包含含有双链聚核糖核苷酸与聚亚烷基亚胺的复合物的粒子的医药组合物制造技术

本发明专利技术涉及包含含有双链聚核糖核苷酸与聚亚烷基亚胺的复合物的粒子的医药组合物。所述组合物包含粒子，所述粒子中的每一个包含至少一条双链聚核糖核苷酸，如聚肌苷酸

【技术实现步骤摘要】
包含含有双链聚核糖核苷酸与聚亚烷基亚胺的复合物的粒子的医药组合物
[0001]本申请是2016年11月17日提交的申请号为2016800495213的专利申请(名称为《包含含有双链聚核糖核苷酸与聚亚烷基亚胺的复合物的粒子的新颖医药组合物》)的分案。


[0002]本专利技术涉及包含通过聚核糖核苷酸和聚合物形成的粒子的医药调配物领域，其生产和其医学用途。

技术介绍

[0003]近年来已研究使用模拟病毒dsRNA的双链RNA(dsRNA)的合成类似物用于特异性地激活针对肿瘤的免疫系统，其具有抑制癌细胞生长和诱导癌细胞细胞凋亡的范围。特定来说，双链聚肌苷酸-聚胞苷酸(成为poly(I:C)或pIC)已表征为一种以以下方式针对各种癌症(如黑素瘤、肝癌、结肠癌、胃癌和口癌瘤、宫颈癌、乳癌、卵巢癌、泌尿道肿瘤、肺癌和前列腺癌)和其癌转移的各种关注治疗性效果的dsRNA类型：可能与免疫系统激活、自然杀伤细胞和/或树突状细胞介导的激活和/或肿瘤基因表达与微环境的改变相关或无关的方式(Hafner A等人，2013)。
[0004]令人遗憾的是，这些初始临床前证据是不充分地，或未在用裸poly(I:C)分子的临床研究中确认，所述分子由于各种机制，如较差的细胞摄取或由胞质RNA酶降解，显示其较低稳定性、较差均质性、不可预测的药物动力学和受限抗肿瘤效果(Hafner A等人，2013)。实际上，为了实现有效治疗性或预防性效果，poly(I:C)分子可能需要在紧接着使用前或使用前不久再溶解，可以呈较低浓度的调配物获得，和/或频繁地给药(例如每2小时)。
[0005]在近几年中，在调配具有免疫调节和/或治疗性特性的poly(I:C)上已有显著进展。已公开将poly(I:C)分子制备和调配为粉末和/或结合在具有或不具有靶向部分和额外化学连接子的聚合物基微粒子内的各种方法(CN103599071；CN102988303；WO2004045491；WO2008057696；WO2013164380；WO2015067632；WO2014057432；WO2014165296；Schaffert D等人，2011；WO2015173824；Kabilova T等人，2014；Kubler K等人，2011；Palchetti S等人，2013；Saheki A等人，2011)。Poly(I:C)分子已用载剂聚合物调配，且调配呈可与鼻内给药相容的格式(WO2013164380)，用聚赖氨酸和羧甲基纤维素稳定(WO2005102278)，囊封在阳离子脂质包覆的磷酸钙纳米粒子、脂质体或其它囊状结构内(Chen L等人，2013；US2009117306；US2011003883，或与单链RNA和与阳离子肽，类似鱼精蛋白(WO2013087083)一起。替代地，poly(I:C)分子也已固定于具有或不具有将帮助靶向poly(I:C)分子到特定细胞或组织的药剂的固体粒子和载剂上，如氧化铁纳米粒子(McBain S等人，2007；Cobaleda-Siles M等人，2014)。
[0006]一些公开进一步公开各种在亚微米范围内的三元或四元复合物，所述复合物在具有或不具有其它组分和基因特异性的情况下通过聚合物、poly(I:C)和/或双链DNA形成(Kurosaki T等人，2009；WO2013040552；WO2013063019；Tutin-Moeavin I等人，2015)。
[0007]然而，这些方法的目标是提供基本上将DNA给药到细胞，同时维持其存活力，且不选择性杀伤癌细胞的药剂。
[0008]限制poly(I:C)分子作为药物的临床研究和其与调节要求的顺应性的缺陷可通过制造结构上复杂的包含poly(I:C)分子与癌症疗法用药物传递系统一起抗癌复合物克服，所述药物传递系统通常基于阳离子聚合物，如壳聚糖、聚乙烯亚胺(PEI)、聚L-赖氨酸、聚甲基丙烯酸酯、含咪唑聚合物或含环糊精聚合物、聚(β-氨基酯)和相关树枝状分子。这些聚合物系统(也称为聚合复合体)结构上和功能上不同于类似地用于局部或全身性递送核酸的脂质基系统(也称为脂复合体)和杂合系统(也称为脂聚合复合体)(Bilensoy E，2010；Germershaus O和Nultsch K，2015)。在聚合复合体中，PEI是可在直链/支化结构和大小、化学连接、可降解性和衍生作用的水平上改性(Islam M等人，2014)且不同于由细胞内化的脂复合体的备受关注的阳离子聚合物，其通过网格蛋白介导的和通过窖蛋白介导的胞吞作用两个内化(Shabani M等人，2010)。
[0009]涉及制备和给药与PEI结合的poly(I:C)分子的这种治疗性方法已示例在称为BO-110的药剂的文献中(Pozuelo-Rubio M等人，2014；Tormo D等人，2009；WO2011003883)。这种复合物，也鉴别为[plC]PEI
，不仅接合黑素瘤和其它肿瘤类型(如神经胶质瘤或癌瘤)的若干癌细胞系中的自噬和细胞凋亡的双诱导，且还对正常细胞，如黑色素细胞，的存活力无效果或限制其效果。BO-110在动物模型中抑制黑素瘤生长，表明在活体内，甚至在严重免疫功能不全的小鼠中的抗肿瘤和抗转移性活性。此外，类似物[pIC]PEI
基药剂刺激胰腺导管腺癌细胞中的细胞凋亡而不影响正常胰腺上皮细胞，且在活体内给药[pIC]PEI
抑制肿瘤动物模型中的肿瘤生长(Bhoopathi P等人，2014)。BO-110给药的其它效果在子宫内膜异位的模型中表征，其中这种药剂减少血管生成和细胞增殖且增加细胞凋亡(Garcia-Pascual C和Gomez R，2013)。
[0010]因此，BO-110和包含双链聚核糖核苷酸的类似物[pIC]PEI
药剂表示具有广谱作用的新颖抗癌策略，这是由于自主地和选择性地在肿瘤细胞中组合激活自噬和细胞凋亡，同时维持不同谱系的正常细胞的存活力。然而，BO-110，如当与载剂结合时已在各种临床前模型中证实效果的其它双链聚核糖核苷酸基药剂，仍需要以在不同存储条件下稳定，均一地制造和设定大小的调配物形式提供。
[0011]实际上，现有技术并不提供用于解决关于结构和生物物理准则的允许产生用于治疗癌症的含poly(I:C)组合物的最有效组合的问题的适当教示。管理机构也需要严格地顺应关于再现、存储和大小与浓度均一的包含于人类用组合物内的含poly(I:C)粒子的规范。因此，以较高和良好受控浓度提供双链聚核糖核苷酸分子，如poly(I:C)分子的药剂、组合物和相关方法仍需要其作为药物(特定来说针对癌症)的广泛临床前和临床研究，同时改进患者顺应性且降低给药具有明确界定安全性界限和治疗作用的双链聚核糖核苷酸分子的频率。

