抗体制造技术

本公开内容涉及抗CSF

【技术实现步骤摘要】
抗体
[0001]本申请是CN201480057403.8的分案申请。


[0002]本专利技术涉及抗CSF-1R抗体及其结合片段，编码抗CSF-1R抗体及其结合片段的DNA，包含所述DNA的宿主细胞以及在宿主细胞中表达所述抗体或结合片段的方法。本专利技术还扩展至包含所述抗体或其结合片段的药物组合物，以及所述抗体、结合片段和包含所述抗体、结合片段的组合物在治疗中的用途。

技术介绍

[0003]集落刺激因子1(CSF-1)(也被称为巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF))是由各种细胞(包括巨噬细胞、内皮细胞和成纤维细胞)产生的细胞因子。CSF-1包含两个“单体”多肽，这两个“单体”多肽形成生物学活性的二聚体CSF-1蛋白。由于RNA选择性剪接，CSF-1至少以三种成熟形式存在(参见Cerretti等人,1988,Molecular Immunology,25:761)。这三种形式的CSF-1翻译自不同rnRNA前体，其编码256至554个氨基酸的多肽单体，具有氨基端的32个氨基酸的信号序列和近羧基端的大约23个氨基酸的推定跨膜区。随后，前体肽通过氨基端和羧基端蛋白水解切割进行加工以释放成熟CSF-1。所有三种成熟形式的CSF-1的残基1-149是相同的且据信包含对于CSF-1的生物活性必需的序列。在体内，CSF-1单体是糖基化的，并通过二硫键发生二聚化。CSF-1属于一组生物学激动剂，其促进血细胞的产生。具体地，它用作单核吞噬细胞谱系的骨髓祖细胞的生长和分化因子。此外，CSF-1通过应答细胞上的特异性受体刺激巨噬细胞的存活、增殖和功能。
[0004]CSF-1受体(CSF-1R)也被称为c-fms基因产物或CD115。CSF-1R是165kDa的1型TM糖蛋白，其属于III型受体酪氨酸激酶家族。还已经显示，除了CSF-1之外，结构上相似但序列不相关的分子IL-34也是针对CSF-1R的配体(Lin等人，2008,Science 320:807-811)。CSF-1R的表达局限于单核细胞-巨噬细胞谱系(循环和驻留组织的群体)的细胞以及破骨细胞。此外，它表达于雌性生殖系统的许多细胞，包括卵母细胞、蜕膜细胞和滋养层细胞。
[0005]配体CSF-1与CSF-1受体的结合通过酪氨酸激酶结构域的作用导致受体在一个或多个酪氨酸残基上发生磷酸化。因为可以获得只结合磷酸化之后的受体的抗体，所以可以检测到这种磷酸化(例如来自Cell Signaling Technology的Phospho-M-CSF-Receptor(Tyr546)抗体#3083)。
[0006]CSF-1和CSF-1R的表达与许多癌症类型中的肿瘤进展和不良诊断相关联。肿瘤相关巨噬细胞(TAM)可以是肿瘤基质的主要组分并且CSF-1和CSF-1R的高水平与许多肿瘤类型中的高TAM浸润和不良预后相关。
[0007]抗CSF-1R的抗体是本领域已知的。Sherr,C.J.等人,1989,Blood 73:1786-1793描述了抑制CSF-1活性的抗CSF-1R的抗体(Sherr,C.J.等人,1989,Blood 73:1786-1793)。WO2009/026303公开了结合人CSF-1R的抗CSF-1R抗体和使用抗鼠CSF-1R抗体的体内小鼠肿瘤模型。WO2011/123381公开了内化CSF-1R并具有ADCC活性的抗CSF-1R抗体。WO2011/
123381还公开了使用抗鼠CSF-1R抗体的体内小鼠肿瘤模型。WO2011/140249公开了阻断CSF-1与CSF-1R的结合的抗CSF-1R抗体，其被认为在治疗癌症中是有用的。WO2009/112245公开了抑制CSF-1结合CSF-1R的抗CSF-1R IgG1抗体，其被认为在治疗癌症、炎性肠病和类风湿性关节炎中是有用的。WO2011/131407公开了抑制CSF-1结合CSF-1R的抗CSF-1R抗体，其被认为在治疗骨丢失和癌症中是有用的。WO2011/107553公开了抑制CSF-1结合CSF-1R的抗CSF-1R抗体，其被认为在治疗骨丢失和癌症中是有用的。WO2011/070024公开了结合人CSF-1R片段delD4的抗CSF-1R抗体。
