一种改造的脐带干细胞在制备抗衰老的药物组合物或者保健品中的用途制造技术

本发明专利技术涉及一种改造的脐带干细胞在制备抗衰老的药物组合物或者保健品中的用途。本发明专利技术将miR‑375转染脐带间充质干细胞发现，所述转染后的脐带间充质干细胞一方面提高干细胞本身的抗衰老功能，另外一方面在提高干细胞本身活性的同时提高对人抗衰老的功能，而且所述的抗衰老特性是在高糖环境实现的，适于糖尿病患者的抗衰老治疗，具有极大的市场价值。

【技术实现步骤摘要】
一种改造的脐带干细胞在制备抗衰老的药物组合物或者保健品中的用途
本专利技术涉及药物和保健品领域，具体的涉及一种改造的脐带干细胞在制备抗衰老的药物组合物或者保健品中的用途。
技术介绍
衰老是机体随年龄增长而呈现渐进性结构退行性变和机能减退的过程和现象。人口老龄化已经成为严重的政治、社会、经济和健康问题，寻找有效提高老年人的生活质量、逆转或延缓衰老的技术是目前迫在眉睫的问题。干细胞具有自我更新、多向分化潜能，在理论上具有参与和促进组织细胞再生、损伤修复、逆转人体衰老的可行性。间充质干细胞（mesenchymalstemcells，MSCs）是一种多能干细胞，来源于发育早期的中胚层和外胚层，MSCs最初在骨髓中发现，因其具有多向分化潜能、造血支持和免疫调控等特点而日益受到人们的关注。间充质干细胞在体内或体外特定的诱导条件下可分化多种组织细胞，可作为理想的种子细胞用于衰老和病变引起的组织器官损伤修复。王宏兰等通过研究发现，骨髓间充质干细胞（bonemarrowmesenchymalstemcells，BM-MSCs）对D-半乳糖衰老模型小鼠具有抗衰老作用。随着MSCs研究的进展，科学家发现脐带间充质干细胞（umbilicalcordmesenchymalstemcells，UC-MSCs）相对于BM-MSCs具有无肿瘤污染、增殖能力强、采集方便、免疫活性低、无需配型等许多优点，并且脐带作为医疗废弃物，对供者无不利影响，不受伦理问题的限制，使得UC-MSCs极有可能成为BM-MSCs的理想替代物。但是干细胞本身也存在衰老的问题。细胞衰老是细胞对各种各样的应激源作出应答后的一种细胞状态，应激源包括基因毒性因子，营养元素缺乏，缺氧，线粒体功能障碍和致癌基因激活等。研究表明，衰老会影响MSCs的功能，包括增殖能力、克隆形成能力、分化潜能、免疫特性、端粒酶活性、细胞迁移能力和粘附性等，突出体现在细胞增殖能力和分化潜能的衰减。文献表明，衰老后MSCs表面特异性标志物CD44、CD90、CD105和Stro-1等表达有所降低;细胞形态逐渐扁平肥大，胞膜成分改变，如膜内在蛋白caveolin-1含量上调;胞质pH改变，颗粒固缩;溶酶体间隔增大且活性增加，β-半乳糖苷酶(β-galactosidase，β-gal)产量升高;溶酶体内脂褐质累积，细胞自体荧光水平上升;线粒体较大但功能异常，导致过量的活性氧自由基(reactiveoxygenspecies，ROS)产生;同时因核纤层蛋白B1的缺失，胞核完整性遭到破坏，胞质内出现染色质碎片，端粒酶明显缩短等。总之，衰老MSCs最终的结局是停止增殖，导致干细胞用于治疗衰老的作用停止。MSCs体外培养易衰老特性使MSCs扩增数量受限，从而限制其在临床的应用。如何使衰老的MSCs再现年轻化状态而延长其利用价值成为再生医学的研究热点之一。Romanov等率先利用人乳腺上皮细胞探索细胞衰老状态是否可以被逆转。此后，越来越多的学者尝试通过添加生物活性物质或药物等方法延缓MSCs衰老进程。溶血磷脂酸(lysobisphosphatidicacids，LPA)是膜磷脂合成中的一种代谢产物，研究表明LPA参与并维持机体的正常生理功能。MSCs优先表达LPA受体亚型1，通过添加该受体拮抗物Ki16425，细胞衰老相关的p16Ink4a、Rb、p53和p21Cip1在hBMSCs中的表达均受到抑制，明显减缓了体外连续培养的hBMSCs衰老状态。生物活性分子载体丝蛋白与姜黄素结合可延缓BMSCs衰老进程，且延缓程度与姜黄素剂量和刺激时间有一定关系，但具体机制还有待进一步探究。雷帕霉素(rapamycin，RAPA)是一种mTOR抑制剂，已被证实具有延缓细胞衰老的作用，机制可能是通过对AKT/mTOR的抑制作用从而调节胞内ROS的产生，多能性基因Nanog和Oct-4的表达及DNA损伤累积而产生相应效应。曹玉林等研究发现复制性衰老的UCMSCs经RAPA处理后，细胞体积变小，β-gal染色阳性细胞减少，p53表达降低，血管相关形成因子表达增高;小鼠体内实验表明RAPA治疗组较对照组能增强缺血区域血管新生，证明RAPA可以成为延缓MSCs衰老状态的新手段。曾毅等利用Ku0063794和RAPA作用于衰老的BMSCs，也得到了同样的结果。RAPA还可以通过抑制mTOR信号通路，明显改善来自系统性红斑狼疮患者的BMSCs的衰老表型和免疫调节功能，为治愈此类疾病带来新的希望。但是这些都是药物的作用，药物本身对于人体还有不确定的副作用或肝脏伤害，导致其推广应用存在诸多障碍。
