(1-羟基环戊基)苯基乙酸中苯乙酸和2-亚环戊基-2-苯乙酸的检测方法技术

本发明专利技术属于化学药物分析方法技术领域，涉及一种盐酸环喷托酯中间体的有关物质检查方法，具体涉及(1‑羟基环戊基)苯基乙酸中苯乙酸和2‑亚环戊基‑2‑苯乙酸的检测方法。本发明专利技术能够将盐酸环喷托酯中间体(1‑羟基环戊基)苯基乙酸的苯乙酸和2‑亚环戊基‑2‑苯乙酸这两种主要有关物质进行有效的分离，分离度好，从而可以有效控制生产的质量。本发明专利技术的方法能够简单、快捷、准确地分离检测出盐酸环喷托酯中间体及其质量受到影响的主要的有关物质，且专属性强、灵敏度高、稳定性好、重现性好、精密度高、峰形好，可以用于实际生产中对盐酸环喷托酯中间体（2RS）‑（1‑羟基环戊基）苯基乙酸纯度和质量的有效控制。

【技术实现步骤摘要】
(1-羟基环戊基)苯基乙酸中苯乙酸和2-亚环戊基-2-苯乙酸的检测方法
本专利技术属于化学药物分析方法
，涉及一种盐酸环喷托酯中间体的有关物质检查方法，具体涉及(1-羟基环戊基)苯基乙酸中苯乙酸和2-亚环戊基-2-苯乙酸的检测方法。
技术介绍
近年来，虽然有了新的验光方法，但是睫状肌麻痹剂散瞳验光仍然是经过时间证明了的最可靠的方法。眼科医生需要一种散瞳作用和睫状肌麻痹作用起效快、调节作用完全消失、具有足够长的最大睫状肌麻痹时间，而且调节作用恢复快以及副作用小等特点的药物，作为眼科门诊验光检查的常规用药。盐酸环喷托酯作为一种人工合成的抗胆碱新药，属于短效睫状肌麻痹剂，能阻断乙酰胆碱对虹膜括约肌和睫状肌上M受体的作用，使瞳孔散大和调节麻痹（睫状肌麻痹）。盐酸环喷托酯是临床上首选的睫状肌麻痹药，大部分病人6～12小时就可恢复足够的调节幅度进行阅读。众所周知，有关物质（Telatedsubstances）是指在原料药生产中带入的起始物料、试剂、中间体、副产物等物质，也可能是制剂在生产、储藏和运输过程中产生的降解产物、聚合物或晶型转变等特殊杂质。有关物质的种类与药物的合成路线和生产工艺密切相关，不同的合成路线和生产工艺，药品的杂质谱也会发生变化，因此，需要根据不同的合成路线和生产工艺建立合适的分析方法，达到对盐酸环喷托酯中间体有关物质准确、有效的检测和监控。目前，对于药物纯度的检查方法也有多种，其中，有关物质检查是控制药品质量的重要指标。但是目前还没有针对盐酸环喷托酯中间体（1-羟基环戊基）苯基乙酸的有关物质检测,导致实际工业生产过程中该中间体的纯度和质量无法进行有效把控。苯乙酸和2-亚环戊基-2-苯乙酸是（1-羟基环戊基）苯基乙酸中对其质量影响最大的有关物质,两种杂质若含量高，会在后续生产过程中产生较多的副产物。两种杂质也是工业生产过程中需重点把控的两种杂质,但是目前还没有专门针对这两种杂质进行有效检测分析的手段。
技术实现思路
本专利技术针对传统生产过程中存在的问题提出一种新型的盐酸环喷托酯中间体的有关物质检查方法。为了达到上述目的，本专利技术是采用下述的技术方案实现的：盐酸环喷托酯中间体，化学名为（1-羟基环戊基）苯基乙酸，其分子式为C13H16O3，分子量为220.26，CAS号为25209-52-3，其结构式如下：本专利技术检测的两种有关物质为（苯乙酸，杂质B），（2-亚环戊基-2-苯乙酸，杂质D）。本专利技术采用高效液相色谱仪上进行梯度洗脱的方式进行检测。其色谱条件包括：色谱柱为辛烷基硅烷键合硅胶色谱柱，以磷酸氢二铵缓冲液为流动相A，甲醇为流动相B，乙腈为流动相C，检测波长为225～235nm，柱温25～35℃，流速：0.9～1.1mL/min，进行梯度洗脱；其中流动相A配制方法是：取磷酸氢二铵1.32g，用水溶解并稀释至1000mL，用磷酸调节pH值至2.8～3.2。进一步，所述梯度洗脱的过程为：0～8min内，流动相A、流动相B和流动相C的体积比70:10:20；8～25min内，流动相A、流动相B和流动相C的体积比为从70:10:20匀速渐变至50:20:30；25～50min内，流动相A、流动相B和流动相C的体积比为50:20:30；50～51min内从50:20:30匀速渐变至70:10:20；51～60min内，流动相A、流动相B和流动相C的体积比为70:10:20。其中，流动相A中，磷酸氢二铵溶液的浓度为1.19g/L～1.45g/L。作为优选，所述磷酸氢二铵溶液的浓度为1.32g/L。作为优选，0～8min内，流动相A、流动相B和流动相C的体积比为72:8:20～68:12:20。作为进一步优选方案，所述流动相A、流动相B和流动相C的体积比为70:10:20。其中，所述色谱柱的长度为250mm，直径为4.6mm，填料粒径为5μm。其中，检测波长为230nm。柱温为35℃。流速为1.0mL/min。与现有技术相比，本专利技术的优点和积极效果在于：本专利技术能够将盐酸环喷托酯中间体(1-羟基环戊基)苯基乙酸的苯乙酸和2-亚环戊基-2-苯乙酸这两种主要有关物质进行有效的分离，分离度好，从而可以有效控制生产的质量。本专利技术的方法能够简单、快捷、准确地分离检测出盐酸环喷托酯中间体及其质量受到影响的主要的有关物质，且专属性强、灵敏度高、稳定性好、重现性好、精密度高、峰形好，可以用于实际生产中对盐酸环喷托酯中间体（1-羟基环戊基）苯基乙酸纯度和质量的有效控制。附图说明图1为实施例1空白溶液的色谱图。图2为实施例1的混合对照品溶液的色谱图。图3为实施例1的盐酸环喷托酯中间体供试品的色谱图。图4为实施例2的混合对照品溶液的色谱图。图5为实施例2的盐酸环喷托酯中间体供试品溶液的色谱图。图6为实施例3的混合对照品溶液的色谱图。图7为实施例3的盐酸环喷托酯中间体供试品溶液的色谱图。图8为实施例4的混合对照品溶液的色谱图。图9为实施例4的盐酸环喷托酯中间体供试品溶液的色谱图。图10为实施例5的混合对照品溶液色谱图。图11为实施例5的盐酸环喷托酯中间体供试品溶液的色谱图。图12为实施例6的混合对照品溶液色谱图。图13为实施例6的盐酸环喷托酯中间体供试品溶液的色谱图。图14为实施例7的混合对照品溶液色谱图。图15为实施例7的盐酸环喷托酯中间体供试品溶液的色谱图。具体实施方式为了能够更清楚地理解本专利技术的上述目的、特征和优点，下面结合具体实施例对本专利技术做进一步说明。需要说明的是，在不冲突的情况下，本申请的实施例及实施例中的特征可以相互组合。在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本专利技术，但是，本专利技术还可以采用不同于在此描述的其他方式来实施，因此，本专利技术并不限于下面公开说明书的具体实施例的限制。实施例1（1）检测条件仪器：waterse2695高效液相色谱仪，2998PDA检测器，检测波长：220nm；色谱柱：watersSymmetryC8（250mm×4.6mm，5μm）色谱柱；溶剂：流动相A：磷酸氢二铵缓冲液（取1.32g磷酸二氢钾，加水1000mL使溶解，用磷酸调节pH值至3.0）；流动相B：甲醇；流动相C：乙腈；流动相A、流动相B与流动相C的体积比为：70:10:20；流速：1.0mL/min柱温：30℃；进样量：20μL；按表1进行线性梯度洗脱。表1线性梯度洗脱过程（2）检测步骤空白溶液的制备：取40%乙腈水作为空白溶液。混合对照品溶液的制备：分别取盐酸环喷托酯中间体、杂质B与杂质D各适量，精密称定，加溶剂溶解并稀释制成每1mL中含杂质A1.0mg、杂质B与杂质D10μg的溶液，作为混合对照品溶液本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.(1-羟基环戊基)苯基乙酸中苯乙酸和2-亚环戊基-2-苯乙酸的检测方法，其特征在于，在高效液相色谱仪上进行梯度洗脱，采用磷酸氢二铵缓冲液为流动相A，甲醇为流动相B，乙腈为流动相C。/n

