披露了用于在接受供体细胞的受试者中预防移植物抗宿主疾病(GVHD)的组合物和方法。特别地，披露了嵌合抗原受体(CAR)多肽，其可以与过继性细胞转移一起使用，以抑制同种异体反应性供体细胞。还披露了被工程化以表达这些CAR的免疫效应细胞，例如T细胞或自然杀伤(NK)细胞。因此，还披露了在接受移植供体细胞的受试者中抑制同种异体反应性供体细胞的方法，所述方法涉及被工程化以表达所披露的CAR的所披露的免疫效应细胞的过继性转移。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】结合CD83的嵌合抗原受体相关申请的交叉引用本申请要求于2018年2月23日提交的美国临时申请号62/634,435和于2018年5月30日提交的申请序列号62/677,783的权益，将这些申请特此通过引用以其全文并入本文。序列表本申请含有2019年2月21日创建的、以名为“320803-2200SequenceListing_ST25”的ASCII.txt文件的电子形式提交的序列表。将序列表的内容以其整体并入本文。
技术介绍
同种异体造血细胞移植(HCT)是用于血液恶性肿瘤的有效疗法，但是它受到急性移植物抗宿主病(GVHD)的限制。GVHD在供体T细胞响应于宿主细胞上遗传确定的蛋白时出现，并且其是与HCT相关联的高死亡率的关键促成因素。树突细胞(DC)在引起GVHD的同种异体T细胞刺激中起主要作用。供体DC是主要抗原递呈细胞，负责间接呈递移植后的同种异体抗原，并且此过程几乎在移植后立即开始。当前的免疫抑制措施可控制GVHD靶细胞，但损害患者的移植后免疫性。
技术实现思路
披露了嵌合抗原受体(CAR)多肽，其可以与过继性细胞转移一起使用以抑制同种异体反应性细胞，例如供体T细胞。所披露的CAR多肽在胞外结构域中含有可以结合CD83表达细胞的抗CD83结合剂。还披露了经遗传修饰以表达所披露的CAR多肽的免疫效应细胞。在一些实施例中，抗CD83结合剂是特异性结合CD83的抗体片段。例如，抗原结合结构域可以是特异性结合CD83的抗体的Fab或单链可变片段(scFv)。在一些实施例中，抗CD83结合剂是特异性结合CD83的适配体。例如，抗CD83结合剂可以是肽适配体，基于其结合CD83的能力，其选自随机序列库。抗CD83结合剂还可以是CD83的天然配体，或其能够结合CD83的变体和/或片段。在一些实施例中，抗CD83scFv可以包含具有CDR1、CDR2和CDR3序列的可变重(VH)结构域和具有CDR1、CDR2和CDR3序列的可变轻(VL)结构域。例如，在一些实施例中，VH结构域的CDR1序列包含氨基酸序列GFSITTGGYWWT(SEQIDNO:1)、SDGIS(SEQIDNO:7)、或SNAMI(SEQIDNO:13)；VH结构域的CDR2序列包含氨基酸序列GYIFSSGNTNYNPSIKS(SEQIDNO:2)、IISSGGNTYYASWAKG(SEQIDNO:8)、或AMDSNSRTYYATWAKG(SEQIDNO:14)；VH结构域的CDR3序列包含氨基酸序列CARAYGKLGFDY(SEQIDNO:3)、VVGGTYSI(SEQIDNO:9)、或GDGGSSDYTEM(SEQIDNO:15)；VL结构域的CDR1序列包含氨基酸序列TLSSQHSTYTIG(SEQIDNO:4)、QSSQSVYNNDFLS(SEQIDNO:10)、或QSSQSVYGNNELS(SEQIDNO:16)；VL结构域的CDR2序列包含氨基酸序列VNSDGSHSKGD(SEQIDNO:5)、YASTLAS(SEQIDNO:11)、或QASSLAS(SEQIDNO:17)；并且VL结构域的CDR3序列包含氨基酸序列GSSDSSGYV(SEQIDNO:6)、TGTYGNSAWYEDA(SEQIDNO:12)、或LGEYSISADNH(SEQIDNO:18)。例如，在一些实施例中，VH结构域的CDR1序列包含氨基酸序列GFSITTGGYWWT(SEQIDNO:1)，VH结构域的CDR2序列包含氨基酸序列GYIFSSGNTNYNPSIKS(SEQIDNO:2)，VH结构域的CDR3序列包含氨基酸序列CARAYGKLGFDY(SEQIDNO:3)，VL的CDR1序列包含氨基酸序列TLSSQHSTYTIG(SEQIDNO:4)，VL结构域的CDR2序列包含氨基酸序列VNSDGSHSKGD(SEQIDNO:5)，并且VL结构域的CDR3序列包含氨基酸序列GSSDSSGYV(SEQIDNO:6)。例如，在一些实施例中，VH结构域的CDR1序列包含氨基酸序列SDGIS(SEQIDNO:7)，VH结构域的CDR2序列包含氨基酸序列IISSGGNTYYASWAKG(SEQIDNO:8)，VH结构域的CDR3序列包含氨基酸序列VVGGTYSI(SEQIDNO:9)，VL的CDR1序列包含氨基酸序列QSSQSVYNNDFLS(SEQIDNO:10)，VL结构域的CDR2序列包含氨基酸序列YASTLAS(SEQIDNO:11)，并且VL结构域的CDR3序列包含氨基酸序列TGTYGNSAWYEDA(SEQIDNO:12)。