技术实现思路
本专利技术克服现有的技术的缺陷，一方面通过提高干细胞的抗衰老活性来提高干细胞本身的抗衰老功能，另外一方面在提高干细胞本身活性的同时提高对人抗衰老的功能。本专利技术一个方面，提供一种脐带间充质干细胞在高糖环境下衰老前后miRNA差异表达与功能分析的方法，所述方法包括将所属脐带间充质干细胞通过在用于模拟糖尿病患者体内高糖微环境高糖培养基中连续培养16代模拟糖尿病患者细胞衰老状态，通过对细胞的miRNA表达进行检测，对衰老前后的核内miRNA表达情况进行统计分析，筛选出差异倍数大于2倍且P＜0.001的miRNA为表达显著差异的miRNA，进而对miRNA表达谱数据进行差异表达分析。进一步的，本专利技术筛选出了2条差异最显著的miRNA作为研究基础用于抗衰老的研究。本专利技术一方面，请求保护转miR-375的脐带间充质干细胞在制备药物组合物中的应用；所述药物组合物的功能为如下：(a)延缓衰老；(b)延缓细胞衰老；(c)延缓间充质干细胞衰老。本专利技术保护一种转miR-375的脐带间充质干细胞的制备方法，包括如下步骤：（1）提高脐带间充质干细胞中miR-375的含量；或（2）降低脐带间充质干细胞中抑制miR-375表达的编码基因的表达。本专利技术进一步的，提供了所述转miR-375的脐带间充质干细胞在制备抗衰老的保健品中的用途。进一步的，所述药物或者保健品中还可以含有其他的抗衰老的药物。在另一优选例中，所述的药物组合物的剂型是：口服剂，注射剂，输液剂，片剂，粉剂，胶囊剂，丸剂；较佳地为口服剂。本专利技术还提供一种抗衰老冻干剂，由本专利技术所述的抗衰老组合物、冻干保护剂、稳定剂组成。一些实施方案中，所述稳定剂为冻干保护剂、酸碱调节剂、乳化剂中的一种或多种。其中，所述冻干保护剂为海藻糖、甘氨酸、甘露糖醇、葡聚糖、乳糖中的一种或多种；所述酸碱调节剂为磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、氨基酸、柠檬酸钾中的一种或多种。所述乳化剂为聚山梨醇酯-20、聚山梨醇酯-60、聚山梨醇酯-80中的一种或多种。有益效果：本专利技术通过针对脐带间充质干细胞在高糖环境下衰老前后miRNA差异表达与功能进行分析筛选出差异表达显著差异的miRNA作为研究基础用于抗衰老的研究。通过将所述的miRNA转染脐带间充质干细胞发现，所述转染后的脐带间充质干细胞一方面提高干细胞本身的抗衰老功能，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.转miR-375的脐带间充质干细胞在制备药物组合物中的应用；所述药物组合物的功能为如下：/n(a)延缓高糖环境下的人体的衰老；/n(b)延缓高糖环境下细胞的衰老；/n(c)延缓高糖环境下脐带间充质干细胞的衰老。/n

【技术特征摘要】
1.转miR-375的脐带间充质干细胞在制备药物组合物中的应用；所述药物组合物的功能为如下：
(a)延缓高糖环境下的人体的衰老；
(b)延缓高糖环境下细胞的衰老；
(c)延缓高糖环境下脐带间充质干细胞的衰老。


2.一种转miR-375的脐带间充质干细胞的制备方法，包括如下步骤：
（1）提高脐带间充质干细胞中miR-375的含量；或
（2）降低脐带间充质干细胞中抑制miR-375表达的编码基因的表达。


3.转miR-375的脐带间充质干细胞在制备保健品中的应用；所述保健品的功能为如下：
(a)延缓高糖环境下的人体的衰老；
(b)延缓高糖环境下细胞的衰老；
(c)延缓高糖环境下脐带间充质干细胞的衰老。


4.如权利要求1或3所述的应用，其特征在于：所述药物或者保健品中还可以含有其他的抗衰老的药物。

【专利技术属性】
技术研发人员：张海涛，陈帅，
申请(专利权)人：北京欣颂生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11