一种供体试剂在诊断主体心肌损伤中的用途制造技术

本发明专利技术涉及一种供体试剂在制备用于体外诊断主体是否患有心肌损伤的方法所使用的试剂盒中的用途，其中所述方法包括：将来自主体的体液与受体试剂和供体试剂相接触，反应后生成待测混合物；用激发光至少一次激发所述待测混合物，检测由此产生的化学发光的信号强度；根据所述化学发光的信号强度定量计算所述体液中至少一种心肌标志物的浓度，从而判断主体是否患有心肌损伤；其中，所述供体试剂包含能够在激发状态下生成活性氧的供体颗粒，所述供体颗粒包括第一载体，所述第一载体的内部填充有敏化剂，所述第一载体的表面化学键合特异性结合配对成员中的一员。所述方法既有超高的灵敏度，又有很宽的检测量程。又有很宽的检测量程。又有很宽的检测量程。

【技术实现步骤摘要】
一种供体试剂在诊断主体心肌损伤中的用途


[0001]本专利技术属于化学发光分析领域，具体涉及一种供体试剂在诊断主体心肌损伤中的用途。

技术介绍

[0002]心血管疾病是危害人类健康及生命的严重疾病，已成为21世纪人类健康的头号杀手。其中，急性心肌梗死最常见、最危险。个人行为方式和生活习惯的转变，使中国人发生心血管疾病的风险迅速赶超美国等发达国家。
[0003]心血管检验是整个心血管领域中的“瓶颈”学科，因为只有在尽可能短的时间内正确诊断疾病，才能早发现、早治疗，最大程度防止致残、致死后果，改善患者预后和生活质量。近年来，对于心血管生物标志物的研究日益深入，积累了大量临床经验和证据，逐步明确了它们的临床适应症和新的研究领域，推动了他们的临床应用。生物标记物的检测可直接影响心血管疾病患者的临床诊断、危险分层、治疗方案选择和预后判断。心肌标志物全称为心脏损伤早期标志物，是指心脏损伤后6小时内血中水平升高的标志物，是临床中诊断心肌梗死、心肌缺血、心衰等心脏疾病的重要检测指标，主要包括心肌肌钙蛋白I(cTnⅠ)、肌红蛋白(MYO)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)和N末端脑钠肽前体(NT-proBNP)等。随着科技不断发展，血液中的心衰标志物检测被逐步应用于临床，给心血管疾病的早期诊断、预后转归提供了方法。例如：NT-proBNP是BNP激素原分裂后没有活性的N-末端片段，与BNP相比，半衰期更长，更稳定，其浓度可以反映短暂时间内新合成的而不是贮存的BNP释放，因此更能反映BNP通路的激活。血浆NT-proBNP水平随心衰程度加重而升高。在急性心衰的诊断中，NT-proBNP有着重要意义。
[0004]目前，以上标志物已经被医院广泛接受。也有多种单独检测上述指标的试剂盒面市。但是目前采取的主流方法是非均相的测定方法(例如ELISA和磁微粒化学发光法等)。虽然能够测定上述标志物，但是存在检测速度慢、检测灵敏度低、检测成本高等缺点。

