本发明专利技术提供一种用于免疫细胞p16染色的封闭液，涉及封闭液技术领域，该用于免疫细胞p16染色的封闭液，包括如下重量份的原料：非免疫血清6－16份、缓冲液40－60份、脱脂奶粉20－30份、甲醛6－18份、去污剂10－20份、聚环氧乙烷4－12份、明胶4－14份、蒸馏水100－120份。该用于免疫细胞p16染色的封闭液，不与哺乳动物抗体反应，蛋白A反应产生假阳性，不掩盖、破坏结合位点产生假阴性，对包被的反应物质有稳定作用；含有在室温和室温以下易溶的组分，不含哺乳动物可能会有的传染性物质，保护操作人员，批件的一致性良好，变异小，同时，甲醛、聚环氧乙烷及吐温－20，使得封闭液具有良好的封闭效果。
【技术实现步骤摘要】
一种用于免疫细胞p16染色的封闭液
本专利技术涉及封闭液
，特别的为一种用于免疫细胞p16染色的封闭液。
技术介绍
宫颈癌是妇科最常见的女性生殖系统恶性肿瘤之一，发病率仅次于乳腺癌，位居女性恶性肿瘤第二位，严重威胁女性的身体健康和生活质量。中国是宫颈癌的高发国家，发生率及死亡率约占全世界的1/3。宫颈癌也是目前唯一病因明确，原位癌高发年龄为30～35岁，浸润癌为45～55岁，近年来其发病有年轻化的趋势，通过有效的早期诊断及治疗可以完全治愈的癌症。在免疫组织化学反应中，抗体能够识别抗原决定簇，然后与之特异性结合。封闭液作用原理主要是通过蛋白非特异性地与表面的抗原决定簇结合，导致特异性的抗体不能跟这些非特异性的抗原决定簇结合，染色背景就会降低，但是传统的封闭液采用动物非免疫血清进行制备，如专利公开号为CN110501201A的专利，动物非免疫血清制备的封闭液，存在易与蛋白A反应、不适于室温或低温的检测、易携带动物疾病的问题，同时，传统的封闭液，封闭效果不佳，无法满足使用者的需求。
技术实现思路
本专利技术提供的专利技术目的在于提供一种用于免疫细胞p16染色的封闭液，存在不会与哺乳动物抗体反应、适于室温或低温的检测、不携带动物疾病及封闭作用好的效果。为实现以上目的，本专利技术通过以下技术方案予以实现：一种用于免疫细胞p16染色的封闭液，包括如下重量份的原料：非免疫血清6－16份、缓冲液40－60份、脱脂奶粉20－30份、甲醛6－18份、去污剂10－20份、聚环氧乙烷4－12份、明胶4－14份、蒸馏水100－120份。作为本专利技术进一步的方案：包括如下重量份的原料：非免疫血清8－14份、缓冲液42－58份、脱脂奶粉22－28份、甲醛8－16份、去污剂12－18份、聚环氧乙烷6－10份、明胶6－12份、蒸馏水102－118份。作为本专利技术进一步的方案：包括如下重量份的原料：非免疫血清10－12份、缓冲液44－56份、脱脂奶粉24－26份、甲醛10－14份、去污剂14－16份、聚环氧乙烷8－9份、明胶8－10份、蒸馏水104－116份。作为本专利技术进一步的方案：包括如下重量份的原料：非免疫血清11份、缓冲液50份、脱脂奶粉25份、甲醛12份、去污剂15份、聚环氧乙烷8份、明胶9份、蒸馏水110份。作为本专利技术进一步的方案：所述缓冲液为三羟甲基氨基甲烷溶液、3－吗啉丙磺酸溶液中的一种。作为本专利技术进一步的方案：所述去污剂为吐温－20。作为本专利技术进一步的方案：所述非免疫血清为鱼血清。一种用于免疫细胞p16染色的封闭液的制备方法，包括以下步骤：S1、将蒸馏水置于容器中，再将脱脂奶粉放入，进行溶解。S2、将脱脂奶粉溶液置于搅拌机中，向脱脂奶粉溶液中加入甲醛、聚环氧乙烷和明胶，进行均匀搅拌。S3、将非免疫血清、缓冲液和去污剂加入到搅拌机中进行搅拌，并调节pH至7.2－7.6，制得封闭液。作为本专利技术进一步的方案：将根据S2中的操作步骤，搅拌机的转速为300－350r/min，搅拌时间为5－8min。作为本专利技术进一步的方案：将根据S3中的操作步骤，搅拌机的转速为120－200r/min，搅拌时间为3－5min。本专利技术提供了一种用于免疫细胞p16染色的封闭液。具备以下有益效果：本专利技术中，改变了传统的采用动物非免疫血清的方式，而采用鱼血清，制备的封闭液不与哺乳动物抗体反应，蛋白A反应产生假阳性；不掩盖、破坏结合位点产生假阴性；对包被的反应物质有稳定作用；含有在室温和室温以下易溶的组分；不含哺乳动物可能会有的传染性物质，保护操作人员；批件的一致性良好，变异小，具有传统动物非免疫血清所不具有的特性，同时，加入的甲醛能够与PVDF膜表面的微结构反应或者结合，使之失去结合蛋白的疏水力或者空间结构域，聚环氧乙烷的水溶性强，使细胞发生聚集、融合，吐温－20有抗原修复的作用，与膜疏水性吸附，有很强的对非特异性吸附的洗脱作用，同样可以降低蛋白间的疏水作用，可提高特异性抗体的识别能力，使得封闭液具有良好的封闭效果。具体实施方式以下参照具体的实施例来说明本专利技术。