一种治疗精神疾病的药物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供了一种治疗精神疾病的药物及其制备方法和应用，属于生物医药领域。一种治疗精神疾病的药物，所述药物包括PPM1F基因的重组病毒。该药物为PPM1F基因的重组病毒，在小鼠脑内特定脑区注射该PPM1F基因的重组病毒，可实现PPM1F基因的表达，并通过行为学评价该药物具有抗抑郁和抗焦虑的活性。

【技术实现步骤摘要】
一种治疗精神疾病的药物及其制备方法和应用
本专利技术涉及生物医药领域，更具体地，涉及治疗精神疾病的药物及其制备方法和应用。
技术介绍
在精神疾病中，抑郁症和焦虑症均是发病率较高，且容易复发的精神疾病。抑郁症和焦虑症均会严重影响患者的工作和生活，随着社会压力的增加，抑郁症和焦虑症的患病率均呈逐年上升趋势。目前，临床上常用的抗抑郁和抗焦虑的药物为坦度螺酮、丁螺环酮、氟西汀和帕罗西汀等，且药物治疗是治疗抑郁症和焦虑症的主要手段。但是，目前的临床治疗药物效果不佳，不能有效实现抗抑郁和抗焦虑的作用。因此，寻找新的治疗药物势在必行。
技术实现思路
为了解决上述技术问题，本专利技术提供了一种治疗精神疾病的药物及其制备方法和应用，能够有效实现抗抑郁和抗焦虑的作用。本专利技术实施例提供一种治疗精神疾病的药物，所述药物包括PPM1F基因的重组病毒。具体地，所述重组病毒的载体为腺相关病毒。另一方面，本专利技术实施例提供一种如上所述的药物的制备方法，所述制备方法包括：将所述PPM1F基因的mRNA序列插入到穿梭质粒中，得到重组质粒；将所述重组质粒、第一载体质粒和第二载体质粒采用转染试剂共转染293T细胞，转染后72h收集细胞沉淀；纯化所述细胞沉淀，得到所述治疗精神疾病的药物。具体地，将所述重组质粒、所述第一载体质粒和所述第二载体质粒分别进行高纯度无内毒素抽提后再进行共转染。具体地，所述转染试剂为LipofiterTM。具体地，所述穿梭质粒为pAAV-MCS。具体地，所述第一载体质粒为pAAV-RC。具体地，所述第二载体质粒为pHelper。又一方面，本专利技术实施例提供一种PPM1F基因的重组病毒的应用，如上述的PPM1F基因的重组病毒用于治疗精神疾病。具体地，所述精神疾病包括抑郁症和焦虑症。本专利技术实施例提供的治疗精神疾病的药物及其制备方法和应用。该药物为PPM1F基因的重组病毒，在小鼠脑内特定脑区注射该PPM1F基因的重组病毒，可实现PPM1F基因的表达，使得该药物具有良好的抗抑郁和抗焦虑的活性。附图说明附图用来提供对本专利技术技术方案的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与本申请的实施例一起用于解释本专利技术的技术方案，并不构成对本专利技术技术方案的限制。图1是本专利技术实施例提供的试验组小鼠前额叶皮层脑区存在显著的GFP绿色荧光的表达图。图2是本专利技术实施例提供的AAV-PPM1F-GFP和AAV-GFP在前额叶皮层脑区过表达PPM1F蛋白对比图。图3是本专利技术实施例提供的AAV-PPM1F-GFP和AAV-GFP分别在小鼠前额叶皮层脑区PPM1F蛋白的表达量对比图，图中，***为与AAV-GFP组相比p<0.001。图4是本专利技术实施例提供的强迫游泳试验的不动时间对比图，图中，*为与AAV-GFP组相比p<0.05。图5是本专利技术实施例提供的悬尾试验的不动时间对比图，图中，**为与AAV-GFP组相比p<0.01。图6A是本专利技术实施例提供的两组小鼠每个时间点对比图，图中，横坐标为时间，单位min，纵坐标为总距离，单位cm。图6B是本专利技术实施例提供的两组小鼠总运动距离对比图。图7是本专利技术实施例提供的雌鼠尿液嗅探时间对比图，图中，*为与对照组或应激2组相比p<0.05。图8是本专利技术实施例提供的糖水偏好试验对比图，图中，***为与对照组或应激2组相比p<0.001。图9是本专利技术实施例提供的新奇抑制摄食对比图，图中，*为与对照组或应激2组相比p<0.05，**为与对照组或应激2组相比p<0.01。图10是本专利技术实施例提供的强迫游泳试验对比图，图中，*为与对照组或非应激组相比p<0.05。图11是本专利技术实施例提供的各组小鼠每个时间点活动性对比图，图中，横坐标为时间，单位min，纵坐标为总距离，单位cm。图12是本专利技术实施例提供的各组小鼠运动距离对比图。