技术实现思路

[0005]本专利技术所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供一种供体试剂在诊断主体心肌损伤中的用途，利用所述供体颗粒进行检测时，既有超高的灵敏度，又具有很宽的检测量程。
[0006]为此，本专利技术第一方面提供了一种供体试剂在制备用于体外诊断主体是否患有心肌损伤的方法所使用的试剂盒中的用途，其中所述方法包括：将来自主体的体液与受体试剂和供体试剂相接触，反应后生成待测混合物；用激发光至少一次激发所述待测混合物，检测由此产生的化学发光的信号强度；根据所述化学发光的信号强度定量计算所述体液中至少一种心肌标志物的浓度，从而判断主体是否患有心肌损伤；
[0007]其中，所述供体试剂包含能够在激发状态下生成活性氧的供体颗粒，所述供体颗粒包括第一载体，所述第一载体的内部填充有敏化剂，所述第一载体的表面化学键合特异
性结合配对成员中的一员；
[0008]所述心肌标志物选自肌钙蛋白T、肌钙蛋白I、肌钙蛋白激酶同工酶、肌红蛋白、白介素6和乳酸脱氢中的一种或多种。
[0009]在本专利技术的一些实施方式中，所述第一载体的表面没有包被或连接有多糖物质，其直接化学键合特异性结合配对成员中的一员。
[0010]在本专利技术的另一些实施方式中，所述第一载体的表面带有键合官能团，所述键合官能团用于将特异性结合配对成员中的一员化学键合在所述第一载体的表面。
[0011]在本专利技术的一些实施方式中，所述键合官能团选自胺基、酰胺基、羟基、醛基、羧基、马来酰亚胺基和巯基；优选选自醛基和/或羧基。
[0012]在本专利技术的一些实施方式中，所述第一载体表面的键合官能团的含量为100～500nmol/mg，优选为200～400nmol/mg。
[0013]在本专利技术的一些实施方式中，所述第一载体的表面包被至少两个连续多糖层的涂层，其中第一多糖层与第二多糖层自发关联。
[0014]在本专利技术的另一些实施方式中，所述连续多糖层中的每一层自发地与前一多糖层中的每一层相关联。
[0015]在本专利技术的一些实施方式中，所述多糖具有侧基官能团，所述连续多糖层的所述官能团与所述前一多糖层的所述官能团所带电荷相反。
[0016]在本专利技术的另一些实施方式中，所述多糖具有侧基官能团，并且所述连续多糖层通过所述官能团与所述前一多糖层的所述官能团之间的反应与所述前一多糖层共价连接。
[0017]在本专利技术的一些实施方式中，所述连续多糖层的所述官能团在胺官能团和胺反应性官能团之间交替。
[0018]在本专利技术的另一些实施方式中，所述胺反应性官能团是醛基或羧基。
[0019]在本专利技术的一些实施方式中，所述第一多糖层自发地与所述第一载体相关联。
[0020]在本专利技术的另一些实施方式中，所述涂层的最外一层多糖层具有至少一个侧基官能团。
[0021]在本专利技术的一些实施方式中，所述涂层的最外一层多糖层的侧基官能团选自醛基、羧基、巯基、氨基、羟基和马来胺基中的至少一种；优选选自醛基和/或羧基。
[0022]在本专利技术的另一些实施方式中，所述涂层的最外一层多糖层的侧基官能团直接地或间接地化学键合特异性结合配对成员中的一员结合。
[0023]在本专利技术的一些实施方式中，所述多糖选自含有三个或更多个未修饰或修饰的单糖单元的碳水化合物；优选选自葡聚糖、淀粉、糖原、菊粉、果聚糖、甘露聚糖、琼脂糖、半乳聚糖、羧基葡聚糖和氨基葡聚糖；更优选选自葡聚糖、淀粉、糖原和聚核糖。
[0024]在本专利技术的一些实施方式中，所述第一载体的粒径选自100～400nm，优选为150～350nm，更优选为180～220nm。
[0025]在本专利技术的另一些实施方式中，所述第一载体为磁性或非磁性的，优选为非磁性的。
[0026]在本专利技术的一些实施方式中，所述第一载体的形状选自带、片、棒、管、孔、微滴定板、珠子、粒子和微球；优选为微球。
[0027]在本专利技术的另一些实施方式中，所述第一载体的材质选自天然的、人工合成的或
改性天然存在的聚合物；优选为人工合成的聚合物。
[0028]在本专利技术的一些具体实施方式中，所述第一载体的材质选自琼脂糖、纤维素、硝化纤维素、醋酸纤维素、聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚乙烯、聚丙烯、聚(4-甲基丁烯)、聚丙烯酰胺、聚甲基丙烯酸酯、聚对苯二甲酸乙二醇酯、尼龙、聚丁酸乙烯或聚丙烯酸酯；优选选自聚苯乙烯、聚丙烯、聚(4-甲基丁烯)、聚丙烯酰胺、聚甲基丙烯酸酯、聚对苯二甲酸乙二醇酯或聚丙烯酸酯。
[0029]在本专利技术的一些实施方式中，所述第一载体为聚苯乙烯乳胶微球。
[0030]在本专利技术的另一些实施方式中，所述敏化剂是光活化的光敏剂和/或化学活化的引发剂，优选为光活化的光敏剂。
[0031]在本专利技术的一些实施方式中，所述敏化剂选自亚甲基蓝、玫瑰红、卟啉、酞菁和叶绿素。
