一株防治畜禽细菌性腹泻的罗伊氏乳杆菌及其应用制造技术

技术编号:26526638 阅读:182 留言:0更新日期:2020-12-01 13:57
本发明专利技术公开了一株防治畜禽细菌性腹泻的罗伊氏乳杆菌及其应用。所述罗伊氏乳杆菌为DBN‑JP,其保藏号CGMCC No.19493。本发明专利技术所述罗伊氏乳杆菌菌体、发酵液及发酵上清液可以作为添加剂用于制备动物饲料或添加到动物饮水中或单独饲喂,对幼年动物具有刺激其胃肠道发育、提高动物免疫力、降低腹泻的作用,其中的动物包括但不限于猪、鸡、鸭等各种动物。该饲料在防治畜禽细菌性腹泻方面具有与抗生素硫酸粘菌素类似的功能,但无抗生素的副作用。

【技术实现步骤摘要】
一株防治畜禽细菌性腹泻的罗伊氏乳杆菌及其应用
本专利技术属于微生态领域,具体涉及一株防治畜禽细菌性腹泻的罗伊氏乳杆菌及其应用。
技术介绍
新生期和断奶期是限制我国集约化规模化养猪生产效率的两个关键环节。肠道的健康状况是影响仔猪生产性能和猪群整体成活率的关键因素。改善新生和断奶仔猪肠道健康,避免或减少肠道病原微生物感染是养猪生产中亟待解决的重大课题(印遇龙等,2010)。新生仔猪的肠道免疫系统发育不完善、肠道微生态环境平衡尚未建立、断奶仔猪因断奶应激极易感染病源微生物等因素是导致仔猪生长停滞、疾病多发的主要因素(杨凤娟等,2015)。近年来的研究表明,肠道微生物菌群结构的建立和平衡,可以促进仔猪肠道免疫系统的发育与成熟,完善新生仔猪和断奶仔猪的肠道功能,对仔猪肠道正常稳态的建立和功能的发挥具有重要的作用(Foushe等,2016)。鸡细菌性腹泻作为鸡病之一,影响着鸡群的生长发育速度,严重的会导致死亡给养殖户带来巨大损失。鸡细菌性腹泻的诱发病原体主要包括大肠杆菌、沙门氏菌、巴氏杆菌等,这些病原菌对抗生素敏感,养殖场通常通过在饲料中添加抗生素来进行预防,但大肠杆菌、沙门氏菌极易产生耐药性(韦成威,2020)。一直以来,都是通过在饲粮中添加抗生素起到防病治病、促进生长的作用。但长期大量使用抗生素导致了畜禽肠道菌群失调、致病菌耐药性增强、畜产品安全及环境的污染等问题,对动物健康甚至是人类的健康造成威胁。近年来,随着世界各国饲料“禁抗”模式的推进,我国农业部第2428号公告己于2016年11月1日禁止了硫酸粘杆菌素作为生长促进剂的使用,并发布第2638号公告决定于2018年5月停止生产喹乙醇、氨苯胂酸、洛克沙胂等用于食品动物生产。欧洲委员会于2017年做出“五年内欧盟禁止对仔猪使用高剂量氧化锌”的决定。随着《全国遏制动物源细菌耐药行动计划(2017-2020年)》的实施,开发安全有效的新型抗生素替代品已迫在眉睫。罗伊氏乳酸杆菌是普遍存在于人和动物肠道的有益乳酸杆菌(Hsueh等,2010),罗伊氏乳杆菌及其代谢产物具有诸多优良生理功能,对维持动物机体健康、促进动物生长发育有积极意义。罗伊氏乳杆菌的主要代谢产物之一罗伊氏菌素(reuterin),可以抑制有害菌如大肠杆菌、沙门氏菌等的生长,保护肠道的微生态平衡(杨家军等,2017),口服罗伊氏乳酸杆菌能显著降低腹泻的发病率和严重程度(Shornikova等,1997)。
技术实现思路
为了解决上述问题,本专利技术提供一株防治畜禽细菌性腹泻的罗伊氏乳杆菌(Lactobacillusreuteri)DBN-JP及其应用。本专利技术所提供的罗伊氏乳杆菌(Lactobacillusreuteri)DBN-JP,于2020年3月19日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所,保藏编号为:CGMCCNo.19493。该罗伊氏乳杆菌抗逆性强,抑菌能力强、具有防治畜禽细菌性腹泻的益生性能。本专利技术所提供的罗伊氏乳杆菌具有以下生物学性能:耐酸性能:在pH2.0模拟胃液条件下处理6h,存活率>100%。耐胆盐性能:在0.3%模拟胃液条件下处理8h,存活率>95%。耐热性能:加热温度≤80℃,15min不影响罗伊氏乳杆菌DBN-JP的抑菌能力。本专利技术所提供的罗伊氏乳杆菌制品,其活性成分为所述罗伊氏乳杆菌DBN-JP、发酵液及其发酵上清液。