本领域技术人员能够理解，这些实施例仅用于说明本专利技术，其不以任何方式限制本专利技术的范围。实施例1：一种用于免疫细胞p16染色的封闭液，包括如下重量份的原料：非免疫血清6份、缓冲液40份、脱脂奶粉20份、甲醛6份、去污剂10份、聚环氧乙烷4份、明胶4份、蒸馏水100份，甲醛能够与PVDF膜表面的微结构反应或者结合，使之失去结合蛋白的疏水力或者空间结构域，聚环氧乙烷的水溶性强，在液相介质中，其分子表面的醚键带有微弱的负电荷，在Ca2+离子的参与下，可将带正电的表面蛋白或带负电荷的糖蛋白通过Ca2+桥相连，从而使细胞发生聚集、融合，明胶是一种大分子的亲水胶体，具有适当的表面活性。具体的，缓冲液为三羟甲基氨基甲烷溶液、3－吗啉丙磺酸溶液中的一种，属于生物缓冲剂。具体的，去污剂为吐温－20，有抗原修复的作用，与膜疏水性吸附，有很强的对非特异性吸附的洗脱作用，同样可以降低蛋白间的疏水作用，可提高特异性抗体的识别能力。具体的，非免疫血清为鱼血清，鱼血清具有良好的特性，不与哺乳动物抗体反应，蛋白A反应产生假阳性；不掩盖、破坏结合位点产生假阴性；对包被的反应物质有稳定作用；含有在室温和室温以下易溶的组分；不含哺乳动物可能会有的传染性物质，保护操作人员；批件的一致性良好，变异小，具有传统动物非免疫血清所不具有的特性。一种用于免疫细胞p16染色的封闭液的制备方法，包括以下步骤：步骤一、将蒸馏水置于容器中，再将脱脂奶粉放入，进行溶解。步骤二、将脱脂奶粉溶液置于搅拌机中，向脱脂奶粉溶液中加入甲醛、聚环氧乙烷和明胶，进行均匀搅拌，搅拌机的转速为300－350r/min，搅拌时间为5－8min。步骤三、将非免疫血清、缓冲液和去污剂加入到搅拌机中进行搅拌，搅拌机的转速为120－200r/min，搅拌时间为3－5min，并调节pH至7.2－7.6，制得封闭液。实施例2：一种用于免疫细胞p16染色的封闭液，包括如下重量份的原料：非免疫血清16份、缓冲液60份、脱脂奶粉30份、甲醛18份、去污剂20份、聚环氧乙烷12份、明胶14份、蒸馏水120份，甲醛能够与PVDF膜表面的微结构反应或者结合，使之失去结合蛋白的疏水力或者空间结构域，聚环氧乙烷的水溶性强，在液相介质中，其分子表面的醚键带有微弱的负电荷，在Ca2+离子的参与下，可将带正电的表面蛋白或带负电荷的糖蛋白通过Ca2+桥相连，从而使细胞发生聚集、融合，明胶是一种大分子的亲水胶体，具有适当的表面活性。具体的，缓冲液为三羟甲基氨基甲烷溶液、3－吗啉丙磺酸溶液中的一种，属于生物缓冲剂。具体的，去污剂为吐温－20，有抗原修复的作用，与膜疏水性吸附，有很强的对非特异性吸附的洗脱作用，同样可以降低蛋白间的疏水作用，可提高特异性抗体的识别能力。具体的，非免疫血清为鱼本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种用于免疫细胞p16染色的封闭液，其特征在于，包括如下重量份的原料：非免疫血清6－16份、缓冲液40－60份、脱脂奶粉20－30份、甲醛6－18份、去污剂10－20份、聚环氧乙烷4－12份、明胶4－14份、蒸馏水100－120份。/n
【技术特征摘要】
1.一种用于免疫细胞p16染色的封闭液，其特征在于，包括如下重量份的原料：非免疫血清6－16份、缓冲液40－60份、脱脂奶粉20－30份、甲醛6－18份、去污剂10－20份、聚环氧乙烷4－12份、明胶4－14份、蒸馏水100－120份。
2.根据权利要求1所述的一种用于免疫细胞p16染色的封闭液，其特征在于，包括如下重量份的原料：非免疫血清8－14份、缓冲液42－58份、脱脂奶粉22－28份、甲醛8－16份、去污剂12－18份、聚环氧乙烷6－10份、明胶6－12份、蒸馏水102－118份。
3.根据权利要求2所述的一种用于免疫细胞p16染色的封闭液，其特征在于，包括如下重量份的原料：非免疫血清10－12份、缓冲液44－56份、脱脂奶粉24－26份、甲醛10－14份、去污剂14－16份、聚环氧乙烷8－9份、明胶8－10份、蒸馏水104－116份。
4.根据权利要求3所述的一种用于免疫细胞p16染色的封闭液，其特征在于，包括如下重量份的原料：非免疫血清11份、缓冲液50份、脱脂奶粉25份、甲醛12份、去污剂15份、聚环氧乙烷8份、明胶9份、蒸馏水110份。
5.根据权利要求1-4任意一项所述的一种用于免疫细胞p1...
【专利技术属性】
技术研发人员：朱峻，杰西卡·朱，
申请(专利权)人：深圳市森盈生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44
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