HIF-1α蛋白抑制剂在制备预防和/或治疗新型冠状病毒感染的药物中的应用制造技术

本发明专利技术提供HIF

【技术实现步骤摘要】
HIF-1
α
蛋白抑制剂在制备预防和/或治疗新型冠状病毒感染的药物中的应用


[0001]本专利技术属于药物制备
，具体涉及HIF-1α蛋白抑制剂在制备预防和/或治疗新型冠状病毒感染的药物中的应用。

技术介绍

[0002]临床治疗COVID-19主要是对症给药，包括抗炎，抗感染药物的使用以降低患者炎症风暴，同时给予辅助治疗，包括吸氧等。因此，了解病毒感染的发病机制是迫切需要的。以前的研究报道细胞因子风暴是新冠患者的一个主要特征
[1]。据报道，代谢途径在COVID-19患者中起着重要作用，尤其是葡萄糖代谢
[2]，但与SARS-CoV-2感染有关的详细代谢途径仍不清楚。
[0003]1.Shereen,M.A.,Khan,S.,Kazmi,A.,Bashir,N.&Siddique,R. COVID-19infection:origin,transmission,and characteristics of human coronaviruses.J.Adv.Res.(2020).
[0004]2.Zhu,L.et al.Association of blood glucose control and outcomes in patients with COVID-19and pre-existing type 2diabetes.Cell Metab.(2020).

技术实现思路

[0005]有鉴于此，本专利技术的目的在于提供HIF-1α蛋白抑制剂在制备预防和/ 或治疗新型冠状病毒感染的药物中的应用，基于BAY87-2243对新的抗病毒靶点HIF-1a的抑制作用，从而显著抑制SARS-CoV-2复制，并抑制病毒诱导的炎症风暴，且BAY87-2243无细胞毒性，有效浓度较低，有很好的成药性，具有重大生理学意义以及药用价值。
[0006]为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
[0007]本专利技术提供了HIF-1α蛋白抑制剂在制备预防和/或治疗新型冠状病毒感染的药物中的应用。
[0008]优选的，所述HIF-1α蛋白抑制剂包括BAY87-2243。
[0009]本专利技术还提供了一种预防和/或治疗新型冠状病毒感染的药物，所述药物的有效成分包括BAY87-2243。
[0010]本专利技术还提供了一种抑制新型冠状病毒复制的试剂，所述试剂的有效成分包括BAY87-2243。
[0011]本专利技术还提供了一种抑制新型冠状病毒感染细胞的免疫炎症反应的试剂，所述试剂的有效成分包括BAY87-2243。
[0012]本专利技术提供HIF-1α蛋白抑制剂在制备预防和/或治疗新型冠状病毒感染的药物中的应用，通过系统性筛选，发现HIF-1α的表达在患者的血液标本中高度表达，证明该蛋白是潜在的抗病毒靶点。且HIF-1α水平在老年患者中显著高于年轻患者，这可能导致老年患者加速死亡。而且BAY87-2243 具有显著抑制HIF-1a通路的功能，同样的，BAY87-2243可以显
著抑制 SARS-CoV-2复制，并抑制病毒诱导的免疫反应，从而降低细胞损伤，达到抗病毒以及抗炎的效果，且BAY87-2243无细胞毒性，有效浓度较低，有很好的成药性。
附图说明
[0013]图1为抗病毒靶点的筛选图，其中a表示从实验设计到功能组和路径识别的基本流程图；b表示COVID-19患者和健康人(模拟组)血液标本中可区分mRNA表达谱的聚类热图，绿色代表上调，红色代表下调，黑色代表无关紧要的基因；c表示用直方图描述DEGs基因本体的富集，分为三类(同上)，X轴显示各种基因功能，Y轴表示基因数量；d为点图显示浓缩分数值， X轴表示DEGs数目的比值，Y轴表示基因功能，点的大小显示基因数，而
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log10-P值则由颜色分类来描述；e表示所涉及的途径浓缩列表(前20名)；浓缩分数以c为基础；f以点图表示DEGs as d的路径富集分数，低p值用红色表示，高p值用绿色表示；-log10-P-值小于0.05的路径显著富集；斑点的大小反映了DEGs的数量，斑点的颜色对应于不同的p值范围；
[0014]图2为小分子药物细胞毒性及有效浓度表征，其中a表示CoCl2处理Hela 细胞4h，BAY87-2243处理6h，WB法检测HIF-1α蛋白水平；b表示用poly (I:C)处理Hela细胞，然后用BAY87-2243处理，用WB法分析HIF-1α蛋白水平；c表示用不同浓度的BAY87-2243处理Hela细胞，用细胞计数试剂盒8 测定细胞活力；d表示用poly(I:C)处理Caco2细胞，然后用BAY87-2243处理，用WB法分析HIF-1α蛋白水平；e表示用BAY87-2243处理不同浓度的Caco2细胞，用细胞计数试剂盒8测定细胞活力；
[0015]图3为小分子药物抗新冠病毒感染及炎症分析，a表示用CoCl2和 BAY87-2243处理Caco2细胞，然后用SARS-CoV-2感染24h，检测HIF-1α和GAPDH蛋白；b和c表示用CoCl2处理的Caco2细胞感染SARS-CoV-2 24和 48h，用RT-PCR方法检测SARS-CoV-2 N基因和ORF1a的mRNA水平；d和e表示在感染SARS-CoV-2后，用BAY87-2243处理Caco2细胞，RT-PCR检测 SARS-CoV-2 N基因和ORF1a mRNAs；f表示BAY87-2243或CoCl2处理的 Caco2细胞感染SARS-CoV-2，用WB法检测SARS-CoV-2 N基因的蛋白水平； g表示BAY87-2243处理Caco2细胞后感染SARS-CoV-2 48h，细胞图像显示细胞毒性；h至j表示CoCl2处理的Caco2细胞感染SARS-CoV-2的指定时间显示IL-1b、IL-6和IFN-b的mRNA水平；k至m表示Caco2细胞经BAY87-2243 处理，然后感染SARS-CoV-2 24和48h，通过RT-PCR分析IL-1b、IL-6和IFN-b 的mRNA水平；n表示通过ELISA分析IL-6的蛋白水平。
具体实施方式
[0016]本专利技术提供了HIF-1α蛋白抑制剂在制备预防和/或治疗新型冠状病毒感染的药物中的应用。
[0017]本专利技术通过系统性筛选，发现SARS-CoV-2感染与COVID-19患者血液样本中HIF-1α、免疫和代谢途径高度相关，证明HIF-1α是一个潜在的抗病毒靶标；且在感染SARS-CoV-2的Caco2细胞中：(1)CoCl2促进HIF-1α蛋白，但被BAY87-2243减弱；(2)CoCl2增强了SARS-CoV-2 N和ORF1a mRNAs 水平，但被BAY87-2243抑制；SARS-CoV-2 N蛋白被CoCl2上调，但被 BAY87-2243下调。因此，BAY87-2243显著降低了SARS-CoV-2感染的Caco2 细胞的细胞毒性。上述结果表明，诱导HIF-本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.HIF-1α蛋白抑制剂在制备预防和/或治疗新型冠状病毒感染的药物中的应用。2.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述HIF-1α蛋白抑制剂包括BAY87-2243。3.一种预防和/或治疗新型冠状病毒感染的药物，其特征在于，所述药物的有效成...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴建国，田明富，刘为勇，邬开朗，谭秋萍，
申请(专利权)人：广东龙帆生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：