用于螨过敏治疗的核酸制造技术

本发明专利技术提供预期对螨过敏治疗有用的核酸。本发明专利技术提供一种包含编码嵌合蛋白的碱基序列的核酸，其是依次包含编码信号肽的碱基序列、编码LAMP的细胞器内稳定化结构域的碱基序列、编码包含Der p 1、Der p 2、Der p 23和Der p 7的变应原结构域的碱基序列、编码跨膜结构域的碱基序列以及编码LAMP的内体/溶酶体靶向结构域的碱基序列的核酸。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于螨过敏治疗的核酸
本专利技术涉及预期作为药物组合物的有效成分有用的核酸、例如预期对螨过敏治疗有用的核酸。
技术介绍
螨过敏是对来源于螨虫的变应原发生反应而产生的过敏性疾病。过敏性疾病是如下发生的：1)摄取到体内的变应原被抗原提呈细胞所吞噬并被抗原提呈至初始T细胞；2)初始T细胞分化为Th2细胞；3)由Th2细胞等免疫细胞产生IL-4等细胞因子；4)B细胞在IL-4的作用下产生IgE；5)结合了变应原的IgE与肥大细胞结合。已知在过敏性疾病患者中，在产生IFN-γ等的Th1细胞所参与的Th1型免疫与产生IL-4等的Th2细胞所参与的Th2型免疫的抗衡中Th2型占优势，发生Th2型的炎症免疫反应(Middleton’sAllergySeventheditionPrinciples&Practice、2009)。可见IFN-γ可用作Th1型免疫的指标、IL-4可用作Th2型免疫的指标。另外，在小鼠中，IFN-γ使在被活化的B细胞中发生优先向IgG2a同种型的类别转换，另一方面抑制对其他所有同种型的应答。即，IgG2a也可用作Th1型免疫的指标。例如，已知在IL-4缺陷小鼠中，IgG2a的产生受到促进，在IFN-γ缺陷小鼠中，IgG2a的产生受到抑制(ArthritisRes.、2002、Vol.4、p.54-58)。另外，还有报道称由B细胞产生的抗体与变应原免疫疗法的作用机理相关。例如，已知在人体中，IgG与同变应原结合的IgE对抗，抑制变应原-IgE复合物形成，抑制组胺从肥大细胞的游离(JAllergyClinImmunol.、2017、Vol.140、p.1485-1498)。迄今为止，进行了多种针对螨过敏的免疫疗法的开发(JAllergyClinImmunol.、2013、Vol.132、p.1322-1336；WO2014/195803；ExpertRevVaccines.、2014、Vol.13、p.1427-1438)。另外，作为与螨过敏相关的变应原，已知有Derp1、Derp2、Derp7、Derp23等(专利文献1、专利文献2、非专利文献1)。但是，例如皮下免疫疗法(subcutaneousimmunotherapy(SCIT))和舌下免疫疗法(sublingualimmunotherapy(SLIT))存在过敏反应的可能性和长达数年的治疗期等问题。作为核酸疫苗的技术之一，进行了利用溶酶体相关膜蛋白(lysosome-associatedmembraneprotein；LAMP)的用于过敏治疗的核酸疫苗的研究。并且，已构建出含有编码包含作为LAMP家族成员的LAMP-1和作为日本柳杉(Cryptomeriajaponica)的变应原的CryJ1和/或CryJ2的嵌合蛋白的核酸的质粒(专利文献3、非专利文献2)。并且，据报道，这样的质粒在不引起导致过敏反应的游离变应原向全身释放的情况下诱导Th1型的免疫反应。另外，据报道，含有编码包含LAMP-1以及作为花生的变应原的AraH1、AraH2和AraH3的嵌合蛋白的核酸的质粒在小鼠模型中减少了IgE的产生(专利文献4)。在螨过敏领域中，已构建出含有编码包含Derp1以及LAMP-1的跨膜结构域和内体/溶酶体靶向结构域的嵌合蛋白的核酸的疫苗(专利文献5、非专利文献3)。但是，尚未报道过包含多种螨变应原抗原以及LAMP-1的细胞器内稳定化结构域和内体/溶酶体靶向结构域的用于螨过敏治疗的核酸疫苗。现有技术文献专利文献专利文献1：国际公开号1988/010297号专利文献2：国际公开号2007/124524号专利文献3：国际公开号2013/187906号专利文献4：国际公开号2015/200357号专利文献5：国际公开号2004/019978号非专利文献非专利文献1：“クリニカル·アンド·エクスペリメンタル·アラージー(Clinical&ExperimentalAllergy)”、(英国)、1995；25：416-422非专利文献2：“ジャーナル·オブ·イムノロジー·リサーチ(JournalofImmunologyResearch)”、(埃及)、2016；ArticleID4857869非专利文献3：“ワクチン(Vaccine)”、(荷兰)、2006；24(29-30)：5762-5771
技术实现思路
专利技术所要解决的问题本专利技术的课题在于提供预期对螨过敏治疗有用的核酸。用于解决问题的方法本专利技术人在用于螨过敏治疗的核酸的制作方面反复进行了相当深入的研究，结果，制作出了LAMP-Derp1-Derp2-Derp23-Derp7质粒(实施例1)，确认到嵌合蛋白由该质粒表达(实施例2)，并且发现在给药了该质粒的小鼠中诱导了Th1型免疫反应(实施例3、实施例4)。其结果是，提供预期对螨过敏治疗有用的核酸，从而完成了本专利技术。即，本专利技术涉及下述[1]～[17]。[1]一种核酸，其为包含编码嵌合蛋白的碱基序列的核酸，该碱基序列为依次包含下述碱基序列的碱基序列：编码信号肽的碱基序列；编码LAMP的细胞器内稳定化结构域的碱基序列；编码包含Derp1、Derp2、Derp23和Derp7的变应原结构域的碱基序列；编码跨膜结构域的碱基序列；以及编码LAMP的内体/溶酶体靶向结构域的碱基序列。[2]一种核酸，其为包含编码嵌合蛋白的碱基序列的核酸，该碱基序列为依次包含下述碱基序列的碱基序列：编码信号肽的碱基序列；编码LAMP的细胞器内稳定化结构域的碱基序列；编码依次包含Derp1、Derp2、Derp23和Derp7的变应原结构域的碱基序列；编码跨膜结构域的碱基序列；以及编码LAMP的内体/溶酶体靶向结构域的碱基序列。[3]如[1]或[2]所述的核酸，其中，信号肽为LAMP的信号肽。[4]如[1]～[3]中任一项所述的核酸，其中，跨膜结构域为LAMP的跨膜结构域。[5]如[1]～[4]中任一项所述的核酸，其中，信号肽由序列号2的氨基酸编号1至27的氨基酸序列构成，细胞器内稳定化结构域由序列号2的氨基酸编号28至380的氨基酸序列构成，变应原结构域为包含由序列号2的氨基酸编号383至594的氨基酸序列构成的Derp1、由序列号2的氨基酸编号599至727的氨基酸序列构成的Derp2、由序列号2的氨基酸编号732至800的氨基酸序列构成的Derp23和由序列号2的氨基酸编号805至1002的氨基酸序列构成的Derp7的变应原结构域，跨膜结构域由序列号2的氨基酸编号1006至1028的氨基酸序列构成，内体/溶酶体靶向结构域由序列号2的氨基酸编号1037至1040的氨基酸序列构成。[6]一种核酸，其为包含编码由与序列号2所示的氨基酸序列的一致性为90％以上的氨基酸序列构成的嵌合蛋白的碱基序列的核酸，该核酸具有诱导针对选自由De本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种核酸，其为包含编码嵌合蛋白的碱基序列的核酸，该碱基序列为依次包含下述碱基序列的碱基序列：/n编码信号肽的碱基序列；/n编码LAMP的细胞器内稳定化结构域的碱基序列；/n编码包含Der p 1、Der p 2、Der p 23和Der p 7的变应原结构域的碱基序列；/n编码跨膜结构域的碱基序列；以及/n编码LAMP的内体/溶酶体靶向结构域的碱基序列。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180511 JP 2018-0919631.一种核酸，其为包含编码嵌合蛋白的碱基序列的核酸，该碱基序列为依次包含下述碱基序列的碱基序列：
编码信号肽的碱基序列；
编码LAMP的细胞器内稳定化结构域的碱基序列；
编码包含Derp1、Derp2、Derp23和Derp7的变应原结构域的碱基序列；
编码跨膜结构域的碱基序列；以及
编码LAMP的内体/溶酶体靶向结构域的碱基序列。