【技术特征摘要】
1.(1-羟基环戊基)苯基乙酸中苯乙酸和2-亚环戊基-2-苯乙酸的检测方法，其特征在于，在高效液相色谱仪上进行梯度洗脱，采用磷酸氢二铵缓冲液为流动相A，甲醇为流动相B，乙腈为流动相C。


2.根据权利要求1所述(1-羟基环戊基)苯基乙酸中苯乙酸和2-亚环戊基-2-苯乙酸的检测方法，其特征在于，检测波长为225～235nm，柱温25～35℃，流速：0.9～1.1mL/min。


3.根据权利要求1所述(1-羟基环戊基)苯基乙酸中苯乙酸和2-亚环戊基-2-苯乙酸的检测方法，其特征在于，流动相A配制方法是：取磷酸氢二铵1.32g，用水溶解并稀释至1000mL，用磷酸调节pH值至2.8～3.2。


4.根据权利要求1所述(1-羟基环戊基)苯基乙酸中苯乙酸和2-亚环戊基-2-苯乙酸的检测方法，其特征在于，梯度洗脱的过程为：0～8min内，流动相A、流动相B和流动相C的体积比72:8:20～68:12:20；8～25m...

【专利技术属性】
技术研发人员：董海霞，燕禹辛，连风，刘学艳，段精飨，邢科，张曼红，甄爱华，刘建洋，
申请(专利权)人：山东绅联生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37