SCTAG在制备诊断胃癌的试剂盒的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种诊断胃癌的试剂盒，它包括：抗SCTAG蛋白的抗体，它的质控标准品为SCTAG蛋白，所述的一种诊断胃癌的试剂盒为ELISA试剂盒。利用该试剂盒血清SCTAG蛋白在胃腺癌患者诊断的阳性率可高达93.5％，早期胃癌患者诊断的阳性率为96.3%。本发明专利技术还公开了一种诊断胃癌的免疫组化试剂盒，它的一抗为抗SCTAG蛋白的抗体，该试剂盒具有着良好的灵敏性与特异性。性与特异性。

【技术实现步骤摘要】
SCTAG在制备诊断胃癌的试剂盒的应用


[0001]本专利技术属于生物医学
，具体涉及SCTAG在制备诊断胃癌的试剂盒的应用。

技术介绍

[0002]胃癌是全球最主要的癌症之一，全球每年有超过1,000,000例新发病例、约783,000例因胃癌而死亡。胃癌的早期发病症状极为隐匿，而且缺乏对早期胃癌诊断有效，可靠的检测手段，导致患者被确诊时多已发展至进展期，从而失去了最佳的治疗机会，严重降低患者的总生存期。而血清肿瘤标志物的检测是目前无症状微肿瘤早期检测的唯一途径。因此，寻找灵敏度高，特异性强的肿瘤标志物是提高早期胃癌诊断的重要方法。
[0003]癌症/睾丸抗原（Cancer/Testis Antigen，CTA）是肿瘤相关抗原之一，生理状态下仅存在于正常男性机体的睾丸组织中，但却能够在肿瘤组织中特异性表达。这种特殊的表达模式让CTA具有肿瘤表达特异性和高免疫原性的特点。近几年研究表明CTA还发挥着促进肿瘤增殖、侵袭与转移等积极作用。总之，CTA分子的发现为肿瘤诊断和免疫治疗领域的进一步研究和临床发展提供了前所未有的机遇。CTA在大部分类型的肿瘤中均有表达，但不同种类的CTA在不同的肿瘤类型之间的表达差异很大。CT-X抗原更倾向于在膀胱癌、肺癌、卵巢癌和黑色素瘤组织中表达。然而胃、结直肠癌被认为是CTA表达“贫穷”的癌症类型。胃癌特异性肿瘤标志物包括：血清胃蛋白酶原（PG）、胃泌素（G）、胃肿瘤组织标志物、表皮生长因子受体（EGFR）、TP53基因与p53抗体、间质上皮细胞转化因子（EMT）、微卫星不稳定（MSI）等；新型胃肿瘤标志物包括：微核糖核酸(microRNA/miR/miRNA）、长链非编码RNA（lncRNA）、基质金属蛋白酶（MMP）等；CTA在胃癌相对如此低频率的表达也导致CTA在胃癌的临床应用中受到了阻碍，仍需要大量的研究工作去挖掘在胃癌患者中高表达的CTA。
[0004]SCTAG（super-sensitive Cancer/Testis Antigenfor Gutdiagnosis）是一种新型的CTA，生理状态下是男性精子中最丰富的核蛋白，发挥调控精子染色质浓缩和转录终止等功能。

