多拉菌素在治疗食管癌中的应用制造技术

本发明专利技术涉及药物新用途技术领域，具体而言，涉及多拉菌素在治疗食管癌的新用途。本发明专利技术通过在体和离体实验，对多拉菌素的抗食管癌的作用的效果进行了考察。多拉菌素能抑制食管癌的增殖和迁移，并促进食管癌细胞发生凋亡和自噬。因此，多拉菌素可以用于制备治疗食管癌的药物，对食管癌的治疗和预后其到良好的效果。

【技术实现步骤摘要】
多拉菌素在治疗食管癌中的应用
本专利技术涉及药物新用途
，具体为多拉菌素在治疗食管癌中的应用。
技术介绍
食管癌是世界上最常见、最致命的恶性肿瘤之一，由于其发病率高，而且很难在早期做出诊断，5年生存率极低。目前，治疗食管癌的手段主要是以外科手术为主，手术切除率虽然较从前有所增高，但总体治疗效果仍然不尽人意。多拉菌素(多拉菌素doramectin，DRM)是阿维菌素的第三代衍生药物，属于大环内酯类抗寄生虫药物其化学名为25-环己烷基-5-O-去甲基-25-去阿维菌素B1，分子式是C50H74O14广泛的抑制动物体内和体外的寄生虫活性，在家畜业中被大量使用。到目前为止，多拉菌素治疗食管癌的作用还没有报道过。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供多拉菌素在治疗食管癌中的应用，以解决上述
技术介绍
中提出的问题。为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：多拉菌素在治疗食管癌中的应用，多拉菌素作为治疗食管癌药物的应用。优选的，所述多拉菌素的结构式为：优选的，所述治疗食管癌药物包括多拉菌素和药学上可接受的载体。优选的，所述药学上可接受的载体包括稀释剂、赋形剂、崩解剂、填充剂、粘合剂、润滑剂或矫味剂中的一种或多种组合；所述赋形剂为甘露醇、乳糖、淀粉、右旋糖酐或微晶纤维素的一种或多种组合；所述崩解剂为聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基纤维素、羧甲基纤维素钠或羟丙甲基纤维素的一种或多种组合；所述润滑剂为滑石粉或硬脂酸镁。优选的，所述治疗食管癌药物的剂型为注射剂、针剂、片剂、冲剂、颗粒剂、丸剂、胶囊、悬浮剂、乳剂、膏剂、霜剂、透皮贴剂中的任一种。优选的，所述治疗食管癌药物为食管癌细胞增殖抑制剂。优选的，所述治疗食管癌药物为食管癌细胞迁移抑制剂。优选的，所述治疗食管癌药物为食管癌细胞凋亡促进剂。优选的，所述治疗食管癌药物为神经食管癌细胞自噬促进剂。与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：本专利技术使用多拉菌素能抑制食管癌的增殖和迁移，并促进食管癌细胞发生凋亡和自噬。因此，多拉菌素可以用于制备治疗食管癌的药物，对食管癌的治疗和预后其到良好的效果。附图说明图1为MTT法检测多拉菌素对Eca109、EC9706和HECC细胞的体外增殖结果，多拉菌素以时间和剂量依赖的方式抑制Eca109和EC9706细胞活力。但是，其对正常星形胶质细胞HEEC增殖具有较小的影响，其中图a、b、c分别是Eca109、EC9706和HECC细胞经多拉菌素处理24h、48h和72h处理后的结果。图2为划痕实验观察多拉菌素对Eca109和EC9706细胞的迁移抑制结果，其中图a：Eca109细胞经多拉菌素处理后24h前后结果；图b：EC9706细胞经多拉菌素处理后24h前后结果；图c：Eca109细胞经多拉菌素处理24h后细胞迁移率的统计结果；图d：EC9706细胞经多拉菌素处理24h后细胞迁移率的统计结果。图3为透射电镜观察Eca109和EC9706细胞中凋亡小体自噬体的产生结果，其中图a：Eca109细胞对照组；图b：EC9706细胞对照组；图c：多拉菌素处理Eca109(40μM)细胞48h后，透射电镜观察细胞形态；图d：多拉菌素处理EC9706(20μM)细胞48h后，透射电镜观察细胞形态。