[0008]在本领域中存在提供适合用于治疗应用的新型抗CSF-1R抗体的需要。虽然先前已描述了抗CSF-1R抗体在治疗某些癌症中的治疗应用，但仍然存在提供这样的抗体的新型治疗应用的需要。
[0009]术语“纤维化疾病”是指异常伤口愈合反应，其中在器官或组织中形成过量的纤维结缔组织。过量的细胞外基质成分(诸如胶原和纤连蛋白)的沉积和累积导致组织的硬化和结疤，这最终可导致器官衰竭。
[0010]纤维化疾病的实例包括肺纤维化诸如特发性肺纤维化和囊性纤维化、肾纤维化、肝纤维化、肝硬化、原发性硬化性胆管炎、原发性胆汁性肝硬化、心内膜心肌纤维化、纵隔纤维化、骨髓纤维化、腹膜后腔纤维化、进行性大块纤维化、肾源性系统性纤维化、克罗恩病、瘢痕疙瘩、心肌梗死、系统性硬化病、硬皮病以及关节纤维化。
[0011]创伤导致随着临时细胞外基质(ECM)的发展立即的凝固和凝血反应。血小板聚集和活化帮助促进特征在于血管舒张和血管通透性增加的炎性反应，从而募集各种免疫细胞(包括中性粒细胞、巨噬细胞、嗜酸性粒细胞和淋巴细胞)。中性粒细胞和巨噬细胞对伤口进行清创，从而降低感染风险，并与活化的淋巴细胞一起分泌用于进一步放大炎性反应的各种生长因子和细胞因子。诸如TGFβ、PDGF、IL-13的分子活化巨噬细胞并导致成纤维细胞在伤口部位的募集、增殖和活化。活化的成纤维细胞或肌成纤维细胞的特征在于表达α-平滑肌肌动蛋白和分泌胶原以及其它ECM成分。活化的成纤维细胞收缩胶原晶格(collagen lattice)，从而将伤口的边缘拉向中心。表皮和内皮细胞增殖并在临时基质上迁移以再生损伤的组织，从而完成伤口修复。
[0012]持续的组织伤害或损伤，或者修复途径的失调导致不适当的伤口反应。胶原和ECM的过量沉积和高度交联发生，从而导致代替正常组织结构的瘢痕组织的过度形成和硬化。
[0013]纤维化疾病的病因可以取决于所涉及的器官或组织并且在一些疾病(诸如特发性肺纤维化(IPF))中是未知的。肝纤维化和最终的肝硬化源自通过暴露于各种因素包括环境因素和饮食因素或感染原的持续慢性肝损伤。长期乙型肝炎或丙型肝炎感染可以导致肝纤维化。持续过度食用酒精或高脂/糖饮食也可以导致肝脏的硬化。类似地，糖尿病可能损伤肾脏并留下疤痕，导致功能丧失。
[0014]IPF为病因未知的七种间质性肺疾病之一。环境因素诸如辐射暴露或粒子可能发挥着作用。吸烟的受试者也处于患该疾病的较高风险。在诊断后，患者的寿命极短，平均存活率为2-5年。
[0015]纤维化疾病的治疗通常包括抗炎和免疫抑制剂，但是这些对患者益处较少。这些治疗的效力的缺乏使得通常将IPF和纤维化疾病重新考虑为对伤口愈合的异常应答而不是炎性病况。吡非尼酮是2008年在日本和2011年在欧洲被批准用于治疗IPF的小分子药本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗CSF-1R抗体，其包含重链和轻链，其中所述重链的可变结构域包含以SEQ ID NO：23所示的序列，并且其中所述轻链的可变结构域包含以SEQ ID NO：15所示的序列。2.根据权利要求1所述的抗CSF-1R抗体，其中所述抗体分子选自具有全长重链和轻链的完整抗体分子或其片段，例如选自包含Fab、经修饰的Fab
’
、Fab
’
、F(ab
’
)2、Fv以及scFv片段的群组。3.根据权利要求1或权利要求2所述的抗CSF-1R抗体，其中所述重链进一步包含重链恒定结构域，并且所述轻链进一步包含轻链恒定结构域。4.根据权利要求1或权利要求3所述的抗CSF-1R抗体，其具有包含以SEQ ID NO：27所示的序列的重链和包含以SEQ ID NO：19所示的序列的轻链，其中所述抗体重链的C-末端赖氨酸是存在的或是不存在的。5.根据权利要求1至4中任一项所述的抗CSF-1R抗体，其具有与其连接的效应分子或报...

【专利技术属性】
技术研发人员：G，
申请(专利权)人：UCB生物制药私人有限公司，
类型：发明
国别省市：