技术实现思路

[0005]本专利技术目的是为解决目前的肿瘤标志物检测阳性率低，作为胃癌筛查手段容易漏诊的问题，而提供的一种SCTAG在制备诊断胃癌的试剂盒的应用。
[0006]一种诊断胃癌的试剂盒，它包括：抗SCTAG蛋白的抗体；所述的一种诊断胃癌的试剂盒，它的质控标准品为SCTAG蛋白；所述的一种诊断胃癌的试剂盒为ELISA试剂盒。
[0007]一种诊断胃癌的试剂盒，它包括：与SCTAG基因匹配的PCR引物；所述的PCR为RT-PCR、qRT-PCR或real-timePCR；所述的引物为：5
’-
AGAGCCGAGCAGATATTACC-3
’5’-
TCTACATCGCGTCTGTACCT-3
’
；
所述的一种诊断胃癌的试剂盒，还包括内参引物：5
’-
CCACCCAGAAGACTGTGGAT-3
’5’-
TTCTAGACGGCAGGTCAGGT-3
’
。
[0008]一种诊断胃癌的免疫组化试剂盒，它的一抗为抗SCTAG蛋白的抗体。
[0009]本专利技术提供了一种诊断胃癌的试剂盒，它包括：抗SCTAG蛋白的抗体，它的质控标准品为SCTAG蛋白，所述的一种诊断胃癌的试剂盒为ELISA试剂盒。利用该试剂盒血清SCTAG蛋白在胃腺癌患者诊断的阳性率可高达93.5％，早期胃癌患者诊断的阳性率为96.3%。本专利技术还提供了一种诊断胃癌的免疫组化试剂盒，它的一抗为抗SCTAG蛋白的抗体，该试剂盒具有着良好的灵敏性与特异性。
附图说明
[0010]图1 胃癌，癌旁，正常组织SCTAG基因与内参基因GAPDH的PCR反应溶解曲线；图2 DNA琼脂糖凝胶电泳分析结果；g：内参GAPDH，1：1号患者；2：2号患者；3：3号患者；a：胃癌组织SCTAG-mRNA的表达；b：胃癌旁组织SCTAG-mRNA的表达；c：胃正常组织SCTAG-mRNA的表达；图3 SCTAG mRNA表达阳性率的分布；（T）胃腺癌患者的癌组织，（P）癌旁组织，（N）正常组织；图4 胃腺癌患者的癌组织，癌旁组织和正常组织中SCTAG mRNA表达含量的比较；图5 SCTAG mRNA在健康人睾丸组织中表达结果；M=DNA分子标记;a= SCTAG mRNA, b=内参。1=睾丸；2=胎盘；3=心脏；4=脑；5=甲状腺；6=气管；7=涎腺；8=胎脑；9=子宫；10=结肠；11=胃；12=脾脏；13=小肠；14=骨髓；图6 标准品倍比稀释流程示意图；图7 胃腺癌患者血清中SCTAG物蛋白浓度与临床病理特征之间的关系；（A）胃腺癌患者中的SCTAG蛋白浓度明显高于健康对照组；胃腺癌患者血清中SCTAG蛋白浓度与各个临床变量之间的关系：（B）年龄；（C）细胞分化程度；（D）侵袭深度（T）；（E）淋巴结转移（N）；（F）临床分期（TNM）；（G）肿瘤大小；（H）脉管受侵；（I）神经受侵；图8 胃腺癌患者血清中SCTAG蛋白浓度与组织胃肿瘤标志物之间的关系：（A）EGFR；（B）P53；（C）HER-2；（D）ki67之间的关系；图9 血清SCTAG蛋白对胃腺癌诊断能力的评估。（A）血清SCTAG蛋白在胃腺癌总体患者中的诊断能力；血清SCTAG蛋白分别在临床Ⅰ期（B），临床Ⅱ期（C）与临床
Ⅲ-Ⅳ
期（D）胃腺癌患者中的诊断能力（AUC：曲线下的面积）；图10 男性和女性血清中SCTAG蛋白水平以及血清SCTAG蛋白对男性与女性患者诊断能力的比较；图11 临床血清肿瘤标志物对胃腺癌诊断能力的分析；（A）CEA；（B）CA724；（C）CA199；（D）CA242；（E）CA50；（F）AFP；（G）胃癌三项CEA，CA724和CA199；（H）胃癌四项CEA，CA724，CA199和CA242；（I）消化道肿瘤六项CEA，CA724，CA199，CA242，CA50和AFP；图12 术后血清SCTAG蛋白浓度变化；图13 免疫组化检测SCTAG蛋白在胃癌组织中的表达（A）胃腺癌中抗SCTAG阴性对照；（B）正常胃组织SCTAG无表达；（C）胃非典型增生组织中SCTAG弱阳性；（D-F）胃腺癌高、中、低
分化腺癌抗SCTAG强阳性。
具体实施方式
[0011]实施例1 胃腺癌组织总mRNA提取和转录一、组织样本的收集从吉林大学中日联谊医院组织标本库挑选胃腺癌组织及其对应的癌旁组织和正常组织，以用于提取组织中mRNA。（癌旁组织取自于胃癌边缘1.5cm以外的部分，正常组织取自于胃癌边缘5cm以外的部分）。同时挑选出胃腺癌组织的病理蜡块，以用于切片免疫组织化学染色实验；共收集到48例胃腺癌患者的组织（包括：癌组织、癌旁组织和正常组）。
[0012]二、胃腺癌组织总mRNA提本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种诊断胃癌的试剂盒，它包括：抗SCTAG蛋白抗体。2.根据权利要求1所述的一种诊断胃癌的试剂盒，其特征在于：它的质控标准品为SCTAG蛋白。3.根据权利要求1或2所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈芳芳，
申请(专利权)人：吉林大学，
类型：发明
国别省市：