所述罗伊氏乳杆菌DBN-JP、发酵液及其发酵上清液具有下述至少一种用途:抑菌性能:抑制大肠杆菌k88最小抑菌浓度:罗伊氏乳杆菌DBN-JP发酵液对大肠杆菌k88的最小抑菌浓度为32μl/ml;抑制沙门氏菌最小抑菌浓度:罗伊氏乳杆菌DBN-JP发酵液对沙门氏菌最小抑菌浓度为64μl/ml;抑制金黄色葡萄球菌最小抑菌浓度:罗伊氏乳杆菌DBN-JP发酵液对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为32μl/ml。防治畜禽细菌性腹泻功能:仔猪动物试验结果表明:与空白组相比,在饲料中添加罗伊氏乳杆菌DBN-JP活性成分可通过显著降低盲肠中的大肠杆菌和沙门氏菌的数量,提高乳杆菌数量来防治仔猪细菌性腹泻(P<0.05);肉鸡试验结果表明,与空白组相比,在饲料中添加罗伊氏乳杆菌DBN-JP活性成分可通过显著降低肉鸡盲肠中大肠杆菌和沙门氏菌的数量,提高乳酸杆菌的数量来防治肉鸡细菌性腹泻(P<0.05)。提高动物免疫力功能:仔猪动物试验结果表明:与空白组相比,在饲料中添加罗伊氏乳杆菌DBN-JP活性成分可通过显著提高空肠黏膜中SIgA含量来提高仔猪的免疫力(P<0.05);肉鸡试验结果表明,与空白组相比,在饲料中添加罗伊氏乳杆菌DBN-JP活性成分,可通过显著提高肉鸡血液中的IgA和IgM的含量来提高肉鸡免疫力(P<0.05)。本专利技术所述罗伊氏乳杆菌菌体、发酵液及发酵上清液可以作为添加剂用于制备动物饲料或添加到动物饮水中或单独饲喂,对幼年动物具有提高动物免疫力、降低腹泻的作用,其中的动物包括但不限于猪、鸡、鸭等各种动物。该饲料在防治畜禽细菌性腹泻方面具有与抗生素硫酸粘菌素类似的功能。附图说明图1所示为罗伊氏乳杆菌DBN-JP生长曲线。图2所示为罗伊氏乳杆菌DBN-JP显微镜观察。图3所示为罗伊氏乳杆菌DBN-JP平板菌落形态。图4所示为罗伊氏乳杆菌DBN-JP耐酸能力。图5所示为罗伊氏乳杆菌DBN-JP耐胆盐能力。图6所示为罗伊氏乳杆菌DBN-JP产酸曲线。图7所示为罗伊氏乳杆菌DBN-JP基因组圈图。图8所示为罗伊氏乳杆菌DBN-JPGOC注释功能分布图。图9所示为罗伊氏乳杆菌DBN-JP发酵液最小抑菌浓度。图10所示为罗伊氏乳杆菌DBN-JP抑菌电镜照片。具体实施方式以下实施例用于说明本专利技术,但不用来限制本专利技术的范围。实施例1本专利技术的罗伊氏乳杆菌DBN-JP培养方法1.菌株:罗伊氏乳杆菌DBN-JP(由北京大北农科技集团股份有限公司饲用微生物工程国家重点实验室分离自仔猪肠道内容物);罗伊氏乳杆菌CICC6118、罗伊氏乳杆菌CICC6119、罗伊氏乳杆菌CICC6121(以上三株菌株购买自中国工业微生物菌种保藏中心);罗伊氏乳杆菌DSM17938(分离自BiGaia产品)。2.培养基其中所述的培养基为任何适合罗伊氏乳杆菌培养的培养基(如MRS培养基、RogosaSL培养基、TPY培养基或其它改良培养基等),本领域技术人员都知晓何种培养基适合罗伊氏乳杆菌培养。以下以MRS培养基为例:MRS培养基:酪蛋白胨10.0g,牛肉膏10.0g,酵母粉5.0g,葡萄糖5.0g,乙酸钠5.0g,柠檬酸二铵2.0g,Tween801.0g,K2HPO42.0g,MgSO4.7H2O0.2g,MnSO4.H2O0.05g,CaCO320.0g,琼脂15.0g,蒸馏水1.0L,pH6.8,115℃灭菌本文档来自技高网
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【技术保护点】
1.一株防治畜禽细菌性腹泻的罗伊氏乳杆菌DBN-JP,其保藏号:CGMCC No.19493。/n

【技术特征摘要】
1.一株防治畜禽细菌性腹泻的罗伊氏乳杆菌DBN-JP,其保藏号:CGMCCNo.19493。


2.一种权利要求1所述的防治畜禽细菌性腹泻的罗伊氏乳杆菌制品。


3.根据权利要求2所述的防治畜禽细菌性腹泻的罗伊氏乳杆菌制品,其特征在于,所述制品包含但不限于罗伊氏乳杆菌菌体、罗伊氏乳杆菌发酵液或罗伊氏乳杆菌发酵上清液中的一种或几种。


4.含有权利要求2或3所述的防治畜禽细菌性腹泻的罗伊氏乳杆菌制品的饲料添...

【专利技术属性】
技术研发人员:刘滢刘雪连沈红霞邓莉萍孙晓杰李晟硕韩绍良刘英俊王玉华王丽英
申请(专利权)人:北京大北农科技集团股份有限公司郑州市大北农饲料科技有限公司江西大北农科技有限责任公司
类型:发明
国别省市:北京;11

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