细胞毒性药物的结合物和所述结合物的前体药物形式制造技术

本发明专利技术涉及细胞毒性药物的特定结合物和所述结合物的前体药物形式，用于治疗癌症和炎性疾病。所述结合物由式(I)及其可药用盐表示，在式中：A表示源自于细胞毒性药物的原子团，G是自毁性组成部分，并且m是0或1。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】细胞毒性药物的结合物和所述结合物的前体药物形式
本专利技术涉及用于治疗癌症和炎性疾病的细胞毒性药物的特定结合物和所述结合物的前体药物形式。
技术介绍
癌症和炎性疾病是当今最常见的疾病。具体来说，癌症是工业化国家中最重要的死亡原因之一，目前被诊断出患有癌症的人数持续增长迄今为止已经开发出几种治疗方式，然而化学疗法仍然是唯一可用于对抗循环肿瘤例如淋巴瘤和白血病以及转移肿瘤的疗法。在化学疗法中，一种策略在于抑制微管蛋白的聚合并因此阻止细胞分裂(抗有丝分裂剂)。这可以通过使用尾海兔素(dolastatin)家族的化合物，特别是天然尾海兔素10来实现，所述化合物可以从印度洋海兔Dolabellaauricularia中分离，由四个氨基酸构成，其中三个是其特有的。尾海兔素10的合成衍生物例如奥瑞他汀(auristatin)PE、奥瑞他汀E和单甲基奥瑞他汀E(MMAE)也已存在，并被证明是有效的抑制剂。这些化合物的主要缺陷在于缺乏对癌细胞的选择性，导致健康组织的破坏和由此严重的副作用，例如脱发或恶心。这些活性药剂的蛋白质-药物结合物的开发，已成为克服选择性缺乏的一种简洁有效的策略。蛋白质-药物结合物是迄今为止增长最快的一类高效活性药物成分。蛋白质-药物结合物构建物通常包含共价附连到连接物基团一端的蛋白质例如抗体，所述连接物基团的另一端是细胞毒素，即高效灭杀细胞的毒素。所述生物分子的蛋白质组分提供靶特异性。一旦所述结合物进入细胞后，所述毒素通过例如细胞酶的作用而被释放。事实上，大多数蛋白质-药物结合物都针对癌症治疗。除了市售的曲妥珠单抗-Emtansine(被称为T-DM1或)和本妥昔单抗-vedotin之外，许多蛋白质-药物结合物目前正经历用于各种不同癌症适应症的临床试验。这些结合物的活性的主要先决条件之一是在被癌细胞内化后细胞毒性药物的高效释放，而所述蛋白质与药物之间的连接物，在所述连接物到达其生物靶之前在血液循环中应该是稳定的。在这个方面，通过将可被酶切割的连接物引入到结合物构建中，实现了真正的突破。因此，WO2015/118497描述了式(I)的β-葡萄糖醛酸酶响应性白蛋白结合型结合物，其中A通常是MMAE。它的马来酰亚胺末端组成部分旨在用于在静脉内给药后提供与循环白蛋白的选择性结合。对葡萄糖醛酸酶敏感的葡萄糖醛酸苷组成部分也存在于所述分子中，并被连接到自反应臂。由于白蛋白在肿瘤中积累并且β-葡萄糖醛酸酶存在于肿瘤环境中，因此所述化合物到达肿瘤部位，在那里所述酶催化所述糖苷键的切割，然后引发药物(MMAE)的释放。所述结合物作为两种异构体的1:1混合物存在，其可变立体中心在所述自反应臂上(在式(I)上用星号标注)。
技术实现思路
本专利技术人证实，上述结合物的两种异构体，它们不能利用常规技术分离，可以从前期中间体的HPLC对映异构体分离来获得。所述两种分离的异构体被证明是稳定的，特别是在人类血浆中，但可变立体中心具有R构型的异构体与另一者相比表现出更高的酶切割动力学。从一种异构体观察到的这种更高的动力学更加出人意料，因为所述立体中心不是被所述酶识别的药效团的一部分。这个出人意料的特点对于具有较低酶表达的患者可能特别有利。本专利技术人还已经证明，将自毁性组成部分插入到所述结构中，更具体来说插入到所述细胞毒性药物与所述结合物的其余部分之间，可以提高所述结合物的稳定性，同时保持其被切割(即释放细胞毒性药物)的能力。本专利技术涉及的所述异构体是由式(I)及其可药用盐表示的结合物：其中：A表示源自于细胞毒性药物的原子团，G是自毁性组成部分，并且m是0或1。本专利技术还提供了一种制备如上所定义的结合物的方法，所述方法包括下述步骤：a)从4-羟基-3-硝基苯甲醛制备消旋-4-(1-羟基丁-3-炔-1-基)-2-硝基-苯酚；b)优选地通过手性高效液相色谱，分离(R)-4-(1-羟基丁-3-炔-1-基)-2-硝基-苯酚；c)将(R)-4-(1-羟基丁-3-炔-1-基)-2-硝基-苯酚与葡萄糖醛酸衍生物例如乙酰溴代-α-D-葡萄糖醛酸甲酯在碱性条件下反应；d)将在步骤(c)中获得的化合物与氯代甲酸4-硝基苯基酯反应；e)将在步骤(d)中获得的化合物与细胞毒性药物或与A-G-H组成部分结合，其中A表示源自于细胞毒性药物的原子团，并且G表示自毁性组成部分；f)将在步骤(e)中获得的化合物的葡萄糖醛酸苷组成部分去保护，优选地在碱性条件下去保护；并且g)将在步骤(f)中获得的化合物与式N3-(CH2-CH2-O)10-(CH2)2-NH-(CO)-(CH2)5-X的叠氮化物结合，其中X是马来酰亚胺基团。本专利技术还涉及一种前体药物，其包含如上所定义的结合物的至少一个分子，所述结合物的分子通过共价键连接到蛋白质分子或其片段或衍生物，所述蛋白质分子优选为白蛋白。本专利技术还涉及一种药物组合物，其至少包含有效量的至少一种如上所定义的结合物或至少一种如上所定义的前体药物，以及可药用载体。本专利技术还独立地涉及如上所定义的结合物、如上所定义的前体药物或如上所定义的药物组合物用于治疗癌症和/或炎性疾病。附图说明图1示出了化合物R1a的来自于X-射线晶体学的分子结构。位移椭球以50％的概率水平画出。图2示出了在化合物R5和S5的血浆溶液中β-葡萄糖醛酸酶诱导的MMAE释放的动力学。图3示出了在化合物R6和S6的血浆溶液中β-葡萄糖醛酸酶诱导的MMAF释放的动力学。图4示出了在化合物R7和S7的血浆溶液中β-葡萄糖醛酸酶诱导的SN-38释放的动力学。图5示出了在化合物R8和S8的血浆溶液中β-葡萄糖醛酸酶诱导的多柔比星释放的动力学。图6示出了化合物R5和S5在pH7.4的PBS中的稳定性。图7示出了化合物R5和S5的血浆结合动力学。图8示出了白蛋白结合的R5和S5的血浆稳定性。图9示出了R5与S5的1:1混合物的HPLC图谱。图10示出了R4与S4的1:1混合物的HPLC图谱。专利技术详述结合物本专利技术涉及一种具有下述式(I)的结合物：其中：A表示源自于细胞毒性药物的原子团，G是自毁性组成部分，并且m是0或1，及其可药用盐。在本专利技术的情形中，“可药用盐”是指本专利技术的结合物或前体药物或药物与碱金属、碱土金属或铵的盐，包括使用有机铵碱获得的盐，或本专利技术的结合物或前体药物或药物与有机酸或无机酸的盐。更特别适合于本专利技术的盐可以是钠盐、钾盐、钙盐、镁盐、季铵盐例如四甲基铵或四乙基铵，以及与氨和可药用有机胺例如甲胺、二甲胺、三甲胺、乙胺、三乙胺、乙醇胺或三(2-羟基乙基)胺的加成盐。本专利技术的结合物或前体药物或药物与适合于本专利技术的无机酸的盐，可以使用盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸或磷酸来获得。本专利技术的结合物或前体药物或药物与适合于本专利技术本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种结合物，其由式(I)及其可药用盐表示：/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180403 EP 18305390.91.一种结合物，其由式(I)及其可药用盐表示：