图4为Westernblotting检测自噬蛋白及自噬相关蛋白表达量，多拉菌素对Eca109和EC9706细胞的自噬蛋白表达的影响，其中图a：不同浓度的多拉菌素分别处理Eca109(0μM、10μM、20μM、40μM)细胞48h后，自噬蛋白表达结果图分布情况；图b：EC9706(0μM、5μM、10μM、20μM)细胞自噬及自噬相关蛋白表达量的统计结果分析；图c：Eca109细胞经多拉菌素处理后的自噬蛋白及自噬相关蛋白表达量；图d：EC706细胞经多拉菌素处理后的自噬蛋白及自噬相关蛋白表达量(P<0.01)。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例1：多拉菌素在体外抑制食管癌细胞U87、C6细胞生长的验证。1、实验方法将处于生长对数期Eca109、EC9706和HEEC细胞，细胞密度达到80％～90％时，对细胞进行消化，离心收集，吹成单细胞悬液；细胞密度调整为每100μL培养液中细胞个数为1.0×104，混匀悬液并按顺序加入孔中(100μL/孔)，培养过夜，待细胞完全贴壁，其中Eca109细胞的多拉菌素药物浓度分别为：0μM、5μM、10μM、20μM、40μM、60μM，EC9706和HEEC细胞的多拉菌素药物浓度分别为：0μM、5μM、10μM、20μM、30μM、40μM、50μM、60μM；将96孔板中的原培养液弃掉，并向其中加入含有不同剂量药物的新培养液，每孔100μL，每个药物浓度设置3个重复孔，并且将0μM作为该实验的对照组；将药物处理的细胞放入培养箱内(37℃、5％CO2)，培养24h、48h、72h；结束培养，加入浓度为5mg/mL的MTT溶液，每孔20μL，再继续培养4h；小心去除孔中的液体，加入150μLDMSO，放置于摇床上，室温避光摇动12min；酶标仪检测A490的数值，计算对照组与每个加药组细胞的存活率以及半数抑制率，实验重复3次。2、实验结果结果表明，多拉菌素以时间和剂量依赖的方式抑制Eca109和EC9706细胞活力。但是，多拉菌素对正常食管细胞HEEC增殖具有较小的影响。对MTT的结果分析，得出不同时间和不同细胞的IC50值及细胞增殖的抑制率。多拉菌素在较低药物浓度就可抑制Eca109和EC9706细胞的增长。由此结果可知，多拉菌素可以明显的抑制Eca109和EC9706细胞活性。3、结论综上所述，这些结果表明多拉菌素能有效地抑制食管癌细胞Eca109和EC9706细胞的生长。实施例2：多拉菌素抑制Eca109和EC9706细胞迁移的验证。1、实验方法将正处于对数生长期的Eca109和EC9706细胞从培养瓶中消化下来，枪头吹匀细胞，使细胞独立均匀分散在液体中；将Eca109和EC9706细胞接种到六孔板中(1.0×105个/孔)，培养过夜，待细胞完全贴壁；吸掉孔中的旧培养液，用多拉菌素(10μM，20μM，40μM)处理Eca109细胞；多拉菌素(5μM，10μM，20μM)处理EC9706细胞；选用1mL的枪头，在孔底竖直划线，划完后再舍弃培养液，用无菌的PBS清洗3次，加入不含血清的培养液，并在倒置显微镜下观察并记录0h的划痕宽度；培养24h后，在倒置显微镜下观察并拍照记录划痕本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.多拉菌素在治疗食管癌中的应用，其特征在于：多拉菌素作为治疗食管癌药物的应用。/n

【技术特征摘要】
1.多拉菌素在治疗食管癌中的应用，其特征在于：多拉菌素作为治疗食管癌药物的应用。


2.根据权利要求1所述的多拉菌素在治疗食管癌中的应用，其特征在于，所述多拉菌素的结构式为：





3.根据权利要求2所述的多拉菌素在治疗食管癌中的应用，其特征在于，所述治疗食管癌药物包括多拉菌素和药学上可接受的载体。


4.根据权利要求3所述的多拉菌素在治疗食管癌中的应用，其特征在于，所述药学上可接受的载体包括稀释剂、赋形剂、崩解剂、填充剂、粘合剂、润滑剂或矫味剂中的一种或多种组合；所述赋形剂为甘露醇、乳糖、淀粉、右旋糖酐或微晶纤维素的一种或多种组合；所述崩解剂为聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基纤维素、羧甲基纤维素钠或羟丙甲基纤维素的一种或多种组合；所述润滑剂为滑石粉或硬脂酸镁。...

【专利技术属性】
技术研发人员：高爱丽，李新，黄鹏，孙立影，王晓兴，
申请(专利权)人：东北农业大学，
类型：发明
国别省市：黑龙江;23