2.一种核酸，其为包含编码嵌合蛋白的碱基序列的核酸，该碱基序列为依次包含下述碱基序列的碱基序列：
编码信号肽的碱基序列；
编码LAMP的细胞器内稳定化结构域的碱基序列；
编码依次包含Derp1、Derp2、Derp23和Derp7的变应原结构域的碱基序列；
编码跨膜结构域的碱基序列；以及
编码LAMP的内体/溶酶体靶向结构域的碱基序列。


3.如权利要求1或2所述的核酸，其中，信号肽为LAMP的信号肽。


4.如权利要求1～3中任一项所述的核酸，其中，跨膜结构域为LAMP的跨膜结构域。


5.如权利要求1～4中任一项所述的核酸，其中，信号肽由序列号2的氨基酸编号1至27的氨基酸序列构成，细胞器内稳定化结构域由序列号2的氨基酸编号28至380的氨基酸序列构成，变应原结构域为包含由序列号2的氨基酸编号383至594的氨基酸序列构成的Derp1、由序列号2的氨基酸编号599至727的氨基酸序列构成的Derp2、由序列号2的氨基酸编号732至800的氨基酸序列构成的Derp23和由序列号2的氨基酸编号805至1002的氨基酸序列构成的Derp7的变应原结构域，跨膜结构域由序列号2的氨基酸编号1006至1028的氨基酸序列构成，内体/溶酶体靶向结构域由序列号2的氨基酸编号1037至1040的氨...

【专利技术属性】
技术研发人员：丸井崇则，内田征男，
申请(专利权)人：安斯泰来制药株式会社，
类型：发明
国别省市：日本;JP