[0032]在本专利技术的另一些实施方式中，所述特异性结合配对成员选自抗体、抗体片段、配体、寡核苷酸、寡核苷酸结合蛋白、凝集素、半抗原、抗原本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种供体试剂在制备用于体外诊断主体是否患有心肌损伤的方法所使用的试剂盒中的用途，其中所述方法包括：将来自主体的体液与受体试剂和供体试剂相接触，反应后生成待测混合物；用激发光至少一次激发所述待测混合物，检测由此产生的化学发光的信号强度；根据所述化学发光的信号强度定量计算所述体液中至少一种心肌标志物的浓度，从而判断主体是否患有心肌损伤；其中，所述供体试剂包含能够在激发状态下生成活性氧的供体颗粒，所述供体颗粒包括第一载体，所述第一载体的内部填充有敏化剂，所述第一载体的表面化学键合特异性结合配对成员中的一员；所述心肌标志物选自肌钙蛋白T、肌钙蛋白I、肌钙蛋白激酶同工酶、肌红蛋白、白介素6和乳酸脱氢中的一种或多种。2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述第一载体的表面没有包被或连接有多糖物质，其直接化学键合特异性结合配对成员中的一员。3.根据权利要求1或2所述的用途，其特征在于，所述第一载体的表面带有键合官能团，所述键合官能团用于将特异性结合配对成员中的一员化学键合在所述第一载体的表面。4.根据权利要求3所述的用途，其特征在于，所述键合官能团选自胺基、酰胺基、羟基、醛基、羧基、马来酰亚胺基和巯基；优选选自醛基和/或羧基。5.根据权利要求3或4所述的用途，其特征在于，所述第一载体表面的键合官能团的含量为100～500nmol/mg，优选为200～400nmol/mg。6.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述第一载体的表面包被至少两个连续多糖层的涂层，其中第一多糖层与第二多糖层自发关联。7.根据权利要求6所述的用途，其特征在于，所述连续多糖层中的每一层自发地与前一多糖层中的每一层相关联。8.根据权利要求6或7所述的用途，其特征在于，所述多糖具有侧基官能团，所述连续多糖层的所述官能团与所述前一多糖层的所述官能团所带电荷相反。9.根据权利要求6～8中任意一项所述的用途，其特征在于，所述多糖具有侧基官能团，并且所述连续多糖层通过所述官能团与所述前一多糖层的所述官能团之间的反应与所述前一多糖层共价连接。10.根据权利要求9所述的用途，其特征在于，所述连续多糖层的所述官能团在胺官能团和胺反应性官能团之间交替。11.根据权利要求10所述的用途，其特征在于，所述胺反应性官能团是醛基或羧基。12.根据权利要求6～11任意一项所述的用途，其特征在于，所述第一多糖层自发地与所述第一载体相关联。13.根据权利要求6～12中任意一项所述的用途，其特征在于，所述涂层的最外一层多糖层具有至少一个侧基官能团。14.根据权利要求6～13中任意一项所述的用途，其特征在于，所述涂层的最外一层多糖层的侧基官能团选自醛基、羧基、巯基、氨基、羟基和马来胺基中的至少一种；优选选自醛基和/或羧基。15.根据权利要求14所述的用途，其特征在于，所述涂层的最外一层多糖层的侧基官能团直接地或间接地化学键合特异性结合配对成员中的一员结合。
16.根据权利要求6～15中任意一项所述的用途，其特征在于，所述多糖选自含有三个或更多个未修饰或修饰的单糖单元的碳水化合物；优选选自葡聚糖、淀粉、糖原、菊粉、果聚糖、甘露聚糖、琼脂糖、半乳聚糖、羧基葡聚糖和氨基葡聚糖；更优选选自葡聚糖、淀粉、糖原和聚核糖。17.根据权利要求1～16中任意一项所述的用途，其特征在于，所述第一载体的粒径选自100～400nm，优选为150～350nm，更优选为180～220nm。18.根据权利要求1～17中任意一项所述的用途，其特征在于，所述第一载体为磁性或非磁性的，优选为非磁性的。19.根据权利要求1～18中任意一项所述的用途，其特征在于，所述第一载体的形状选自带、片、棒、管、孔、微滴定板、珠子、粒子和微球；优选为微球。20.根据权利要求1～19中任意一项所述的用途，其特征在于，所述第一载体的材质选自天然的、人工合成的或改性天然存在的聚合物；优选为人工合成的聚合物。21.根据权利要求20所述的用途，其特征在于，所述第一载体的材质选自琼脂糖、纤维素、硝化纤维素、醋酸纤维素、聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚乙烯、聚丙烯、聚(4-甲基丁烯)、聚丙烯酰胺、聚甲基丙烯酸酯、聚对苯二甲酸乙二醇酯、尼龙、聚丁酸乙烯或聚丙烯酸酯；优选选自聚苯乙烯、聚丙烯、聚(4-甲基丁烯)、聚丙烯酰胺、聚甲基丙烯酸酯、聚对苯二甲酸乙二醇酯或聚丙烯酸酯。22.根据权利要求1～21中任意一项所述的用途，其特征在于，所述第一载体为聚苯乙烯乳胶微球。23.根据权利要求1～22中任意一项所述的用途，其特征在于，所述敏化剂是光活化的光敏剂和/或化学活化的引发剂，优选为光活化的光敏剂。24.根据权利要求1～23中任意一项所述的用途，其特征在于，所述敏化剂选自亚甲基蓝、玫瑰红、卟啉、酞菁和叶绿素。25.根据权利要求1～24中任意一项所述的用途，其特征在于，所述特异性结合配对成员选自抗体、抗体片段、...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨阳，刘苗，康蔡俊，赵卫国，刘宇卉，李临，
申请(专利权)人：科美诊断技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：