例如，在一些实施例中，VH结构域的CDR1序列包含氨基酸序列SNAMI(SEQIDNO:13)，VH结构域的CDR2序列包含氨基酸序列AMDSNSRTYYATWAKG(SEQIDNO:14)，VH结构域的CDR3序列包含氨基酸序列GDGGSSDYTEM(SEQIDNO:15)，VL的CDR1序列包含氨基酸序列QSSQSVYGNNELS(SEQIDNO:16)，VL结构域的CDR2序列包含氨基酸序列QASSLAS(SEQIDNO:17)，并且VL结构域的CDR3序列包含氨基酸序列LGEYSISADNH(SEQIDNO:18)。在一些实施例中，抗CD83scFvVH结构域包含氨基酸序列：QVQLKESGPGLVKPSQSLSLTCSVTGFSITTGGYWWTWIRQFPGQKLEWMGYIFSSGNTNYNPSIKSRISITRDTSKNQFFLQLNSVTTEGDTARYYCARAYGKLGFDYWGQGTLVTVSS(SEQIDNO:19，VH-GBM00)。在一些实施例中，抗CD83scFvVL结构域包含氨基酸序列：QPVLTQSPSASASLGNSVKITCTLSSQHSTYTIGWYQQHPDKAPKYVMYVNSDGSHSKGDGIPDRFSGSSSGAHRYLSISNIQPEDEADYFCGSSDSSGYVFGSGTQLTVL(SEQIDNO:20，VL-GBM00)。在一些实施例中，抗CD83scFvVH结构域包含氨基酸序列：METGLRWLLLVAVLKGVQCQSVEESGGRLVTPGTPLTLTCTVSGFSLSNNAINWVRQAPGKGLEWIGYIWSGGLTYYANWAEGRFTISKTSTTVDLKMTSPTIEDTATYFCARGINNSALWGPGTLVTVSSGQPKAPSVFPLAPCCGDTPSSTVTLGCLVKGYLPEPVTVTWNSGTLTNGVRTFPSVRQSSGLYSLSSVVSVTSSSQPVTCNVAHPATNTKVDKTVAPSTCSKPTCPPPELLGGPSVFIFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQDDPEVQFTWYINNEQVRTARPPLREQQFNSTIRVVSTLPIAHQDWLRGKEFKCKVHNKALPAPIEKTISKARGQPLEPKVYTMGPPREELSSRSVSLTCMINGFYPSD本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种嵌合抗原受体(CAR)多肽，其包含CD83抗原结合结构域、跨膜结构域、细胞内信号传导结构域、和共刺激信号传导区域。/n
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180223 US 62/634,435;20180530 US 62/677,7831.一种嵌合抗原受体(CAR)多肽，其包含CD83抗原结合结构域、跨膜结构域、细胞内信号传导结构域、和共刺激信号传导区域。
2.如权利要求1所述的多肽，其中所述CD83抗原结合结构域是特异性结合CD83的抗体的单链可变片段(scFv)。
3.如权利要求2所述的多肽，其中该抗CD83scFv包含具有CDR1、CDR2和CDR3序列的可变重(VH)结构域和具有CDR1、CDR2和CDR3序列的可变轻(VL)结构域，其中该VH结构域的CDR1序列包含氨基酸序列SEQIDNO:1、SEQIDNO:7、或SEQIDNO:13；该VH结构域的CDR2序列包含氨基酸序列SEQIDNO:2、SEQIDNO:8、或SEQIDNO:14；该VH结构域的CDR3序列包含氨基酸序列SEQIDNO:3、SEQIDNO:9、或SEQIDNO:15；该VL的CDR1序列包含氨基酸序列SEQIDNO:4、SEQIDNO:10、或SEQIDNO:16；该VL结构域的CDR2序列包含氨基酸序列SEQIDNO:5、SEQIDNO:11、或SEQIDNO:17；并且该VL结构域的CDR3序列包含氨基酸序列SEQIDNO:6、SEQIDNO:12、或SEQIDNO:18。
4.如权利要求3所述的多肽，其中该抗CD83scFvVH结构域包含氨基酸序列SEQIDNO:19、SEQIDNO:48、SEQIDNO:49、SEQIDNO:50、SEQIDNO:51、SEQIDNO:52、或SEQIDNO:53。
5.如权利要求3或4所述的多肽，其中该抗CD83scFvVL结构域包含氨基酸序列SEQIDNO:20、SEQIDNO:54、或SEQIDNO:55。
6.如权利要求1至5中任一项所述的多肽，其中该抗CD83scFv包含氨基酸序列SEQIDNO:57、SEQIDNO:58、SEQIDNO:59、SEQIDNO:60、SEQIDNO:61、SEQIDNO:62、SEQIDNO:63、SEQIDNO:64、SEQIDNO:65、SEQIDNO:66、SEQIDNO:67、SEQIDNO:68、SEQIDNO:69、SEQIDNO:70、或SEQIDNO:71。
7.如权利要求1至6中任一项所述的多肽，其中该共刺激信号传导区域包含共刺激分子的胞质结构域...
【专利技术属性】
技术研发人员：马可·达维拉，布莱恩·贝茨，
申请(专利权)人：H·李·莫菲特癌症中心研究所公司，
类型：发明
国别省市：美国;US
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