图13是本专利技术实施例提供的开臂内停留时间占在开臂闭臂内停留总时间的百分比对比图，图中，*为与对照组相比p<0.05。图14是本专利技术实施例提供的进入开臂次数占总入臂次数的百分比对比图，图中，*为与对照组相比p<0.05。图15是本专利技术实施例提供的小鼠进入明箱的潜伏时间对比图，图中，*为与对照组相比p<0.05。图16是本专利技术实施例提供的小鼠在明室中停留的时间对比图。图17是本专利技术实施例提供的开臂内停留时间占在开臂闭臂内停留总时间的百分比对比图，图中，**为与对照组或应激2组相比p<0.01。图18是本专利技术实施例提供的进入开臂次数占总入臂次数的百分比对比图，图中，***为与对照组或应激2组相比p<0.001。图19是本专利技术实施例提供的小鼠进入明箱的潜伏时间对比图，图中，*为与对照组或非应激组相比p<0.05。图20是本专利技术实施例提供的小鼠在明室中停留的时间对比图，图中，*为与对照组或非应激组相比p<0.05。具体实施方式为使本专利技术实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本专利技术实施例的附图，对本专利技术实施例的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例是本专利技术的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于所描述的本专利技术的实施例，本领域普通技术人员在无需创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例本专利技术实施例提供了一种治疗精神疾病的药物，该药物包括PPM1F基因的重组病毒。具体地，重组病毒的载体可以为腺相关病毒(Adeno-AssociatedVirus，AAV)。利用腺相关病毒可实现PPM1F蛋白在前额叶皮层的过表达。下面简单介绍一下本专利技术实施例提供的药物的制备方法，具体如下：将PPM1F基因的mRNA序列插入到穿梭质粒pAAV-MCS中，得到重组质粒；将重组质粒、第一载体质粒pAAV-RC和第二载体质粒pHelper分别进行高纯度无内毒素抽提后，将重组质粒、第一载体质粒pAAV-RC和第二载体质粒pHelper采用转染试剂LipofiterTM共转染293T细胞，转染后72h收集细胞沉淀；其中，转染试剂LipofiterTM购置于汉恒生物科技(上海)有限公司。在本实施例中，共转染操作由汉恒生物科技上海有限公司按照转染试剂LipofiterTM的说明书完成。纯化细胞沉淀。具体地，采用全能核酸酶处理细胞沉淀：每1mL细胞沉淀中加入0.1μLBenonase酶，于37℃水浴1h，除细胞沉淀中的细胞基因组及残留的质粒DNA。于600g且温度为4℃条件下离心10min，得到上清液。将该上清液安装Biomiga腺相关病毒纯化试剂盒V1469-01进行柱纯化，得到的4mLAAV病毒样品液体，将AAV病毒样品液体加入到超滤管中，于1400g离心30min，得到约2本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种治疗精神疾病的药物，其特征在于，所述药物包括PPM1F基因的重组病毒。/n

【技术特征摘要】
1.一种治疗精神疾病的药物，其特征在于，所述药物包括PPM1F基因的重组病毒。


2.根据权利要求1所述的药物，其特征在于，所述重组病毒的载体为腺相关病毒。


3.一种如权利要求1或2所述的药物的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：将所述PPM1F基因的mRNA序列插入到穿梭质粒中，得到重组质粒；
将所述重组质粒、第一载体质粒和第二载体质粒采用转染试剂共转染293T细胞，转染后72h收集细胞沉淀；
纯化所述细胞沉淀，得到所述治疗精神疾病的药物。


4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，将所述重组质粒、所述第一载体质粒和所述第二载体质粒分别进行高纯度无内毒素抽提后再进行共转...

【专利技术属性】
技术研发人员：李晨，孟凡涛，刘晶，代娟娟，吴敏，
申请(专利权)人：滨州医学院附属医院，
类型：发明
国别省市：山东;37