技术实现思路

[0012]本专利技术涉及一种组合物，包含粒子，其中
[0013](i)所述粒子中的每一个包含至少一条双链聚核糖核苷酸、或其盐或溶剂合物与至少一条聚亚烷基亚胺、或其盐和/或溶剂合物的复合物；
[001本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种包含粒子的水性组合物，其中：(i)所述粒子的每一个包含至少一条双链聚核糖核苷酸或其盐或溶剂合物与至少一条直链聚亚烷基亚胺或其盐和/或溶剂合物的复合物，其中(a)所述双链聚核糖核苷酸是聚肌苷酸-聚胞苷酸poly(I：C)，和(b)所述直链聚亚烷基亚胺的重均分子量在17kDa与23kDa之间，且分子量多分散指数<1.5；(ii)至少90％的所述粒子的单峰直径分布低于300nm；(iii)如根据ISO 22412：2008所测量的，所述粒子的z平均直径小于或等于150nm；以及(iv)根据ISO 13099-2：2012，所述组合物的ζ电位等于或大于30mV。2.根据权利要求1所述的组合物，其中至少90％的所述粒子的单峰直径分布在30nm至150nm之间。3.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其中：包含在所述粒子中至少40％的所述双链聚核糖核苷酸具有至少850个碱基对，以及包含在所述粒子中至少50％的所述双链聚核糖核苷酸具有400个与5000个之间的碱基对。4.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其中所述组合物的ζ电位在35mV至50mV之间。5.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其中：(i)5％与60％之间的双链聚核糖核苷酸具有小于400个碱基对；(ii)20％与45％之间的双链聚核糖核苷酸具有400与850个之间的碱基对；(iii)20％与70％之间的双链聚核糖核苷酸具有850与5000个之间的碱基对；和/或(iv)0％与10％之间的双链聚核糖核苷酸具有多于5000个碱基对...

【专利技术属性】
技术研发人员：M，
申请(专利权)人：亮点医疗有限责任公司，
类型：发明
国别省市：