其中：
A表示源自于细胞毒性药物的原子团，
G是自毁性组成部分，并且
m是0或1。


2.根据权利要求1所述的结合物，其中所述细胞毒性药物选自：蒽环类化合物例如多柔比星、尾海兔素例如尾海兔素10、尾海兔素15、奥瑞他汀E、奥瑞他汀EB(AEB)、奥瑞他汀EFP(AEFP)、单甲基奥瑞他汀F(MMAF)、单甲基奥瑞他汀D(MMAD)、单甲基奥瑞他汀E(MMAE)、5-苯甲酰基戊酸-AE酯(AEVB)或其衍生物，和喜树碱类似物例如SN-38。


3.根据权利要求2所述的结合物，其中所述细胞毒性药物选自：SN-38、多柔比星、MMAF、MMAE、MMAD和其衍生物。


4.根据权利要求1至3中任一项所述的结合物，其中G由选自以下的结构式表示：





5.一种前体药物，其包含根据权利要求1至4中任一项所述的结合物的至少一个分子，所述结合物的分子通过共价键连接到蛋白质分子或其片段或衍生物，所述蛋白质分子优选为白蛋白。


6.根据权利要求5所述的前体药物，其中所述共价键使用所述白蛋白第34位中半胱氨酸的巯基官能团来建立。


7.根据权利要求5所述的前体药物，其由式(II)及其可药用盐表示：



其中：
A表示源自于细胞毒性药物的原子团，
Prt表示源自于蛋白质的原子团；
n为0.1至16，优选0.1至8，
G是自毁性组成部分，并且

【专利技术属性】
技术研发人员：奥莱克桑德·科涅夫，塞尔吉·科洛迪奇，让伊夫斯·邦内福伊，
申请(专利权)人：辛迪维亚公司，
类型：发明
国别省市：法国;FR