培养面，不仅细胞培养片的制备变得简便，而且培养基更换、细胞接种这样的细胞培养的操作本身也变得容易，另外，所得到的细胞聚集块(球状体)的均匀性提高，从而完成了本专利技术。
[0014]即，本专利技术涉及下述[1]～[10]。
[0015][1]一种细胞培养用片，其具有多个开口部的口径为直径1000μm以下的凹部，该凹部的内侧面具有细胞非粘附性表面，并且该凹部的底面具有细胞粘附性表面。
[0016][2]如上述[1]所述的细胞培养用片，其为具有贯通孔的具有细胞非粘附性表面的层与具有细胞粘附性表面的层的层叠物。
[0017][3]如上述[2]所述的细胞培养用片，其中，在具有细胞非粘附性表面的层与具有细胞粘附性表面的层之间进一步包含粘接层。
[0018][4]如上述[1]～[3]中任一项所述的细胞培养用片，其中，细胞粘附性表面由合成树脂构成。
[0019][5]如上述[1]～[4]中任一项所述的细胞培养用片，其中，细胞粘附性表面由包含聚酰亚胺的树脂组合物构成。
[0020][6]如上述[1]～[5]中任一项所述的细胞培养用片，其中，凹部朝向底面侧形成为锥状。
[0021][7]如上述[1]～[6]中任一项所述的细胞培养用片，其中，凹部以每单位面积(cm2)10～1000个的个数形成。
[0022][8]一种细胞培养用片的制造方法，其中，将具有多个直径1000μm以下的贯通孔的具有细胞非粘附性表面的层和具有细胞粘附性表面的层进行层叠。
[0023][9]一种细胞培养用器具，其包含上述[1]～[7]中任一项所述的细胞培养用片。
[0024][10]一种球状体的培养方法，其中，利用上述[1]～[7]、[9]中任一项所述的细胞培养用片或细胞培养用器具进行培养。
[0025]专利技术效果
[0026]本专利技术的细胞培养片能够简便地制备，并且细胞培养的操作本身也能够高效地进行。
[0027]另外，通过使用本专利技术的细胞培养片，能够发挥下述优良的效果：所得到的细胞聚集块(球状体)的均匀性提高，进而细胞的品质管理变得容易。
附图说明
[0028]图1是关于本专利技术的细胞培养用片的一个方式示意性地示出片截面结构的图。
[0029]图2是关于本专利技术的细胞培养用片的一个方式示意性地示出片截面结构的图。
[0030]图3是关于本专利技术的细胞培养用片的一个方式示意性地示出片截面结构的图。
[0031]图4是示意性地示出在本专利技术的细胞培养用片中对细胞进行培养的一个方式的图。
[0032]图5是示意性地示出在本专利技术的细胞培养用片中对细胞进行培养的一个方式的图。
[0033]图6是关于本专利技术的细胞培养用片的一个方式示意性地示出片截面结构的图。
[0034]图7是示出使用本专利技术的细胞培养用片得到的球状体的照片的图。
[0035]图8是示出使用本专利技术的细胞培养用片得到的球状体的流体直径的图。
[0036]图9是示出使用本专利技术的细胞培养用片得到的球状体的等效圆直径的图。
[0037]图10是示出使用本专利技术的细胞培养用片得到的球状体的圆形度的图。
[0038]图11是示出试验例2和3中使用的细胞培养用片的分区的图。
[0039]图12是示出使用本专利技术的细胞培养用片得到的球状体的各地点的等效圆直径的图。
[0040]图13是示出使用本专利技术的细胞培养用片得到的球状体的各地点的等效圆直径的图。
[0041]图14是示出使用实施例2～5的细胞培养用片得到的球状体的照片的图。
具体实施方式
[0042]本专利技术的细胞培养用片具有多个开口部的口径为直径1000μm以下的凹部，该凹部的内侧面具有细胞非粘附性表面，并且该凹部的底面具有细胞粘附性表面。在此，使用沿着垂直于凹部的方向切断的片截面图的一例对本专利技术的细胞培养用片的结构进行说明。如图1的示意图所示，在片表面12存在多个凹部11，凹部11由内侧面11a和底面11b构成，在凹部11内形成细胞组织体(球状体)。
[0043]本专利技术的细胞培养用片在片表面具有多个凹部。例如，在图1中，在片表面12存在多个凹部11。凹部的个数根据片面积、所培养的细胞的种类等而不能一概地设定，可以按照有关技术常识适当设定。例如，每单位面积(cm2)的下限个数可以设定为1个，可以例示10个、20个、30个、50个等，上限个数可以例示1000个、500个、300个、200个、100个等。另外，片表面上的凹部的总数例如可以适当设定为10个以上、100个以上、1000个以上、10000个以上、50000个以上等。
[0044]凹部的开口部的形状不限于圆形，例如可以为多边形、椭圆。开口部的口径只要为直径1000μm以下即可，可以根据所培养的细胞的尺寸而按照有关技术常识适当设定。本专利技术中，口径是指无论对象部位的形状如何均以包接对象部位的方式形成的圆的直径(最大长度)，例如，在图1中，开口部的口径为D(11)所示的长度。作为开口部的口径，可以例示例如10～1000μm、10～700μm、10～600μm、10～500μm的范围内。
[0045]凹部的底面的形状不限于圆形，例如可以为多边形、椭圆，可以本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种细胞培养用片，其具有多个开口部的口径为直径1000μm以下的凹部，该凹部的内侧面具有细胞非粘附性表面，并且该凹部的底面具有细胞粘附性表面。2.如权利要求1所述的细胞培养用片，其为具有贯通孔的具有细胞非粘附性表面的层与具有细胞粘附性表面的层的层叠物。3.如权利要求2所述的细胞培养用片，其中，在具有细胞非粘附性表面的层与具有细胞粘附性表面的层之间进一步包含粘接层。4.如权利要求1～3中任一项所述的细胞培养用片，其中，细胞粘附性表面由合成树脂构成。5.如权利要求1～4中任一项所述的细胞培养用片，其中，细胞粘附性表面由包含聚酰亚胺...

【专利技术属性】
技术研发人员：牧野朋未，岛史明，中泽浩二，
申请(专利权)人：株式会社日本触媒，
类型：发明
国别省市：